牛结核病检疫方法研究进展核心探索

布于努尔其其格

摘 要 牛结核病作为一种比较严重的人畜共患疾病，会极大的影响畜牧业的生产，对人类健康造成严重威胁。同时，这是一种慢性消耗性疾病，广泛流行于许多国家，为此需要做好与牛分支杆菌有关，为此做好检疫工作至关重要。近年来，科学技术发展迅猛，关于该病检疫方法的研究也取得了很大进展。

关键词 牛结核病；检疫方法；研究进展；核心探索

牛结核病是一种传染疾病，可经吸入含菌气溶胶或食用受污染的乳制品而从牛传染到人身上，这是一种最为古老的疾病，会对人类与动物健康而造成极大的威胁，且造成的经济损失无法估量[1]。当下，该病在世界范围内的形式比较严峻，感染结核分枝杆菌的牛达5000万头，每年造成的经济损失在30多亿美元左右，更是很难精确的统计野生动物的带菌情况。

1 抗酸染色法

病料涂片后进行抗酸染色，使用显微镜对抗酸性杆菌进行镜检，本菌细胞壁包含肽聚糖与特殊糖脂，革兰氏染色在糖脂的干扰下很难进行着染，但是对于30ml/L的石碳酸酒精脱色作用能够进行有效的抵抗，抗酸染色呈现红色，齐尼二氏、荧光抗酸染色法均为主要的染色法。若抗酸性染色微生物存在于组织内，且组织学病变比较典型，在此基础上可进行初步诊断。尽管抗酸染色法不会产生较高的阳性率，但是这是传染检测方法之一，具有一系列优点，如假阳性率不高、价格便宜、操作简单等，可在牛场中直接开展，因此所具有的实用价值较高[2]。

2 细菌分离培养

关于分支杆菌的分离可以采用选择性培养基，鉴定时可以再次进行培养与生化试验，检疫时可利用核酸探针与聚合酶链式反应。若存在其他特殊原因或培养物被污染的情况，则可以进行豚鼠接种的方式，通过再次分离鉴定的方式证实。罗杰及其改良二氏培养基、小川与丙酮酸培养基比较常用，然而结核菌在上述培养基中的分裂时间较长，通常分裂一次需要14-15小时，由此会延长病原学检查周五，菌落看到通常需要10-30天的时间，所取得阳性率不高，在临床上不具备适用性[3]。

3 结核菌素皮内试验

经长期实践证明，这种方法在牛结核病的检测中最为可靠，且广泛应用到世界各国中，缺点在于对因感染其他分枝杆菌而致敏的动物检测结果为阳性 ，不能对病情进行准确的判断，且因病情严重而造成免疫反应不高的动物出现假阳性的可能性较大。同时，该试验消耗的人力较大，再加上检验周期长，因此存在明显滞后性。受DTH滞后效应的影响，不能在一个月之内重复使用该方法。

4 血清学诊断

关于分枝杆菌抗原循环抗体的检测可以采用抗原抗体反应，如荧光偏振检测法、酶联免疫吸附法、免疫印迹法等，这些都已经建立且成功应用。但是，所利用的抗原比较单一，在进行酶联免疫吸附法时使用的是鸡尾酒或重组抗原，导致很难取得良好的试验结果，所取得的特异性与灵敏度并不理想，与预期目标之间仍然存在很大差距[4]。

5 检测菌体成分

该技术所使用的细菌培养物量非常少，只需要10-15mg，相比较于传统生化鉴定方法具有显著优点，如操作简单、快速等，可以作为一种可靠的替代方法，还有学者使用过氧化酶标记的单克隆抗体，其优点在于成本低、操作简单、检测速度快等，缺点为受标本采集与病程影响大，不利于提高准确率。

6 淋巴细胞增生试验

在特异性抗原的刺激下，致敏外周血淋巴细胞会导致抗原特异性T淋巴细胞亚群出现增生反应。采用同位素来标记DNA合成的某种核苷酸；通过对外周血循环增生淋巴细胞比例的测定，便于对具体增生程度进行准确了解，由此可以将细胞被特异性抗原致敏情况间接反映出来。这种方法尽管能够对牛结核个体发病与免疫情况进行有效的监测，但是不适用于检测规模较大的疫情[5]。

7 细胞因子及其受体检测法

这类方法的原理主要体现在通过对抗原刺激活化后分泌的T淋巴细胞活化标记分子的检测，可准确判断机体对某种病原的具体致敏情况，进而判断是否感染该病原。相比较于PPD皮内试验具有显著优势，即反应早、试验迅速且灵敏度高。

8 结束语

由于分子生物学的检测离不开特殊仪器设备的帮助，再加上具有相对复杂的技术，实验室條件与操作人员的要求普遍较高，因此很难在大范围内推广。免疫法检测相对比较简单可靠，但是因试剂比较昂贵，大规模实施成本高，为此需要一段时间才能推广开来。

参考文献：

[1]汤夏.浅谈牛结核病的防治[J].中国畜禽种业，2014，11：117-118.

[2]王东梅. 浅谈牛结核病的症状及防治[J]. 农民致富之友，2012，20：150.

[3] 王金果，刘爱林，周向梅，苑方重，尹晓敏，杨建民，杨利峰，赵德明. 牛结核病诊断方法的研究进展[J]. 中国畜牧兽医. 2010（07）.

[4] 冯向辉，王建永，包永占，赵月兰，左玉柱，秦建华. 牛结核胶体金免疫层析快速诊断方法的建立及初步应用[J]. 动物医学进展. 2010（02） .

[5]杜海力. 探讨牛结核病的诊断与防治 [J].中国畜牧，2016，（12）：95-97.