EB病毒相关胃癌病人血清EB病毒抗体检测及意义

杨爱华 薛会光 肖华 张蕊 王玺 刘雯

[摘要] 目的 检测EB病毒相关胃癌（EBVaGC）病人血清中EB病毒相关抗体，对EBVaGC进行快速的鉴别诊断。

方法 應用原位杂交技术确认EBVaGC病人20例，以临床病理资料与之相匹配的EB病毒阴性胃癌（EBVnGC）病人60例作对照，应用化学发光法检测EB病毒相关抗体水平，采用阳性率、灵敏度、特异度、阳性似然比、阳性预测值等参数来评估这些抗体诊断EBVaGC的效率。

结果 EBVaGC组与EBVnGC组病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA阳性率比较，差异具有统计学意义（χ2=23.89、3.88，P<0.05）;两组血清EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG阳性率比较差异无显著性（χ2=1.89～2.88，P>0.05）。EBV EA IgG、EBV VCA IgA阳性似然比、阳性预测值均高于其他4项抗体（χ2=5.19～20.18，P<0.05）。EBV VCA IgG、EBV NA IgG灵敏度虽高，但是特异度极低;EBV EA IgA特异度虽高，但是灵敏度偏低;EBV EA IgG、EBV VCA IgA较其他相关抗体兼具较高的灵敏度和特异度（χ2=11.65～29.62，P<0.05）。

结论 对EB病毒抗体进行血清学检测，有利于EBVaGC的有效筛查，且不同抗体检测的灵敏度、特异度有一定差异;联合检测可以弥补单项抗体指标无法兼顾灵敏度、特异度的缺点，为EBVaGC的快速鉴别诊断提供可靠依据，具有较高的临床应用价值。

[关键词] 疱疹病毒4型，人;胃肿瘤;抗体，病毒

[中图分类号] R373.9;R735.2

[文献标志码] A

[文章编号]  2096-5532（2019）06-0685-03

doi：10.11712/jms201906013

[开放科学（资源服务）标识码（OSID）]

DETECTION OF SERUM ANTIBODIES TO EPSTEIN-BARR VIRUS IN PATIENTS WITH EPSTEIN-BARR VIRUS-ASSOCIATED GASTRIC CARCINOMA AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE

YANG Aihua， XUE Huiguang， XIAO Hua， ZHANG Rui， WANG Xi， LIU Wen

（Department of Clinical Laboratory， The Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266003， China）

[ABSTRACT] Objective To make a rapid differential diagnosis of Epstein-Barr （EB） virus-associated gastric carcinoma （EBVaGC） by detecting the serum antibodies to EB virus in patients with EBVaGC.

Methods A total of 20 patients with EBVaGC confirmed by in situ hybridization were enrolled as EBVaGC group， and 60 patients with EB virus-negative gastric carcinoma （EBVnGC）， matched for clinicopathological data， were enrolled as EBVnGC group. Chemiluminescence was used to measure the levels of antibodies to EB virus， and the parameters including positive rate， sensitivity， specificity， positive likelihood ratio， and positive predictive value were used to evaluate the efficiency of these antibodies in the diagnosis of EBVaGC.

Results There were significant differences between the EBVaGC group and the EBVnGC group in the positive rates of EBV EA IgG and EBV VCA IgA （χ2=23.89，3.88;P<0.05）， and there were no significant differences in the positive rates of EBV EA IgA， EBV VCA IgM， EBV VCA IgG， and EBV NA IgG between the two groups （χ2=1.89-2.88，P>0.05）. EBV EA IgG and EBV VCA IgA had significantly higher positive likelihood ratio and positive predictive value than the other four antibodies （χ2=5.19-20.18，P<0.05）. EBV VCA IgG and EBV NA IgG had high sensitivity and extremely low specificity， while EBV EA IgA had high specificity and re-

latively low sensitivity， and EBV EA IgG and EBV VCA IgA had higher sensitivity and specificity than the other antibodies （χ2=11.65-29.62，P<0.05）.

Conclusion Serological detection of antibodies to EB virus is beneficial to the effective screening for EBVaGC and different antibodies have different sensitivities and specificities. Combined measurement can overcome the shortco-

ming that a single antibody is unable to perform well in both sensitivity and specificity and provide reliable evidence for the rapid differential diagnosis of EBVaGC， and therefore， it has a high clinical value.

[KEY WORDS] herpesvirus 4， human; stomach neoplasms; antibodies， viral

胃癌是消化系统恶性肿瘤之一，具有高流行率和高死亡率的特点，已成为危害人类健康和安全的常见疾病之一[1]。1993年，TOKUNAGA等[2]首次应用EBER原位杂交技术证实部分胃癌病人肿瘤细胞内存在EB病毒，并将该部分胃癌定义为EB病毒相关胃癌（EBVaGC），其余胃癌则为EB病毒阴性胃癌（EBVnGC）。TOKUNAGA等[2]认为，在

早期胃癌中，如果EB病毒阳性，且无淋巴结转移，在治疗中可以避免传统的根治手术而采用内镜下切除，预后良好，但对于中晚期胃癌却无明显的区别。因此，早期EBVaGC的鉴别对于治疗手段的选择有非常重要的意义。本研究选择EBVaGC病人作为研究对象，探讨血清EB病毒抗体检测对早期快速鉴别诊断EBVaGC的临床价值。

1 对象与方法

1.1&nbsp;研究对象

选取我院胃肠外科2017年10月—2018年12月收治的尚未接受手术治疗的胃癌病人80例，其中男性69例，女性11例;年龄为41～74岁，平均（61.14±8.03）岁。全部病例均经病理学检查证实，并应用原位杂交技术检测EB病毒编码的小RNA EBER1确认EBVaGC病人20例， EBVnGC病人60例。两组病人在年龄、性别、肿瘤部位、组织学类型、局部浸润、有无淋巴结转移等方面差异均无显著性（P>0.05）。见表1。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集与处理 于清晨空腹状态下采集两组病人的静脉血4～5 mL，常规放置30 min，血液凝固后以3 000 r/min离心10 min，分离提取血清和血细胞，置于低温冰箱中保存待测。

1.2.2 EB病毒抗体检测 应用深圳新产业生物医学工程股份有限公司生产的Maglumi 2000全自动化学发光测定仪及配套化学发光试剂盒，严格按照仪器标准操作流程和试剂规定要求上机检测。抗体水平大于或等于临界值时定为阳性，低于临界值时定为阴性。

1.2.3 统计学分析 应用统计软件SPSS 13.0进行统计学分析，计数资料组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组血清EB病毒相关抗体阳性率比较

EBVaGC组与EBVnGC组病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA阳性率比较，差异具有统计学意义（χ2=23.89、3.88，P<0.05）;两组血清EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG阳性率比较差异无显著意义（χ2=1.89～2.88，P>0.05）。见表2。

2.2 EB病毒相关抗体诊断EBVaGC的效率

EBV EA IgG、EBV VCA IgA的阳性似然比、阳性预测值均高于其他4项抗体，差异有统计学意义（χ2=5.19～20.18，P<0.05）。EBV VCA IgG、EBV NA IgG的灵敏度均明显高于其他4项抗体，特异度均明显低于其他4项抗体，差异具有统计学意义（χ2=4.89～25.96，P<0.05）。EBV EA IgA的特异度虽高，但是灵敏度却偏低。EBV EA IgG和EBV VCA IgA较其他相关抗体兼具较高的灵敏度和特异度，差异均具有统计学意义（χ2=11.65～29.62，P<0.05）。见表3。

2.3 EBVaGC組EB病毒抗体阳性模式

EBVaGC组EB病毒抗体阳性模式多样化，单一抗体检测的价值有限，多抗体联合检测较单一抗体检测更能提高EBVaGC诊断的准确性。见表4。

3 讨 论

EB病毒是一种双链DNA病毒，属人疱疹病毒4型，是人类一种特异性嗜淋巴细胞性疱疹病毒。自1990年BURKE等[3]首先报道EB病毒感染与胃癌相关以来，国内外学者采用多种检测技术相继在各种胃癌组织中检测到EB病毒。越来越多的研究结果表明，EB病毒与胃癌关系密切[2-5]。EB病毒感染胃上皮细胞后大量克隆性生长繁殖，从而导致EBVaGC，该亚型胃癌有着独特的组织病理学、表观

遗传特征以及分子异常[4-5]。人体感染EB病毒后，可产生相对应的抗原，如EB病毒核抗原、早期抗原、衣壳抗原、膜抗原，并均可以产生相应的IgG和IgA、IgM抗体，存在于胃癌病人血清中。

本研究选择EBVaGC和临床病理资料与之匹配的EBVnGC病人作为研究对象，采用化学发光法检测病人血清中的EB病毒抗体水平。结果显示，EBVaGC组与EBVnGC组病人血清EBV EA IgG、EBV VCA IgA阳性率比较差异具有统计学意义，而EBV EA IgA、EBV VCA IgM、EBV VCA IgG、EBV NA IgG阳性率比较差异无统计学意义。该结果表明，EBV EA IgG、EBV VCA IgA抗体检测阳性有助于EBVaGC的鉴别诊断。EBV VCA IgG、EBV NA IgG在病毒感染早期即可出现，并可以持续终生，此两种抗体阳性多提示感染在癌变前或癌变早期已经存在。

本研究对EB病毒相关抗体诊断EBVaGC的效率进行评价，结果显示，EBV EA IgG、EBV VCA IgA的阳性似然比、阳性预测值均明显高于其他4项抗体;EBV VCA IgG、EBV NA IgG靈敏度虽高，但是特异度极低;EBV EA IgA的特异度虽高，但是灵敏度却偏低。此研究结果表明，EBV EA IgG和EBV VCA IgA较其他相关抗体具有较高的灵敏度、特异度，对EBVaGC鉴别具有临床应用价值，特别是EBV VCA IgA的上升可以说是疾病发生的危险标志，与有关报道一致[6]。还有研究表明，EBV EA IgG上升是特异性的，可以作为肿瘤标志物应用于临床[6-7]。

人是EB病毒唯一宿主，几乎所有成年人既往都感染过EB病毒，其感染常常无症状或者不发病。EB病毒感染后长期潜伏，可诱发鼻咽癌、传染性单核细胞增多症和EBVaGC等。有的胃癌病人早在术前1～3年上述抗体便显示上升，可见EB病毒感染发生于癌变之前或癌变初期阶段[8]。故对不同EB病毒抗体进行血清学检测，有利于EBVaGC的有效筛查。但EBVaGC病人EB病毒抗体阳性模式多样化，单一抗体检测的价值有限，多抗体联合检测较单一抗体检测能提高EBVaGC诊断的准确性。

综上所述，对EB病毒抗体进行血清学检测，有利于EBVaGC的有效筛查，且不同抗体检测的灵敏度、特异度有一定差异;联合检测可以弥补单项抗体指标无法兼顾灵敏度、特异度的缺点，为EBVaGC的快速鉴别诊断提供可靠依据，具有较高的临床应用价值。

[参考文献]

[1]陈维忠，胡晓峰，孙淑红. EBV感染与胃癌的相关性分析[J]. 医学检验与临床， 2008，19（1）：34-35.

[2]TOKUNAGA M， UEMURA Y， TOKUDOME L， et al. Epstein-Barr virus related gastric cancer in Japan：a molecutar patho-epidemiological study[J]. Acta Pathol Jan， 1993，43（10）：574-581.

[3]BURKE A P， YEN T S， SHEKITKA K M， et al. Lymphoe-

pithelial carcinoma of the stomach with Epstein-Barr virus de-

monstrated by polymerase chain reaction[J]. Modern Pathology， 1990，3（3）：377-380.

[4]UOZAKI H， FUKAYAMA M. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma—viral carcinogenesis through epigenetic mechanisms[J]. Int J Clin Exp Pathol， 2008，1（3）：198-216.

[5]于传亭，荆永正，邱清芳，等. 烟台地区EBV相关胃癌临床病理特征及病毒基因分型[J]. 青岛大学医学院学报， 2013，49（5）：377-380.

[6]李茵茵，袁媛. EB病毒相关胃癌的研究进展[J]. 日本医学介绍， 2001，22（6）：279-281.

[7]ARSLAN H， CANDAR T， VURAL O. Increased anti-EBV VCA IgG antibody levels are associated with need for surgery in patients developing upper respiratory tract complications[J]. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology， 2018，111：84-88.

[8]赵林清，钱渊. EB病毒感染及其相关疾病[J]. 中华儿科杂志， 2003，41（10）：797-799.