安徽省部分猪场猪圆环病毒2型和3型感染情况调查

何长生 杨庆琳 王维 王倩 王军 周迎春 沈艳 刘华 占松鹤 朱良强

摘要 [目的]调查安徽省猪圆环病毒的感染情况。[方法]2018年，采用荧光定量PCR方法对来自安徽省3个地区12个猪场健康猪群的239份扁桃体样品进行了PCV2和PCV3检测。[结果] PCV2个体阳性率为67.4%（161/239）、群体阳性率为91.7%（11/12），PCV3个体阳性率为14.6%（35/239）、群体阳性率为58.3%（7/12），PCV2/PCV3混合感染个体阳性率为5.0%（12/239）、群体率阳性为41.7%（5/12）。不同生长阶段、不同地区和不同规模的生猪PCV2、PCV3及PCV2/PCV3混合感染存在差异。育肥猪PCV2感染率最高（84.3%），能繁母猪PCV3感染率（51.9%）及PC2/PCV3混合感染率（14.8%）最高;C地区PCV2感染率最高（89.9%），B地区PCV3感染率（36.2%）及PC2/PCV3混合感染率最高（8.8%）;中型猪场PCV2感染率最高（82.2%），大型猪场PCV3感染率（38.3%）及PC2/PCV3混合感染率最高（10.0%）。[结论] 安徽省猪群中存在PCV2和PCV3流行，需引起足够重视。

关键词 猪圆环病毒;感染率;调查

中图分类号 S852.65 +1文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2019）17-0100-03

Abstract [Objective] To investigate the infection status of porcine circovirus in Anhui Province. [Method]In 2018， 239 tonsils samples were collected from 12 healthy pig herds in A， B and C regions of Anhui Province to detect the infection situations of PCV2 and PCV3 by realtime PCR.[Result]  The individual detection rate （IDR） of PCV2 was 67.4%（161/239 in overall samples， and IDR of PCV3 was 14.6%（35/239）， and the mixed IDR of PCV2 / PCV3 was 5.0%（12/239）. The herd detection rate （HDR） of PCV2 was 91.7% （11/12） in overall pig farms， HDR of PCV3 was 58.3%（7/12）， and the mixed HDR of PCV2 / PCV3 was 41.7%（5/12）. PCV2，PCV3 and PCV2/PCV3 mixed infection had difference in different scales of pig farms in different regions at different stages. Fattening pigs had the highest IDR of PCV2 （84.3%）， and fertile sows had the highest IDR of PCV3 （51.9%） and mixed IDR of PC2 /PCV3 （14.8%）. Region C had the highest IDR of PCV2（89.9%） ，and region B had the highest IDR of PCV3 （36.2%） and IDR of PCV2/ PCV3 （8.8%）. Mediumscale pig farms had the highest IDR of PCV2 （82.2%），and largescale pig farms had the highest IDR of PCV3 （38.3%）and IDR of PCV2 / PCV3 （10.0%）.  [Conclusion] There were PCV2 and PCV3 prevalence in Anhui Province， and we should paid more attentions to it.

Key words Porcine circovirus;Infection rate;Investigation

豬圆环病毒（porcine circovirus，PCV）隶属圆环病毒科（Circovirdae）圆环病毒属（Circovirus），为单股负链DNA病毒，是迄今发现最小的动物病毒之一，可感染鸟类、鱼类、昆虫和哺乳动物。2016年前，猪圆环病毒有2个亚型，即PCV1和PCV2[1]。PCV1被认为是猪肾细胞PK-15污染物，但不产生细胞病变效应，对猪没有致病性[1]。PCV2可导致猪圆环病毒相关疾病（porcine circovirus associated disease，PCVAD），包括断奶仔猪多系统衰竭综合征（postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（porcine dermatitis and nephropathy syndrome ，PDNS）、猪呼吸道综合征（porcine respiratory disease complex，PRDC）、繁殖障碍（reproductive failure）等[1]。自1998年我国首次发现以来，PCV2在猪群中迅速蔓延开来，呈现出覆盖面广、感染率高等特征，已经成为危害我国养猪业的主要疫病之一[2-3]。2016年，美国学者Palinski等[4]和Phan等[5]利用高通量测序方法从暴发PDNS病症的母猪及其流产胎儿样品中发现了一种新的圆环病毒亚型，即PCV3。自2017年以来，多位学者均发现该病原在我国猪群中存在[6-8]。为了解安徽省猪群中PCV2和PCV3的感染情况，2018年对来自安徽省A、B、C 3个地区的 12个猪场开展了调查。

1 材料与方法

1.1 样品来源

利用扁桃体采集器，无菌采集来自A、B、C 3个地区12个猪场健康猪群的239份扁桃体样品（表1）。

1.2 主要试剂

PVC2荧光定量PCR检测试剂盒和PVC3荧光定量PCR检测试剂盒均购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，批号分别为PCV220180208P和PCV320180419P;病毒核酸提取试剂盒购自广州和实生物技术有限公司，批号为CZA00901。

1.3 主要仪器

荧光PCR仪（美国ABI，型号Stepone Plus）;全自动核酸提取仪（美国Thermo，型号KingFisher 96）;全自动样品快速研磨仪（上海净信，型号JXFSTPRP32）。

1.4 试验方法 采用荧光定量PCR方法进行PCV2、PCV3检测，按照试剂盒说明书进行操作。

2 结果与分析

2.1 样品总体检测结果

由表2可知，在12个猪场239份扁桃体样品中，PCV2个体阳性率为67.4%（161/239）、群体阳性率为91.7%（11/12），PCV3個体阳性率为14.6%（35/239）、群体阳性率为58.3%（7/12），PCV2/PCV3个体混合感染率为5.0%（12/239）、群体混合感染率为41.7%（5/12）。由此可见，猪群中存在PCV2和PCV3感染情况。

2.2 不同生长阶段样品检测结果

将样品按照保育猪、育肥猪、后备母猪、能繁母猪、种公猪5个生长阶段归类并进行PCV2和PCV3检测，结果表明5个生长阶段均检出PCV2阳性样品，个体阳性率为36.1%～84.3%，其中育肥猪最高，为84.3%（118/140）;除保育猪外，其他生长阶段生猪均检出PCV3阳性样品，个体阳性率为2.9%～51.9%，其中能繁母猪最高，为51.9%（14/27）;育肥猪、后备母猪、能繁母猪3个阶段均同时检出PCV2/PCV3阳性样品，混合感染个体阳性率分别为2.1%（3/140）、13.9%（5/36）、14.8%（4/27）（表3）。由此可见，不同生长阶段猪群均存在PCV2或PCV3感染现象，其中育肥猪PCV2感染最为严重，能繁母猪PCV3感染及PCV2/PCV3混合感染最为严重。

2.3 不同地区样品检测结果

将样品按照A、B、C 3个地区归类并进行PCV2和PCV3检测，结果发现A、B、C 3个地区PCV2的个体阳性率分别为74.4%（67/90）、40.0%（32/80）和89.9%（62/69），PCV3个体阳性率分别为1.1%（1/90）、36.2%（29/80）和7.2%（5/69），PCV2/PCV3混合感染个体阳性率分别为0（0/90）、8.8%（7/80）和7.2%（5/69）（表4）。由此可见，A、B、C地区均存在PCV2和PCV3感染情况，C地区PCV2感染最为严重，B地区PCV3感染及PCV2/PCV3混合感染最为严重。

2.4 不同养殖规模猪场样品检测结果

按照存栏量大小，将12个猪场划分为小型猪场（存栏量≤1 000头）、中型猪场（1 000头<存栏量<5 000头）、大型猪场（存栏量≥5 000头）3种类型，结果发现小型、中型、大型猪场PCV2的个体阳性率分别为64.0%（57/89）、82.2%（74/90）和50.0%（30/60），PCV3个体阳性率分别为4.5%（4/89）、8.9%（8/90）和38.3%（23/60），PCV2/PCV3混合感染个体阳性率分别为1.1%（1/89）、5.6%（5/90）和10.0%（6/60）（表5）。由此可见，不同养殖规模猪场均存在PCV2和PCV3感染情况，而中型猪场PCV2感染最为严重，大型猪场PCV3感染及PCV2/PCV3混合感染最为严重。

3 结论与讨论

（1）此次调查的12个猪场PCV2个体阳性率为67.4%、群体阳性率为91.7%，其中保育猪、育肥猪、后备母猪、能繁母猪个体阳性率分别为53.1%、84.3%、36.1%和37.0%。 2017年，笔者对这12个猪场同样开展了PVC2感染情况调查[9]，PCV2个体阳性率为11.8%、群体阳性率为53%，其中保育猪、育肥猪、后备母猪、能繁母猪个体阳性率分别为0、17.0%、16.0%和12.0%。与2017年相比，2018年PCV2感染率上升明显。究其原因，一是由于猪场环境中存在PCV2，而猪场消毒等生物安全措施未到位，导致感染率上升;二是除了以水平传播方式为主外，PCV2亦能通过精液和胎盘进行垂直传播，由于母猪群中持续存在PCV2隐性感染，它可以通过胎盘传播给仔猪，因而导致猪群感染率上升。

（2）此次调查发现，12个猪场PCV3的个体阳性率为14.6%、群体阳性率为58.3%，其中保育猪、育肥猪、后备母猪、能繁母猪、种公猪个体阳性率分别为0、2.9%、44.4%、51.9%和25.0%，表明安徽省猪群中存在PCV3感染情况。这与刘晓东等[10]调查结果相同，他们从来自安徽、江西、山东10省（区）66个不稳定猪场106份病料中检测出18.0%的PCV3阳性样品，其中安徽省猪场群体阳性率为33.3%（1/3）、个体阳性率为25.0%（1/4）。

（3）此次调查样品来源可靠，数据真实准确，真实反映了安徽省部分地区PCV2和PCV3感染状况，为安徽省猪圆环病毒病的防控提供了科学数据。但受时间和人力的限制，此次调查选择的场点较少，可能与全省实际情况存在差异。今后，应持续开展PCV2和PCV3感染情况调查，增加调查场点数量，覆盖到全省各地，准确掌握猪圆环病毒在安徽省的流行趋势，为全省猪圆环病毒病的防控工作提供科学依据。

参考文献

[1] 张永宁，梅琳，张舟，等.猪圆环病毒3型研究进展[J].东北农业大学学报，2017，48（9）：89-96.

[2] 张志，郝占武，杨旭兵，等.猪圆环病毒3型半巢式PCR方法的建立和应用[J].中国动物检疫，2018，35（1）：81-84.

[3] 王宪文，杭柏林，王丽荣，等.猪圆环病毒2型的流行及防控新进展[J].安徽农业科学，2015，43（7）：141-142.

[4] PALINSKI R，PIEYRO P，SHANG P C，et al.A novel porcine circovirus distantly related to known circovirus is associated with porcine dermatitis and nephropathy syndrome and reproductive failure[J].J Virlo，2016，91（1）：1-38.

[5] PHAN T G，GIANNITTI F，ROSSOW S，et al.Detection of novel circovirus PCV3 in pigs with cardiac and multisystemic inflammation[J].Virol J，2016，13：1-8.

[6] SHEN H，LIU X，ZHANG P，et al.Genome characterization of a porcine circovirus Type3 in south China[J].Transboundary and emerging disease，2018，65（1）：264-266.

[7] 孫明，马君，乔明明，等.北京地区猪圆环病毒3型感染的检测及基因组遗传变异分析[J].畜牧兽医学报，2018，49（10）：2261-2267.

[8] 张志，郝占武，张美晶，等.我国部分猪场猪圆环病毒3型流行病学调查[J].中国动物检疫，2018，35（7）：1-5.

[9] 何长生，朱良强、王倩，等.安徽省部分地区猪圆环病毒2型感染情况调查[J].安徽农业科学，2018，46（11）：69-71.

[10] 刘晓东，杨旭兵，郑庆礼，等.我国部分省（区）猪圆环病毒3型的分子流行病学研究[J].动物医学进展，2017，38（11）：18-21.