采用HPLC法测定平消胶囊中的柚皮苷和新橙皮苷

温立义，郭美玲，王艺纯，唐秋竹*

（1.吉林省药品检验所，吉林 长春 130033；2.长春中药医药大学，吉林 长春 130000）

平消胶囊为中国药典2010一部收载的品种，原标准中只有马钱子粉和麸炒枳壳的薄层色谱鉴别，马钱子粉的含量测定。方中枳壳中主要含有黄酮类化合物[1]，本研究旨在根据枳壳中所含功效成分的特点，拟定柚皮苷和新橙皮苷的含量测定方法。

1 仪器与试药

岛津LC-20AT高效液相色谱仪；梅特勒AL204-IC型电子分析天平（十万分之一）。

柚皮苷对照品（批号：110722-201312），新橙皮苷对照品（批号：111857-201102，纯度99.6%），均由中国食品药品检定研究院提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为Agilent HC C18色谱柱（250×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（用磷酸调节PH值至3.0）（20：80）；检测波长为283 nm；流速1.0 mL·min-1；柱温：35℃。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液

取柚皮苷对照品和新橙皮苷对照品各适量，精密称定，分别加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含柚皮苷和新橙皮苷各90 µg的溶液，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液

取本品内容物1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50 mL，密塞，称定重量，加热回流1.5小时后，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 专属性试验

根据处方制得不含枳壳的阴性样品，并按照拟定的方法进行提取和测定，该方法的专属性较好。典型色谱图见图1。

图1 溶剂、阴性样品溶液、对照品溶液和供试品溶液的色谱图

2.4 仪器精密度试验

取供试品1份，连续测定6次，结果RSD为0.2%（n=6），新橙皮苷的RSD为0.2%（n=6）。表明该方法的仪器精密度良好。

2.5 线性范围

分别精密吸取柚皮苷对照品溶液和新橙皮苷对照品溶液各1、5、10、15，和20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。回归方程为：柚皮苷Y=1723371.26X+16532.27，r=0.9997，新橙皮苷Y=1877429.19X+8020.17，r=0.9998。结果表明，柚皮苷在0.0939 μg～1.8782 μg的浓度范围内呈良好的线性关系，新橙皮苷在0.0720 μg～1.4390 μg的浓度范围内呈良好的线性关系。

2.6 稳定性试验

取供试品1份，分别于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h时测定。结果表明，供试品溶液在24小时内基本稳定。

2.7 重复性试验

取同一供试品6份，结果柚皮苷的RSD=0.8%（n=6），新橙皮苷的RSD=1.1%（n=6）。结果表明，该方法的重复性良好。

2.8 回收率试验

取同法测定已知含量的供试品6份，每份约0.5g，精密称定，分别精密加入柚皮苷和新橙皮苷对照品混合溶液，结果柚皮苷的平均回收率为100.1%，RSD=0.4%（n=6）；新橙皮苷的平均回收率为100.3%，RSD=0.6%（n=6）。结果表明，该方法的回收率良好，准确度较高，符合定量分析的要求。