不同品牌EDTA-K3真空采血管在外周血细胞参数检测中的差异

李春碧 伏攀

体外诊断设备，如仪器、试剂、血液真空采集管等，对实验室检测数据的准确性至关重要，而多数实验室在使用前没有对上述设备（包括真空采血管）进行验证。国际标准真空采血管以强化玻璃和特种塑料为原材料，由于塑料的分子致密度明显低于玻璃，所以真空和水分的保持程度是评估塑料采血管质量的首要技术指标［1］。目前实验室所有血细胞分析仪采用的抗凝剂均为乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）盐，包括EDTA-Na2、EDTA-K2、EDTA-K3。本研究主要探讨EDTA-K3真空采血管对外周血血细胞检测分析参数的影响，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集100例自愿者的新鲜全血标本，其中男性58例，女性42例；年龄18～40岁。

1.2 仪器与试剂 深圳迈瑞科技股份有限公司生产的全自动血细胞分析仪BC6900；试剂、质控品、校准品均为迈瑞科技股份有限公司生产的配套试剂；真空采血管包括四川瑞奇科技股份有限公司生产的EDTA-K3真空采血管，美国BD公司生产的EDTA-K3真空采血管，江西供达科技股份有限公司生产的EDTA-K3真空采血管。

1.3 检测方法 测试前仪器进行常规保养后校准，再进行质控测定，仪器在控后方可进行下一步实验。分别用3种品牌的EDTA-K3真空采血管采集受检者静脉血各3 mL，立即颠倒混匀10次，标本采集后放置15 min，选择全血自动模式进行上机检测。

1.4 检测指标 检测参数包括红细胞计数（red blood cell count，RBC）、血红蛋白（hemoglobin，HGB）、血细胞压积（hematocrit，HCT）、平均红细胞体积（mean corpuscular volume，MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）、红细胞分布宽度（red blood cell distribution width，RDW）；白细胞计数（white blood cell count，WBC）、淋巴细胞（lymphocyte，LYM）、单核细胞（monocytes，MON）、中性粒细胞（neutrophil，NEU）、嗜酸粒细胞（eosinophilic，EOS）、嗜碱粒细胞（basocyte，BASO）；血小板计数（blood platelet，PLT）、平均血小板体积（mean platelet volume，MPV）、血小板分布宽度（platelet distribution width，PDW）。

1.5 统计学方法 采用SPSS 19.0软件进行数据处理和统计学分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用配对t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

美国BD公司、四川瑞奇公司两种EDTA-K3真空采血管检测的RBC、HCT、HGB、MCV、MCH、MCHC、RDW、WBC、LYM、MON、NEU、EOS、BASO、PLT、MPV、PDW等参数比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）；美国BD公司、江西供达公司两种EDTA-K3真空采血管检测的RBC、HCT、HGB、MCV、MCH、MCHC、RDW、WBC、LYM、MON、NEU、EOS、BASO、PLT差异均无统计学意义（均P＞0.05），但MPV、PDW差异有统计学意义（P＜0.05）；四川瑞奇公司、江西供达公司两种EDTA-K3真空采血管检测的RBC、HCT、HGB、MCV、MCH、MCHC、RDW、WBC、LYM、MON、NEU、EOS、BASO、PLT差异均无统计学意义（均P＞0.05），但MPV、PDW差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 不同品牌EDTA-K3真空采血管血细胞参数检测结果

3 讨论

血细胞分析抗凝剂为EDTA盐，其抗凝原理是EDTA盐与血液中的Ca2+结合形成配位化合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。因EDTA盐对血细胞形态的影响很小，而EDTA的K盐较EDTA的Na盐溶解度大，与血液混合后溶解更快，特别适合用于全血细胞分析，因此国际血液学标准委员会（International Council for Standardization in Haematology，ICSH）建议以EDTA的K盐作为血细胞分析仪抗凝剂，现已被接受并在临床广泛使用。以真空定量采血技术代替传统意义的采血方法具有操作简单方便、快速、采血量精确的优点，已在临床全面推广应用。而生产真空采集试管的塑料材质、试管内真空度，抗凝剂的标准在不同厂家要求不完全一致。由于塑料本身的固有属性，部分真空或管内加入的水分不可避免地会随时间的延长而丢失［2］，引起真空试管内EDTA-K3溶液浓缩，甚至出现固体结晶，影响标本的采集，亦影响标本检测的准确性。根据美国病理家学会（College of American Pathologists，CAP）要求，若使用不同厂商的真空采血管必须进行新鲜全血对比，以确保真空采血管的质量、结果具有可比性，才能应用于临床。

目前，国内外关于各种实验性能验证的标准和指南主要指各检测数据的精密度、准确度、检测底限、参考范围、限行范围等，单独涉及真空采集管性能验证的内容较少，因此本研究采用几种试管对比测试分析进行验证。

通过对比100例新鲜全血标本全血细胞检测结果发现，美国BD公司与四川瑞奇公司EDTA-K3真空采血管检测RBC、HCT、MCV、HGB、WBC、LYM、MON、NEU、EOS、BASO、PLT、MCHC、RDW、MPV、PDW无明显差异，但PDW、MPV差异有统计学意义；而江西供达公司EDTA-K3真空采血管与美国BD公司、四川瑞奇公司相比，MPV、PDW差异有统计学意义，说明江西供达公司的EDTA-K3真空采血管可能存在一种引起MPV和PDW发生改变的未知变异源。MPV可用于鉴别PLT降低的原因，也可用于评估骨髓造血功能的恢复情况；PDW指血小板体积的异质性，是心血管疾病的危险因素；MPV、PDW是血小板活化的标志，并与循环系统血小板的超微结果、酶活性及功能状态密切相关［3］。有研究显示，急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）患者MPV水平明显高于稳定性心绞痛患者和健康人群［4］，MPV和PDW水平可能是冠心病的危险因素，且MPV、PDW与ACS患者预后有相关性。Coban等［5］对高脂血症患者的研究发现，高脂血症患者的MPV明显高于健康人群，当患者使用舒伐他汀治疗12周后，MPV明显降低，提示他汀类药物具有降低血小板活性的作用。2014年，黄莹芝等［6］在研究MPV变化与2型糖尿病和糖尿病肾病的关系中发现，2型糖尿病组的MPV和PDW均高于对照组，且血小板活化因子和血小板源性生长因子均升高。急性肾损伤Ⅲ期MPV水平明显高于Ⅰ期；PDWⅡ、Ⅲ期水平明显高于Ⅰ期，且二者与急性肾损伤分期呈正相关，说明MPV和PDW可随疾病严重程度增加而增加，即疾病越严重，血小板损伤越严重［7］。

对血常规检测而言，不同的EDTA-K3真空采血管是一种未知的变异源，美国BD公司、四川瑞奇公司、江西供达公司生产的3种EDTA-K3真空采血管所用塑料材质、EDTA-K3纯度、试管内真空度、试管密封程度均有差异。目前本实验室主要使用江西供达科技股份有限公司生产的EDTA-K3真空采血管，在日常使用过程中发现，真空度不全一致，致使标本量有时不足3 mL，有时超过3 mL，偶有标本出现凝固现象。经对比发现，江西供达真空采血管MPV、PDW两项指标与美国BD、四川瑞奇采血管有差异。实验室在选择真空采血管时，除考虑成本外，质量才是最重要的。目前，部分临床医师对MPV、PDW两项指标不够重视，但随着认识的加深，上述两项指标将逐渐受到重视，使其更好地应用于临床。