猪丁型冠状病毒的分析与诊断方法研究

陈少飞

摘 要 猪丁型冠状病毒病是新近报道的猪肠道病毒，其属内病毒基因组特征与其他冠状病毒属存在差异。该病毒主要表现为引起严重的肠炎并伴有小猪腹泻、呕吐，导致仔猪高死亡率，影响成年猪的生产。该病毒临床症状与猪流行性腹泻极为相似，临床较难区分。本文主要对猪丁型冠状病毒的特点与诊断方法进行分析。

关键词 猪丁型冠状病毒；临床症状；诊断方法

猪丁型冠状病毒又称为德尔塔冠状病毒，是新近报道呈现世界流行性的猪肠道病毒病。猪丁型冠状病毒主要感染整段小肠，尤其是空肠、回肠，引起一种临床特征表现为脱水、水样腹泻、呕吐的疾病。我国广泛存在猪流行性腹泻，但关于猪丁型冠状病毒感染报道较少。2012年猪丁型冠状病毒在香港报道。2014年该病在美国首次报道、广泛流行。因猪丁型冠状病毒与猪流行性腹泻临床发病情况极为相似，但发病症状相对较轻，临床较难区分。故本文对猪丁型冠状病毒的特点、诊断方法做一探討。

1 猪丁型冠状病毒的特点

冠状病毒是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，拥有已知RNA病毒中最大的基因组序列长度。国际病毒分类委员会将该冠状病毒亚科分为甲型冠状病毒、乙型冠状病毒、丙型冠状病毒、丁型冠状病毒。丁型冠状病毒能够感染鸟类、哺乳动物。猪丁型冠状病毒病是新近报道呈现世界流行性的猪肠道病毒病，2012年香港大学研究人员发现猪丁型冠状病毒。此后美国、韩国、中国大陆等相继发现该病毒，并获得该病毒本土毒株的全长序列。

猪丁型冠状病毒与甲型冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒类似，能够引起猪肠道疾病，导致腹泻、脱水、水样腹泻，其发病率和死亡率高达50%-100%，导致哺乳阶段仔猪高死亡率，并影响成年猪生产。自2013年起，新出现的甲型冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒已遍布美国，造成大量猪死亡。目前国际上对该病毒的研究较为重视，但国内该病毒的暴发和流行报道较少。

2 猪丁型冠状病毒的诊断

2014年在俄亥俄州农业部动物疫情诊断实验室收到症状与甲型冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒类似的腹泻母猪、死亡小猪的粪便及小肠样本，但该事件中小猪的死亡率低于甲型冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒感染死亡率。样本检测提示无甲型冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、沙门氏菌感染。进一步进行电镜检查结果提示有冠状病毒样病毒颗粒。故研究者设计了特异性检测丁型冠状病毒的RT-PCR检测方法，成功检测到了样本中猪丁型冠状病毒的存在。

此外，也有研究者建立荧光定量PCR方法进行猪丁型冠状病毒的检测。与普通PCR检测相比，荧光定量PCR具有精准、快速、灵敏的特点，并且能够实现病毒定量分析。除了上述PCR检测方法，新近研发的一种抗PDCoV IgG间接ELISA检测方法也开始用于猪丁型冠状病毒的诊断，获得了较高的灵敏度和特异性。在此基础上有学者建立了基于重组N蛋白检测PDCoV抗体的间接ELISA检测法，也有学者应用间接免疫荧光检测法检测细胞中的丁型冠状病毒，这两种方法能显示病毒感染细胞、部位等，对于体外感染、病理研究等有重要意义。

3 结束语

猪丁型冠状病毒是近年来发现的猪肠道病毒，相关研究报道较少。但随着该病毒在美国的流行，关于该病毒流行病学、序列分析、致病性等研究日趋增多。目前许多学者已建立了不同的猪丁型冠状病毒实验室检测方法，也获得部分国家和地区的流行情况，但尚缺乏稳定的商品化检测试剂盒。故在今后的研究中，猪丁型冠状病毒高效临床检测方法、疫苗研发等将成为重点，以降低猪丁型冠状病毒对养猪产业带来的威胁。

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