复方痔瘘洗剂质量标准制定

王新华　段方红

【摘  要】目的：建立较为完善的复方痔瘘洗剂的质量标准。方法：采用化学方法鉴别复方痔瘘洗剂中芒硝的化学成份，采用薄层色谱法鉴别复方痔瘘洗剂中当归、防风有效成份，采用高效液相色谱法测定防风中的有效成份5-0-甲基维斯阿米醇苷含量。结果：化学鉴别专属性强、灵敏度高，薄层色谱显色清晰，高效液相色谱法精密度、重复性符合要求。结论：该方法检测结果准确可靠，简便易于操作，可用于复方痔瘘洗剂的质量控制。

【关键词】复方痔瘘洗剂;薄层色谱;高效液相色谱;质量标准

【中图分类号】R726.12      【文献标识码】B      【文章编号】1004-7484（2020）09-0267-01

复方痔瘘洗剂为本院临床使用多年的协定处方制剂，是一种主要治疗痔疮的外用洗液。该方由鱼腥草、芒硝、当归、防风、花椒、马齿苋、白矾、侧柏叶等组成，具有清热散结，活血止血，消肿止痛的作用，用于治疗痔疮等疗效明显，副作用少。该制剂质量控制目前仅参照《中国药典》（2015版）制剂通则洗剂项下，进行制剂成品的PH值、装量和微生物限度等项目检查。为制定较为完善的制剂质量标准，更好地控制制剂质量，现增加了该制剂中芒硝的化学成份鉴别^[1]，以及当归和防风的薄层色谱法（TLC）鉴别^[1]，采用高效液相色谱法（HPLC）测定防风中的有效成份5-0-甲基维斯阿米醇苷含量^[2]。报道如下：

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津LC-20A高效液相色谱仪（日本岛津）;SPD-10AVP检测站（日本岛津）;LC-solusion色谱工作站;KB-500DB型数控超声波清洗器;FW80，METTLERAE240型分析天平

1.2 试药 复方痔瘘洗剂（编号151023，本院提供）;当归对照药材（批号：120927-201516）;

防风对照药材（批号：120947-201409）;5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品（批号：111523-201509）

以上对照均来自中国食品药品检定研究院;甲醇（色谱纯），纯化水（自制），其他试剂（分析纯）。

2 方法与结果

2.1 鉴别

2.1.1 处方中芒硝的鉴别 取本品1ml至10ml刻度试管中，加水稀释至刻度，摇匀，照一般鉴别试验^[1]项下钠盐与硫酸盐的鉴别反应试验。钠盐鉴别试验为取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即现鲜黄色。硫酸盐鉴别试验为取供试品3ml，滴加醋酸铅试液，即生成白色沉淀;分离，沉淀在氢氧化钠试液中溶解。

2.1.2 处方中当归的TLC鉴别

供试品溶液的制备：取本品20ml，用乙醚提取2次，每次10ml，合并乙醚液，挥至1ml，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：取当归对照药材0.5g，加乙醚20ml，超聲处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚1ml使溶解，作为对照药材溶液。

阴性样品溶液的制备：取处方中药材，除去当归，按本制剂制备工艺制备不含当归的阴性样品，同上述方法制成阴性样品溶液。

方法：照薄层色谱法^[1]试验，吸取供试品溶液、阴性样品溶液20μl、对照药材溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性样品在相应的位置处没有荧光斑点。样品斑点清晰，分离效果好，3批样品检测重现性好。试验结果见图1。

2.1.3处方中防风的TLC鉴别

供试品溶液的制备：取本品20ml，加乙醚振摇提取2次，每次20ml ，弃去乙醚液。水液加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml， 合并正丁醇液，加入氨试液40ml，摇匀，放置使分层，分取正丁醇液，蒸干，残渣加乙醇lml使溶解，作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备：取防风对照药材1g，加水50ml，煎煮30分钟，滤过，滤液浓缩至20ml，同法制成对照药材溶液。

对照品溶液的制备：取5-0-甲基维斯阿米醇苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性样品溶液的制备：取处方中药材，除去防风，按本制剂制备工艺制备不含防风的阴性样品，同上述方法制成阴性样品溶液。

方法：照薄层色谱法^[1]试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性样品在相应的位置处没有荧光斑点。样品斑点清晰，分离效果好，3批样品检测重现性好。试验结果见图2。

2.2 检查 按照制剂通则洗剂项下有关的各项规定检查^[1]。

2.3 含量测定

2.3.1 对照品溶液制备^[2] 精密称取5一O一甲基维斯阿米醇苷对照品适量，用甲醇稀释，制成1ml含5一O一甲基维斯阿米醇苷12.81ug溶液备用。

2.3.2 供试品溶液的制备^[2] 取复方痔瘘洗剂，用0.45um微孔滤膜过滤，精密量取滤液50mL置蒸发皿水浴浓缩至5ml左右，移至量50mL瓶中，加甲醇定容至刻度。

2.3.3 样品测定 分别取对照品溶液以及按“2.3.2”项下制成的三批样品溶液，依法^[1]测定，计算含量即得。

3 讨论

关于定量分析指标成份的确定。对防风中有效成份研究，国内文献报道^[3-5]较多，大多采用高效液相色谱法对其中的有效成份进行定量分析。鉴于其有效成份中5一O一甲基维斯阿米醇苷为该中药发挥药效作用的主要化学成份^[6]，同时也为了便于定量分析，防止其他成分干扰^[7]，本文选择其中的有效成份之一5一O一甲基维斯阿米醇苷作为复方痔瘘洗剂定量分析的指标。

参考文献

[1]《中国药典》2015年版4部，中国医药科技出版社[M].

[2]田晓东，俞桂新，蓝悠，李晖.HPLC测定消痔坐浴剂中5一O一甲基维斯阿米醇苷的含量[J].《江西中医药》，2013， 44 （5）：54-56

[3]张特立，于春月，魏兴波，单静思，刘肖莹.防风有效成分的提取工艺研究[J].《黑龙江医药科学》，2012，35（3）：26-27

[4]姜艳艳，刘斌，石任兵.高效液相色谱法测定防风色原酮部位中4种成分含量[J].北京中医药大学学报，2006，29（2）：128.

[5]胡紫艳，冯振斌，蒋健.HPLC测定不同产地防风中4种有效成分的含量[J].《中国执业药师》，2016，13（11）：32

[6]严叶霞.反相高效液相色谱法测定防风通圣丸中5-0一甲基维斯阿米醇苷的含量[J].《中南药学》，2012，10（2）：102

[7]张锐，彭杨锐.HPLC法测定防芷鼻炎胶囊中5-0一甲基维斯阿米醇苷[J].《中草药》2007，38（9）：1343

作者简介：

王新华（1965-），男，山东长清，本科，副主任药师，研究方向：主要从事药事管理工作。