口蹄疫悬浮灭活疫苗质量控制的意义及方案

摘要：该文主要结合实际工作经验，分析了口蹄疫悬浮灭活疫苗质量控制的意义以及质量控制方案。

关键词：口蹄疫;疫苗质量;方案

中图分类号：S851.3

文献标识码：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.05.049

0引言

目前在口蹄疫悬浮剂灭活疫苗生产中主要利用BKH2，传代细胞培养复制病毒，然后将得到的培养物直接灭活后制成相关产品。在该生产流程中，BKH21传代细胞制备的质量、病毒增殖复制的长度、培养物的浓度以及灭火及其产品的均质、乳化等过程是质量控制的难点和要点。而决定BKH21传代细胞质量的2个关键因素是细胞的密度和活力。目前在大多数口蹄疫悬浮剂疫苗生产厂家内部使用的配方相对比较完善，培养基并不是主要影响因素，因此在疫苗质量控制中关键是原材料。

1意义

1.1国家强制要求

口蹄疫病毒是危害偶蹄类动物的一种重特大传染性疾病，该种疾病的传播流行会给养殖户造成不可挽回的经济损失。进入2l世纪，随着国家对口蹄疫防控重视程度和疫苗生产时间的延长，口蹄疫疫苗的监管制度逐漸完善，相关管理体系已基本形成。国家连续出台了《新兽药研制管理办法》、《兽药注册办法》等一系列兽药管理办法，在兽药研制注册生产、质量管理、流通环节、管理监督管理环节都有相关法律法规依据，切实提高了疫苗研制和生产的质量，保证生产环节安全可靠。确保疫苗质量，农业部还采取了驻厂监督、飞行检查、批签发等多种日常监督管理模式[1]。

1.2企业自身需要

疫苗作为一种特殊的商品，企业生产质量是衡量企业竞争能力的主要方向，它是企业一切工作的基础，更是巩固和扩大市场份额的前提，关系到企业未来的生存和发展。企业在追求经济效益最大化的同时，企业也需要承担相应的社会责任，通过勇于承担社会责任，塑造企业形象，打造企业品牌价值，进而获得长远经济效益。因此要求口蹄疫悬浮剂灭活疫苗生产企业要严格质量控制，构建完善的质量控制方案，强化疫苗生产研发各个环节的控制管理，保证生产出来的疫苗符合相关要求，质量过硬。

1.3生物品特殊要求

由于口蹄疫疫苗本身的生物特性以及安全防护方面存在诸多漏洞，在生物安全方面，如果不能严格做好质量控制工作，很容易对周围人类、生态环境造成严重危害。由于口蹄疫属于国家一类重特大疫病，病毒培养、病毒灭活、疫苗制备等各个环节都存在生物安全方面的风险因素。口蹄疫的生物安全问题直接影响人类的生命健康，做好质量防控能有效降低病毒的传播可能，它不仅是提高和保障动物健康的基础，更是提高和保障人类生命健康，促进社会稳定发展的前提[2]。

2控制方案

2.1原材料质量控制

由于口蹄疫悬浮灭活疫苗在制备过程中常需要很多生物原料，如血清、动物性水解乳蛋白等，所以在整个生产中必须对这些原材料进行严格的质量控制，要求原材料供货商提供外源病毒检测报告，要在检测报告中明确原材料中是否含有牛海绵状脑病病毒。在免疫接种口蹄疫悬浮灭活疫苗后产生的一系列不良反应中，有相当一部分是由于在疫苗生产中辅料质量不过关所致。因此需要根据相应的疫苗生产流程和生产工艺，加强对辅料质量的检测，严格控制辅料中的微生物限度，进行严格的热源检查、细菌内毒素检查，确保各个辅料使用的安全性和合理性。在疫苗生产制备过程中，不应将辅料看作成没有活性的生产材料。只有确保各个辅料的理化性质稳定安全可靠，才能确保疫苗进入动物机体后不会发生严重的副作用和副反应，疫苗安全性和有效性较高。

2.2病毒培养过程中质量控制

相对于传统的病毒培养模式，口蹄疫悬浮灭活疫苗在制备中对培养工艺进行了有效革新和发展，因此在病毒培养中需要转变理念，强化对病毒培养过程中各个环节的质量控制。病毒分离培养中应优选培养基。在全新生产工艺上，细胞培养逐渐由贴壁生长转变为悬浮生产，需要对培养基的类型进行进一步优化，满足整个病毒培养的生产需求，并不断对原有的细胞进行纯化驯化培养后，逐步实现病毒细胞的繁殖增长。另外，应进一步优化悬浮液质量。在病毒培养中应严格控制好悬浮液培养的转速、温度、溶解氧浓度、pH值、接种密度、细胞活力等指标，通过对细胞增殖时间、细胞增殖数量，来评估整个细胞培养的质量。还应对整个病毒繁殖培养的反应器进行优化。目前反应器能实时监测和控制的项目，主要包括反应温度、搅拌速度、溶解氧浓度、pH值，而对于病毒分离培养过程中的在线灭菌系统自动灭菌与定位清洗的全自动化生物反应器、生物反应器、自动取样和分析系统还有待进一步优化。在病毒分离培养过程中，氧气供给方式、搅拌速度、搅拌方式、热传递等指标也需要进一步探索研究[3]。 2.3病毒纯化工艺质量控制

制备的口蹄疫悬浮灭活疫苗进入动物机体后，要产生很好的免疫应答反应，需确保疫苗中有较高含量的抗原。而如果灭活疫苗中含有大量非病毒蛋白，在疫苗免疫接种后很容易引起副反应。另外，病毒增殖中产生的病毒非结构性蛋白对于感染动物的甄别困难较大。因此在进行口蹄疫疫苗免疫接种中，尤其是在多家疫苗免疫接种过程中，为确保动物产生很好的免疫抗体，同时降低疫苗使用过程中产生的副反应，减少疫苗使用量，方便病毒抗原的储存，便于对免疫和感染情况进行有效鉴别，应进行病毒纯化培养。目前在大型疫苗生产企业内所使用的浓缩纯化技术主要包括超滤和沉淀2种方法。在疫苗纯化培养中通过利用聚乙二醇或者聚环氧乙烷既能实现对病毒浓度的有效浓缩和纯化培养，而且还能极大降低抗原收获物中非病毒蛋白的含量和成分。

2.4生产过程中质量监督

疫苗质量控制贯穿于疫苗生产的全过程，这才能得到符合相关质量标准的灭活疫苗产品。口蹄疫疫苗从原料的进厂到生产后检验合格涉及到诸多环节和许多程序，每个环节都应严格把控质量，不能忽视任何一个环节，否则很容易导致产品质量不合格。因此，口蹄疫疫苗生产企业应结合自身产品的实际特点，选择合理的生产工艺和生产技术，对生产全过程进行有效的质量监督管理，控制疫苗质量。

3结束语

疫苗生产厂家不仅需要对疫苗的理化性质、无菌性、安全性、免疫效果等多方面进行严格检查，而且官方兽医还应不定期随机抽检厂家的口蹄疫疫苗，重点对成品的疫苗进行无菌检查、安全性检查和免疫效力检查，评价疫苗质量，确保疫苗生产企业能生产出质量过硬的疫苗产品。

参考文献

[1]何随彬，金盈宇，龚志亮，等.口蹄疫疫曲最新研究进展[J].上海畜牧兽医通讯，2019（2）：30-32，35.

[2]陈建文.牛A型口蹄疫病毒多表位疫曲的研究[D].兰州：甘肃农业大学，2013.

[3]张中旺，张永光.口蹄疫表位疫曲的研究进展[J].中国人兽共患病学报，2008（6）：570-573。591.

作者简介：王发信（1977-），男，甘肃定西人，汉族，本科，主要从事疫曲生产工作。