牛羊品种改良胚胎繁殖技术

摘要：近年，胚胎繁殖技术在畜牧养殖产业中的应用频率不断增加，在畜禽品种改良方面发挥了不可替代的作用，为我国牛羊品种良种化进程作出了突出贡献。应用胚胎繁殖技术能加速牛羊品种改良进程，有效解决传统牛羊品种改良周期长、耗费成本高的缺点，极大提高繁殖效率。该文分析了牛羊品种改良胚胎繁殖技术，并论述了影响该项技术推广应用的主要因素。

关键词：牛羊品种改良;胚胎繁殖技术;影响因素

中图分类号：S823

文献标识码：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.056

0引言

胚胎移植又被称为受精卵移植，胚胎繁殖技术的推广应用对于提高优良母畜的繁殖能力，加强品种改良进程、产双胎率、克服母畜不孕症、降低引种费用、减少生殖系统疾病传播等方面具有十分重要的应用价值。近年，随着牛羊品种改良进程的不断推进，胚胎繁殖技术的应用比例越来越大，胚胎移植技术得到了进一步的应用发展。牛羊胚胎移植技术作为现代牛羊养殖产业的一项重要技术，在生产和科学研究方面具有十分重要的应用前景。

1胚胎繁殖技术

牛羊品种改良中的胚胎繁殖技术的推广应用主要包括供体母牛母羊和受体母牛母羊的正确选择、供体母牛母羊和受体母牛母羊的同期发情处理、供体母牛母羊的超排卯处理、成功受胎的胚胎回收和冷冻保存、胚胎质量检测、胚胎移植、妊娠诊断等一系列工作。

1.1同期发情处理

供体母牛母羊在选择过程中，要选择年龄2-7周岁的经产母牛或母羊，品种性状优良，具有该品种典型的遗传特征和育种价值，遗传性能稳定，不存在各种传染性疾病和遗传疾病，身体健壮，采食欲望旺盛。在应用胚胎繁殖技术前，相应的技术人员需要对供体母牛母羊的身体健康情况进行全面检查，并持续观察该头母牛母羊的发情时间，掌握母牛母羊的发情规律。在进行胚胎移植前，禁止随意改变供体母牛母羊的养殖环境，避免产生应激。受体母牛母羊年龄为2-5岁，具有正常的发情周期，身体健壮，采食欲望旺盛，不存在各种生殖系统疾病，能顺利生产，并且有生生产经验。供体母牛母羊和受体母牛母羊选择后，需要对其进行同期发情处理。通常主要使用外源性的性激素，保证其发情期和排卯期相近，差异不能超过ld。在同期发情处理过程中常用的外源性性激素主要包括P4、LH、PMSG、PGC等几种[1]，其中最后一种外源性性激素具有很好的溶解黄体的能力，有利于保证供体母牛母羊和受体母牛母羊的同期发情，效果较好，价格较低，使用方便，在牛羊胚胎繁殖技术应用中使用较多。

1.2供体母牛母羊超排卵处理

超排卵处理是在母牛母羊的1个发行周期内选择合适的时间，人为注射外源性的促性腺激素，加速卵巢生长发育，增加排卵数量。在牛羊胚胎繁殖技术应用中对供体母牛母羊进行超排卯处理的目的是能一次性获得更多胚胎。通常一次超排卵最好能回收10枚以上的胚胎，如果数量较少，难以回收，数量较多会严重影响受精率。

1.3胚胎采集

胚胎采集工作主要在供体母羊和母牛在正常受精后6-7d内进行。在采集中先将母牛和母羊正常綁定，确保保定架前高后低，前后相差20cm左有。然后选择使用2%的普鲁卡，因对母牛和母羊进行尾椎硬膜外腔麻醉处理。在胚胎收集前，应对母牛的外阴和后期肢体进行严格的卫生消毒，然后使用开张器将子宫开张，小心清理子宫内部的各种粘液，使用二通管对子宫进行冲洗，当冲洗液收集到洁净消毒过的锥形瓶中。

1.4胚胎检测

在对胚胎进行检测前，应将回收回来的冲洗液静置30min以上，然后选择使用实体显微镜，寻找溶液中的胚胎。选择使用经过消毒的吸管，吸取冲洗液放置在PBS保存滴液中，作用一段时间后将其放在200倍显微镜下观察，根据胚胎质量标准分级，将胚胎分为ABCD4个等级，选择最优质的胚胎。

1.5胚胎保存

目前胚胎保存主要分为3种：常规冷冻保存、直接冷冻保存和玻璃化冷冻保存。首先，常规冷冻保存。胚胎常规冷冻保存又被称为平衡冷冻保存，胚胎常规冷冻保存。目前大多数哺乳动物的胚胎保存主要应用该种方法。回收回来的优质胚胎放入到冷冻液中，经过一段时间的平衡放置到试管中，按照0.5℃/min的速度，迅速下降到-7℃，进行植冰，然后将温度缓慢下降到-35℃，平衡10min左右，迅速将试管投入到液氮罐中保存。该种冷冻方法需要在胚胎当中添加一定的防冻剂，牛羊胚胎常用的防冻剂主要包括甘油、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜和糖类;其次，直接冷冻法。直接冷冻法又被称为直接细管冷冻法，该种冷冻方法操作相对较为简单，是由第1种方法转变而来。直接冷冻法经常使用到的冷冻剂为1.5mol/L的乙二醇[2];最后，玻璃化冷冻法。它是将收集到的胚胎放置在玻璃化冷冻液中，平衡一段时间后，直接投入到液氮罐中进行保存。这个过程绕过了冰品化阶段，液态直接转变为玻璃化状态，不需要对胚胎进行缓慢降温，在很大程度上减少了胚胎冷冻程序，避免了胚胎在冷冻过程中受到损伤，经济节约。

1.6胚胎移植

在胚胎移植前应该对受体母牛进行全面的处理，保证移植受体母牛的卵泡直径达到20mm左右。通常受体母牛在发情36h后应出现排卵现象。在进行胚胎移植前，要确保受体母牛的黄体直径超过15mm，并且具有明显的凹凸感。在移植过程中选择使用消毒好的吸管，分3个阶段吸取PBS保存液[3]，将胚胎输送到受体牛羊的子宫内，然后将移植腔取出。

2影响因素

2.1胚胎质量

在胚胎收集处理、冷冻保存过程中，由于胚胎的生产方式不同，胚胎质量和发育潜能存在很大差异，进而导致胚胎移植后受胎率存在很大不同。因此要保受体母牛正常受胎，需要生产高质量的胚胎，这是提高移植成功率的关键。

2.2供体受体的同期发情性

由于胚胎在受体子宫中生长发育，子宫的内分泌变化情况会对子宫内环境变化产生最直接的影响，而供体和受体之间是否能保证生理上的一致也是影响胚胎移植成功率的关键。

2.3操作技术

胚胎移植是一项技术要求很高的工作，操作技术是否恰当，对移植妊娠率的影响十分大。操作人员在操作过程中技术是否娴熟，胚胎解冻是否彻底，解冻方法是否恰当，胚胎移植的时间是否恰当，移植部位是否恰等都会对受体母牛的受胎率真影响。

3结束语

近年随着人们物质生活水平不断提升，对牛羊制品需求量不断增加，供需矛盾不断凸显，传统的牲畜养殖模式和品种改良模式，难以满足目前消费者对高品质牛羊制品的需求。胚胎繁殖技术的诞生推广和应用颠覆了传统的繁殖模式和生产模式，加大了优良牛羊品种的推广进程，有利于提高养殖产业的经济效益和生产效率，推动现代畜牧养殖产业的发展，保证高品质牛羊制品的持续供给。

参考文献

[1]王增强.牛胚胎移植技术及应用[J].畜牧兽医科技信息，2017（10）：45.

[2]王勋发，李成春，张维云.肉羊胚胎移植工作中应注意的几个问题[J].养殖技术顾问，2007（7）：30.

[3]康建生，张艳红.胚胎移植技术在畜牧生产中的应用[J].养殖与饲料，2018（3）：21-22.

作者简介：玛依努尔·艾买尔（1976-），女，维吾尔族，新疆沙雅人，中专，初级兽医师，主要从事防检驱治工作。