化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎病毒感染性标志物的价值

戴小宇

江西省吉安市永新县人民医院 （江西吉安 343400）

随着病情的发展，乙型肝炎病毒（HBV）感染可演变为急慢性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病，现已成为危害生命健康的公共卫生问题。因此，及时、准确地监测HBV感染，对防治乙型肝炎具有重要意义[1]。现阶段，临床上最常采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法对血清中的乙型肝炎标志物水平进行测定，但在实际应用中其无法对标志物水平进行定量分析，难以准确判断HBV感染情况。化学发光免疫分析（CLIA）法是近年来发展起来的检测乙型肝炎血清标志物的方法，具有操作简单、灵敏度及特异度高等优势，同时还可进行定量分析，较好地弥补了ELISA法检测的不足[2-3]。本研究采用CLIA法与ELISA法检测乙型肝炎病毒感染性标志物，对两者临床应用价值进行对比分析。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2018年11月江西省吉安市永新县人民医院接收的疑似乙型肝炎患者165例，其中男86例，女79例；年龄11～78岁，平均（42.86±3.82）岁。本研究经医院医学伦理委员会批准。

纳入标准：可耐受且配合本研究；均自愿参与研究，且已签署知情同意书。排除标准：合并其他系统严重疾病患者；存在其他肝脏疾病患者；无法自主配合实施检测患者。

1.2 方法

抽取患者清晨空腹肘静脉血4 ml，于室温下放置30 min后开始析出血清，即将血液标本放于离心机内，以3 500 r/min离心15 min，留取上层血清待检。将获得的血清分为均等的2份，分别采用CLIA法及ELISA法对血清中的乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎E抗原（HBeAg）、乙型肝炎核心抗体（HBcAb）、乙型肝炎E抗体（HBeAb）5项乙型肝炎病毒感染性标志物进行检测。其中，CLIA检测仪采用安图公司生产的A2000化学发光仪，ELISA检测仪采用上海科华有限公司生产的KHB-st-360酶标仪。所有检测步骤均严格遵循仪器操作要求及试剂盒相关说明进行。

1.3 临床评价

（1）比较两种方法检测HBV感染性标志物的结果，当HBsAb 水平≥10.0 mIU/ml、HBsAg水平≥0.2 ng/ml、HBeAg水平 ≥0.05 NCU/ml、HBcAb 水 平 ≥1.5 NCU/ml、HBeAb 水 平≥2.0 NCU/ml时，可判定HBV感染性标志物为阳性[4]。（2）比较两种方法检测低水平HBsAg的结果及灵敏度。

1.4 统计学处理

采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV感染性标志物检测结果

CLIA法检测HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性率均高于ELISA法，差异有统计学意义（P＜0.05）；两种方法检测HBsAb及HBcAb的阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 165例患者经两种方法检测HBV感染性标志物的结果比较[例（%）]

2.2 低水平HBsAg检测结果

当HBsAg低水平检测值为1.01～3.00 ng/ml时，两种检测方法检测结果相同；当HBsAg低水平检测值≤1.00 ng/ml时，ELISA法检测结果低于CLIA法。见表2。

表2 两种方法检测低水平HBsAg的结果比较（例）

2.3 HBsAg灵敏度检测结果

取1.00 ng/ml HBsAg定值作为参照血清，使用阴性血清进行倍比稀释，分别采用CLIA法及ELISA法检测HBsAg灵敏度，结果显示，采用CLIA法检出最低浓度为0.031 ng/ml，采用 ELISA 法检出最低浓度为0.128 ng/ml。

3 讨论

ELISA法是临床上诊断乙型肝炎最传统的方法，具有操作简单、价格低、速度快等优势，在乙型肝炎疾病诊断、监测及治疗中具有一定的作用。但ELISA法在检测中仅可做定性分析，无法做定量检测，若血液标本中的待测定物质浓度过高，则会在钩状效应下出现假阴性情况，并且在检测过程中受到较多因素的影响，使得结果稳定性降低，在临床实际应用中受到限制[5]。

近年来，随着医学技术的快速发展，CLIA法在临床上的应用较好地弥补了ELISA法无法定量检测的不足。CLIA法是借助发光底物自身的发光强度直接进行测定的分析技术，现已成为HBV感染性标志物测定的重要方法[6]。本研究结果显示，CLIA法检测 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBsAb及HBcAb的阳性率均高于ELISA法，分析原因为，CLIA法采用的固相载体为顺磁性微粒，其颗粒面积较大、体积较小，在检测中具有较大的反应面积；由于标志物可循环利用，有效延长了检测过程中标志物的发光时间，同时可准确地显示HBV感染的全过程，极大地提高了病毒阳性检出率。本研究结果显示，CLIA法检测HBsAg的灵敏度较高，表明采用CLIA法可尽早检出HBsAg，特别对于急性乙型肝炎患者，快速检出HBsAg水平利于临床尽快展开治疗。

综上所述，与ELISA法检测比较，CLIA法在检测HBV病毒感染性标志物中阳性率及灵敏度均较高，且重复性好，可有效避免低水平HBsAg出现的漏诊及假阴性情况，较好地保证检测结果的准确性。