快速血浆反应素环状卡片试验中类风湿因子对梅毒抗体的影响分析

韦旭敏

[摘要] 目的 探討分析快速血浆反应素环状卡片（Rapid plasma reacting ring card test，简称RPR）试验中，类风湿因子（Rheumatoid factor，简称RF）对检测结果及梅毒抗体的影响。方法 方便选取2017年5月—2018年11月该院收治的疑似及确诊的梅毒患者945例，对所有入组研究患者的血清样本分别进行RPR试验、螺旋体明胶颗粒凝集（TPPA）试验及RF试验。所有945例样本血液的RPR试验、TPPA试验及RF试验结果、RF水平与RPR试验阳性之间的相关性。结果 RPR试验结果：阳性：93例，TPPA试验结果：阳性：26例，RPR的实验阳性率高于TPPA试验（P<0.05）;RF试验结果：阳性：15例，RPR试验+RF试验：阳性：13例，TPPA试验+ RF试验：阳性：1例，结果提示，RF对RPR试验结果的影响高于TPPA试验（P<0.05）;对RPR验+RF试验结果呈阳性的13例样本进行递倍增稀释试验，结果提示，RF水平为8 IU/L的RPR假阳性患者约69.2%;RF水平为16IU/L的RPR假阳性患者约23.1%，RF水平为32 IU/L的RPR假阳性患者约7.7%，不同RF水平组间的差异有统计学意义（P<0.05），RF水平在8 IU/L时，对RPR试验结果的影响最为显著。结论 RF能够对梅毒患者的RPR试验结果产生影响，能够使部分实验结果呈现假阳性的现象;因此，临床中给予疑似及确诊的梅毒患者进行诊疗的过程当中，应当充分、全面的考虑可能影响试验结果的相关风险因素，尽可能的降低甚至排除RF对试验结果的影响，以提高梅毒患者的临床诊断准确率。

[关键词] 快速血浆反应素环状卡片试验;类风湿因子;梅毒;试验;RPR;TPPA;RF

[中图分类号] R5          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2019）05（a）-0189-04

[Abstract] Objective To study the analysis of the influence of rapid plasma reacting ring card （Rapid plasma reacting ring card test， RPR） experiment， rheumatoid factor （RF） on test results and syphilis antibody. Methods A total of 945 suspected and confirmed syphilis patients admitted to our hospital from May 2017 to November 2018 were convenient selected to conduct RPR test， TPPA test and RF test on serum samples. The correlation between RPR test， TPPA test and RF test results， RF level and positive RPR test was found in all 945 samples. Results RPR test results： 93 cases; TPPA test results： 26 cases; RPR test positive rate was higher than that of TPPA test （P<0.05）. RF test results： positive： 15 cases， RPR test +RF test： positive： 13 cases， TPPA test +RF test： positive： 1 case. The results indicated that the influence of RF on RPR test results was higher than that of TPPA test （P<0.05）. Thirteen samples tested positive by RPR +RF test were subjected to a recursive dilution test. The results indicated that approximately 69.2% of patients with false positive RPR were found to have a RF level of 8 IU/L. Patients with false positive RPR with RF level of 16 IU/L were about 23.1%， and those with RF level of 32 IU/L were about 7.7%. There were significant differences among the groups with different RF levels，RF level at 8 IU/L has the most signifficant effect on the RPR test results（P<0.05）. Conclusion RF can affect the results of RPR test in syphilis patients， and can lead to false positive results in some experiments. Therefore， in the process of clinical diagnosis and treatment of suspected and confirmed syphilis patients， sufficient and comprehensive consideration should be given to relevant risk factors that may affect the test results. And the influence of RF on the test results should be reduced or even excluded as far as possible， so as to improve the accuracy of clinical diagnosis of syphilis patients.

[Key words] Rapid plasma reactivity cyclic card test; Rheumatoid factors; Syphilis; The test; RPR; TPPA; The RF

目前臨床中诊断梅毒的主要及常用方法就是血清学试验，包括：快速血浆反应素环状卡片（Rapid plasma reacting ring card test，简称RPR）试验、螺旋体明胶颗粒凝集（Treponema pallidum gelatin agglutination test，简称TPPA）试验及酶联免疫吸附（ELISA）试验[1]。临床中最常实用的就是RPR，该实验具有操作迅速、简便等特点，对梅毒患者的早期筛查具有较高的敏感性，能够使用RPR试验来评估患者的病情变化及疗效情况。但当抗体含量过高时，易出现假阴性反应，即前带现象（promne phenomenon），会有漏检[2]。但由于RPR试验过程过程中所使用的心磷脂抗原并不包括菌体成分及梅毒螺旋体，因此，疾病可能会导致RPR试验出现假阳性而发生误诊。目前相关文献中提到可能会对梅毒血清试验结果产生影响的疾病主要有：自身免疫类疾病、非梅毒螺旋体感染、静脉吸毒、妊娠及老年人群体[3]。为了有效避免临床中对梅毒患者误诊，该院方便选取2017年5月—2018年11月收治的疑似及确诊梅毒的患者945例，分别进行RPR试验、TPPA试验及RF试验，观察RF对试验结果的影响情况，旨在为提高临床对梅毒患者的诊断准确率提供更多依据，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选取该院收治的疑似及确诊的梅毒患者945例，年龄45～60岁，平均年龄（52.3±0.7）岁，其中男性593例，女性352例，并获取该院伦理委员会的许可。

纳入标准：①存在不洁性生活史者。②性伴侣或配偶存在梅毒史者。③母亲有梅毒史者。④既往存在或现有梅毒症状者。⑤年龄45～60岁。⑥患者及其家属均知情，并签署同意知情书。

排除标准：①合并精神异常者。②合并恶性肿瘤者。③不愿配合研究者。

1.2  方法

1.2.1  采集血液样本  抽取所有945例的静脉样本血液约4 mL，常规离心（3 000 r/min，5 min）取上层清液，冷冻待检。

1.2.2  试剂  RF试剂购自：Spain SPINREACT公司，TPPA试剂购自：ZHU HAI LIVZON DIAGNOSTICS INC.，RPR试剂购自：上海科华生物工程股份有限公司。

1.2.3  仪器  酶标仪（安图 PHOMO），全自动酶标洗板机（PW-960），酶联免疫反应加速仪（NY/MMJ）。

1.2.4  试验方法  RPR试验：使用活性炭分别吸附待检血清样本及抗原，凝集反应之后确认是否出现凝集物，如果有凝集物时提示为RPR阳性[4]。TPPA试验：将待检样本血清内的TP-Ab（梅毒螺旋体抗体）与试剂中的明胶颗粒进行凝集反应，TPPA阳性标准：样本血清稀释倍数≥1∶80时发生凝集[5]。RF试验：取约50 μL的冷冻血清样本，常温解冻后在血清中加入乳胶试剂，并进行充分混匀，在使用反应板摇动约120 s（摇动速度：100 r/min）。使用相同方法加入阴性阳性对照，等阳性对照发生凝集之后进行判定，RF阳性判定标准：≥8IU/L[6]。

1.3  观察指标

观察所有945例样本血液的RPR试验、TPPA试验及RF试验结果。

观察RF水平与RPR试验阳性之间的相关性。

1.4  统计方法

数据应用SPSS 18.0统计学软件进行分析，其中计数进行χ2检验，计量进行t检验， P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  945例样本血液的RPR试验、TPPA试验及RF试验结果

RPR试验结果：阳性：93例，TPPA试验结果：阳性：26例，RPR的实验阳性率高于TPPA试验，差异有统计学意义（P<0.05）;RF试验结果：阳性：15例，RPR试验+RF试验：阳性：13例，TPPA试验+ RF试验：阳性：1例，结果提示，RF对RPR试验结果的影响高于TPPA试验，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2  RF水平与RPR试验阳性之间的相关性

对RPR验+RF试验结果呈阳性的13例样本进行递倍增稀释试验，结果提示，RF水平为8 IU/L的RPR假阳性患者约69.2%;RF水平为16 IU/L的RPR假阳性患者约23.1%，RF水平为32 IU/L的RPR假阳性患者约7.7%，不同RF水平组间的差异有统计学意义（P<0.05），RF水平在8 IU/L时，对RPR试验结果的影响最为显著，具体见表2。

3  讨论

梅毒检测目前在临床的诊疗过程当中是十分常用的一项检查指标及项目，在梅毒临床诊断、产检、献血及输血时都有十分重要的临床参考意义[7]。梅毒螺旋体在进入到机体当中之后，能够根据血清学试验将其分成两种不同的类型，一种特异性抗体，其对机体中的梅毒螺旋体具有直接的针对作用;另外一种就是非特异性抗体，其主要是对机体中的类脂类抗体产生作用[8]。其中，特异性抗体的在机体中能够长时间存在，即便梅毒患者在经过临床各种抗梅毒干预之后，对血清进行试验时仍然能够检测到特异性抗体的存在。而类脂类抗体，对梅毒检测具有较高的灵敏度，但其特异度较低，且类脂类抗体在机体内的出现时间要晚于特异性抗体[9]。