郭亮明 邢红燕
湖北省武穴市畜牧兽医局,湖北武穴435400
猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2 型所引起的一系列疾病的总称。2008年以来,国内外陆续开发出圆环病毒(PCV2)疫苗,包括Cap 蛋白重组杆状病毒灭活苗、PCV1/PCV2 嵌合体灭活疫苗等,且部分已经应用于养猪生产,临床应用结果显示,上述疫苗对预防圆环病毒的感染具有明显的效果。我国部分高等院校和科研机构也开发出具有自主知识产权的猪圆环病毒灭活疫苗,如LG 株、SH 株、DBN-SX07株、WH 株ZJ/C 株等。目前上述疫苗已被多家企业生产并上市销售,相应疫苗产品的灭活前抗原含量逐步提高。同时还开发出适用于不同养殖阶段的疫苗剂型,如从最初适合仔猪免疫的水佐剂,逐步开发出适用保育猪免疫、育肥猪免疫、母猪免疫的油包水佐剂、水包油包水佐剂、油佐剂等;免疫效果逐步增强,对我国生猪产业的圆环病毒的防控起到了重要的作用。近年来,国内科研机构还开发出了通过大肠杆菌表达的CAP 蛋白病毒颗粒样(VLPS)灭活疫苗,增强了我国对圆环病毒的综合控制能力。
临床上控制猪圆环病毒有2 种方案:其一是以法国梅里亚公司为代表的免疫母猪方案,即通过母猪母乳抗体对哺乳仔猪和断奶仔猪提供保护,同时不断净化母猪携带圆环病毒和降低整个猪场的病毒载量,该方法需要圆环疫苗具有良好免疫原性、较高的抗原含量以及良好的油性佐剂;其二是以德国勃林格公司为代表的早期免疫仔猪方案,即通过对哺乳仔猪的主动免疫,使仔猪快速获得主动免疫力,在保育阶段获得很好的保护。但是上述2 种方案使用的进口疫苗价格昂贵。
自2001年国内首次报道该病以来,湖北省武穴市猪圆环病毒病的发病率逐年升高,对断奶仔猪、保育猪造成了很大的危害。本研究从国产圆环病毒病疫苗中,寻找与梅里亚、勃林格疫苗公司猪圆环病毒病疫苗的免疫机制类似的国产疫苗,考察国产疫苗在规模化猪场使用后的效果,以求达到用国产疫苗替代进口疫苗的目的,减少国内猪场对进口圆环疫苗的依赖,降低养猪场对圆环病毒病的防控成本。
1)试验疫苗。共准备4 种圆环疫苗,疫苗A,WH 毒株,油佐剂,抗原含量107TCID50;疫苗B,蛋白苗,水佐剂,有效抗原20 μg/mL(进口);疫苗C,ZJ/C 毒株,水佐剂,抗原含量107.3TCID50;疫苗D,蛋白苗,水佐剂(国产),未标注抗原含量(100 μg/mL)。
2)试验动物。试验动物分别来自武穴市梅苑养猪场(后备母猪100 头)和武穴市王榜山畜牧有限公司(后备母猪100 头)。
1)安全性试验。在武穴市梅苑养猪场随机抽取20 头后备母猪,分成5 组,每组分别注射疫苗A、B、C、D,对照组注射生理盐水,各2 mL,观察1 周,未见异常反应。在武穴市王榜山畜牧有限公司养猪场随机抽取经产母猪20 头,分成5 组,每组4 头,分别注射疫苗A、B、C、D,对照组注射生理盐水,各2 mL,观察1 周,未见异常反应。结合2 个猪场实际情况,说明疫苗A、B、C、D 是安全的,可以全面开展试验。
2)母猪阶段试验。在武穴市梅苑养猪场,选择后备母猪100 头,随机分成5 组,每组20 头,试验组分别注射疫苗A、B、C、D 各1 头份,28 d 后加强免疫各1 头份,对照组注射生理盐水,不注射圆环病毒疫苗,分别记录各组母猪产仔数、健仔数、弱仔数、白胎数、木乃伊数、整齐度。
3)仔猪阶段试验。在武穴市王榜山畜牧有限公司养猪场,随机选择经产母猪100 头及其后代仔猪,随机分成5 组,每组20 头母猪,分别注射疫苗A、B、C、D,对照组注射生理盐水。注射方法:疫苗A组在14日龄注射1 mL,35日龄重复注射1 mL;疫苗B 组在14日龄注射1 mL(1 头份20 μg 抗原含量),疫苗C 组在14日龄注射1 mL,28日龄重复注射1 mL;疫苗D 组在14日龄注射1 mL,28日龄重复注射1 mL;分别记录仔猪不同时间(21、60、90、120 d)的存活数以及断奶衰竭综合症表现(发病头数、发病率、死亡数、死亡率、成活率、呼吸道症状)、PDNS 等。
试验母猪繁殖性能结果见表1。由表1可以看出,后备母猪注射A 组疫苗后,具有明显的保护作用,健仔率为93.4%,与对照组83.4%相比,提高了10 个百分点,差异显著;疫苗B 组健仔率85.7%,疫苗C 组健仔率87.2%,疫苗D 组82.9%,与对照组相比分别提高2.3 个百分点、提高3.6 个百分点以及降低0.5 个百分点,三者之间差异不显著,从白胎数、弱仔数、木乃伊数来看,疫苗A 组明显优于疫苗B、C、D 和对照组。
表1 试验母猪繁殖性能
从表2可以看出,疫苗A、B、C 组发病率分别为9%、11.8%、12.6%,相比对照组18.6%,分别下降了9.6、6.8、6.0 个百分点;成活率分别为96.1%、93.4%、93.0%,相比对照组的87.1%分别提高了9.0、6.3、5.9个百分点,差异极显著(P<0.01),D 组发病率15.6%,相比对照组的18.6%下降了3.0 个百分点;成活率为90.1%,比对照组87.1%提高3.0 个百分点,差异显著(P<0.05),说明仔猪免疫圆环病毒病疫苗都有免疫效果。
从临床观察可以看出,不同组圆环病毒病疫苗的免疫特性有所差异,疫苗A、B、C 的免疫效果均不错,其中疫苗B 和疫苗C 偏向于断奶仔猪的保护,针对呼吸道症状免疫效果比较明显,但对中型猪保护力较差;疫苗A 在仔猪断奶时的保护力稍差,但是对中大型猪的保护效果较好,对呼吸道症状免疫效果一般;疫苗D 对控制猪圆环病毒病有一定的保护作用,但免疫效果较差。
表2 圆环病毒疫苗免疫对仔猪发病和成活率的影响
国内外疫苗厂商自2009年以来,针对圆环病毒病陆续推出了全病毒疫苗和蛋白病毒疫苗,但不同厂家生产的圆环病毒病疫苗的价格、生产工艺、疫苗毒株及佐剂都略有不同,导致养殖企业对各种PCV2 疫苗的免疫效果认识不足。从本试验可以看出:疫苗A 对母猪免疫效果比较好,对中大型猪的保护效果比较明显;疫苗B、疫苗C 对断奶仔猪衰竭综合症(PWMS)保护效果比较好,但是对中大型猪呼吸道以及对母猪的免疫效果一般;疫苗D 在临床上效果较差,不推荐使用。
各种疫苗的具体免疫效果,应该与其抗原含量和佐剂有直接关系。疫苗A 抗原含量很高,但佐剂是油佐剂,吸收慢,产生抗体慢,适用于母猪和中大型猪免疫;疫苗B 和疫苗C 免疫效果和临床特性类似,说明圆环病毒病国内全病毒疫苗效果和国外进口蛋白苗效果差不多,质量没有明显区别,因为是水佐剂,适合仔猪断奶时免疫,能快速产生免疫应答,但不适用于母猪和中大型猪免疫;疫苗D 是国产蛋白苗,免疫效果较差,与进口蛋白疫苗质量有一定距离,建议养殖场谨慎使用。
根据国产疫苗的抗原含量、佐剂以及毒株来源,建议养殖场母猪使用抗原含量高、市场主流毒株的主流油佐剂疫苗,仔猪使用抗原含量高的主流毒株水佐剂疫苗,中大型猪使用水包油包水佐剂的高抗原含量的市场主流毒株疫苗,这样在疫苗使用上可以做到优势互补,避免单一使用,对综合防控圆环病毒病效果也更为理想。