唾液巨噬细胞迁移抑制因子水平与原发性干燥综合征的相关性研究

强璐 王雨萌 裴婷婷

[摘要] 目的 检测原发性干燥综合征（pSS）患者唾液巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）水平并探讨与疾病严重性的关系。 方法 纳入2009年10月～2018年10月于北京中医药大学第三附属医院（以下简称“我院”）确诊的pSS患者作为pSS组（96例）;另纳入我院同期年龄及性别匹配的健康人群作为对照组（70名）。评价pSS患者疾病活动度，比较各组唾液MIF水平，评价唾液MIF水平与pSS发病的关系，分析唾液MIF水平与干燥综合征评分（ESSDAI评分）的相关性。 结果 pSS组唾液MIF水平显著高于对照组，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。唾液MIF水平是pSS的独立危险因素[OR（95%CI）=1.996（1.339～2.977），P < 0.01]。唾液MIF水平与ESSDAI评分呈正相关（r = 0.276，P < 0.01）。 结论 唾液MIF水平有望作为预测pSS发生发展的重要生物标志物。

[关键词] 原发性干燥综合征;巨噬细胞迁移抑制因子;唾液;生物标志物

[中图分类号] R781.4          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）10（a）-0103-04

The correlation between salivary macrophage migration inhibitory factor levels and primary Sj？魻gren′s syndrome

QIANG Lu   WANG Yumeng   PEI Tingting

Department of Stomatology， Beijing University of Chinese Medicine Third Affiliated Hospital，Beijing   100029， China

[Abstract] Objectives To detect salivary macrophage migration inhibitory factor （MIF） level in patients with primary Sj？魻gren′s syndrome （pSS） and investigate the correlation between MIF level and disease activity. Methods The pSS patients diagnosed in Beijing University of Chinese Medicine Third Affiliated Hospital （hereinafter referred to as "our hospital"） from October 2009 to October 2018 were enrolled as pSS group （96 cases）; the other age- and sex- matched healthy people were included as control group （70 people） during the same period of our hospital. The disease activity of patients with pSS were evaluated， and the salivary MIF level of each group were compared. The relationship between salivary MIF level and the incidence of pSS was evaluated， while the correlation between saliva MIF levels and EULAR Sjogren′s syndrome disease activity index （ESSDAI） were analyzed. Results The salivary MIF level in the pSS group was significantly higher than that in the control group， and the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. Salivary MIF level was the independent risk factors for pSS [OR（95%CI）=1.996（1.339-2.977），P < 0.01]. Salivary MIF level was positively correlated with ESSDAI （r = 0.276，P < 0.01）. Conclusion Salivary MIF level is expected to be an important biomarkers for predicting the development of pSS.

[Key words] Primary Sj？魻gren′s syndrome; Macrophage migration inhibitory factor; Salivary; Biomarker

原發性干燥综合征（primary Sj？魻gren′s syndrome，pSS）是一种以外分泌腺高度淋巴细胞浸润及破坏为特征的系统性自身免疫疾病。病理特征是淋巴细胞浸润外分泌腺（包括涎腺和泪腺），腺体组织进行性破坏，分泌功能逐渐减退甚至最终丧失[1-4]。pSS常表现为进行性口干、眼干及肾脏、肺、甲状腺和肝脏等多器官受累。同时，pSS患者有较高罹患恶性淋巴瘤的风险[5-8]。因此，对pSS进行早期诊断和风险评估有十分重要的临床意义。作为重要的免疫炎症调节因子，巨噬细胞迁移抑制因子（macrophage migration inhibitory factor，MIF）在系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病发生发展中起着重要的作用[9-13]。然而，MIF在pSS患者血液中水平及与pSS严重程度关系尚未明确，本研究拟检测pSS患者唾液MIF水平并探讨与疾病严重性的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究纳入2009年10月～2018年10月在北京中医药大学第三附属医院（以下简称“我院”）确诊的pSS患者，共96例。其中女90例，男6例，年龄16～72岁。纳入标准：根据2002年干燥综合征国际分类（诊断）标准[14]确诊的pSS病例。排除标准：①吸烟;②近2周内使用过抗生素、抗真菌药、免疫抑制剂等药物;③头颈部放疗史、化疗史;④合并结节病、丙型肝炎、淀粉样变、艾滋病、移植物抗宿主病淋巴瘤等。另选取同期在我院进行体检的健康成年人70名作为对照组，分别对年龄、性别进行匹配。所有入选者均签署知情同意书，本研究通过我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法与观察指标

1.2.1 唾液样本采集  采用非刺激方法收集唾液标本。收集前嘱受试者坐于治疗椅上，用生理盐水漱口3次。双眼平视前方，保持头位端正，口腔腺体分泌唾液自然流于口底。将空针注射器置于口底唾液池中间，尽量不触碰黏膜，吸取1 mL唾液并装入无菌EP管中，3000 r（半径16.87 cm）离心5 min后立即置于-80℃冰箱中备用[15]。

1.2.2 ELISA检测  采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各唾液样本MIF水平，ELISA试剂盒购自美国R&D公司，各组标本的吸光光度值由BIO-RAD680酶标仪检测，按照使用说明书进行操作。

1.2.3 pSS疾病活动度评价  采用干燥综合征评分（ESSDAI）评价pSS患者疾病活动度[15]。ESSDAI评分根据淋巴结病、全身情况、腺体受累、关节异常、皮肤表现、肌肉受累、泌尿系统、呼吸系统、外周神经系统、血液系统、中枢神经系统及生物学指标等12个方面病变程度进行赋值，是评价pSS活动性的最客观全面的评分标准之一[16]。

1.3 统计学方法

运用SPSS 22.0统计软件进行数据分析。正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。非正态分布计量资料以中位数（M）或四分位数（P25，P75）表示，采用Mann-Whitney U检验。计数资料以例数或百分比表示，采用χ2检验。采用多因素Logistic逐步回归法评价各变量与pSS发病的关系，采用Spearman相关分析评价pSS患者中唾液MIF水平与ESSDAI评分的关系。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基本资料及唾液MIF水平比较

两组间年龄、性别、体重指数（BMI）等基线数据比较，差异均无统计学意义（均P > 0.05）。而pSS组唾液MIF水平显著高于对照组，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。见表1。

2.2 不同变量与pSS发病的相关性

唾液MIF是pSS发病的危险因素[OR（95%CI）=1.996（1.339～2.977），P < 0.01]。见表3。

2.3 唾液MIF水平与ESSDAI评分的相关性

唾液MIF水平与ESSDAI评分呈正相关（r = 0.276， P = 0.007）。见图1。

3 讨论

本研究结果显示，pSS患者唾液MIF水平较健康人群显著升高，唾液高MIF水平是pSS发病的独立危险因素并与活动性相关。pSS临床诊断需要口腔科、风湿免疫科、眼科等多科室合作，目前仍缺乏诊断的“金标准”。唾液腺受累情况判定是pSS诊断的重要方面，唾液流率测定、唇腺活检和腮腺造影或同位素扫描是目前常采用的诊断方法。然而，唇腺活检和腮腺造影均因操作复杂且对患者有一定的创伤而难以在临床上多次反复应用，为临床预后、疗效判定及病情监测带来不小的困难。唾液标本的优点主要是无创、易采集等，易于被患者接受，故唾液标志物检查在pSS临床评估中起着越来越重要的作用，有望成为pSS早期诊断、筛查或病情监测重要指标之一。

MIF是一种具有独特结构的多效免疫调节因子，它能够通过先天性和适应性免疫通路，介导宿主对感染和胁迫的应答[17]。近年来研究发现，MIF与大量自身免疫性疾病相关[9-13]。在pSS患者血清和尿液中，也检测出了MIF水平的升高[18-19]。本研究结果显示，pSS患者唾液中MIF水平明显高于对照组，pSS患者唾液中MIF也处于高表达状态。MIF通过下游的信号通路刺激B细胞增殖，导致γ-球蛋白生成增多[20]。而γ-球蛋白广泛参与了pSS导致唾液腺损害的病理生理过程[21]。本研究评价了唾液MIF水平与pSS发病的独立相关性。结果显示，排除性别、年龄、BMI等混杂因素，唾液中MIF水平是预测pSS发病的独立危险因子。进一步研究发现，唾液MIF水平与反映pSS活动性的ESSDAI评分呈正相关。这可以证明唾液中MIF可以作为重要的生物标志物来预测pSS患者发病及活动性。然而，本研究中唾液MIF水平与ESSDAI评分的相关系数较小。因此，临床价值仍有待进一步评价。

综上所述，唾液MIF水平是pSS发病的独立危险因素，与疾病的活动性相关，有望通过检测唾液中的MIF水平对pSS进行风险评估及危险分层。但本研究結论还需多中心、大样本、前瞻性的研究来进一步证实。

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（收稿日期：2019-03-13  本文编辑：王晓晔）