凸尖杜鹃组培快繁体系的构建

张信玲 李新艺 李娜 孔令芳

摘要：通过对凸尖杜鹃（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）實生苗的启动与增殖培养，探索适宜凸尖杜鹃的灭菌方法及其启动与增殖培养基配方，以建立凸尖杜鹃的组织培养体系。结果表明，两种杜鹃用0.1%的HgCl2灭菌8 min真菌污染率较低，在此处理下凸尖杜鹃和泡泡叶杜鹃（Rhododendron edgeworthii Hook. f.）的真菌污染率分别为5%和10%;当培养基中的吲哚丁酸（IBA）浓度为0.3 mg/L、玉米素（ZT）浓度为0.01 mg/L时，凸尖杜鹃实生苗的启动率最高，达到80%;当噻苯隆（TDZ）的浓度为    6 mg/L时，增殖倍数最高，达到5.32。

关键词：凸尖杜鹃（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）;组织培养;生长素;细胞分裂素

中图分类号：S685.21;Q943.1         文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2019）09-0124-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.09.030           开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Abstract： Through the initiating and proliferating culture of Rhododendron sinogrande seedling， the sterilization method and media components of initiating and proliferating culture suitable for R. sinogrande were explored to establish the tissue culture system of R. sinogrande. The results showed that， the fungus contamination rate of two kinds of Rhododendron were lower when they were sterilized for eight minutes under 0.1% HgCl2， and the fungus contamination rate for R. sinogrande and R. edgeworthii Hook. f. was 5% and 10%， respectively. The initiation rate of R. sinogrande seeding was the highest for 80%， when the concentration of IBA was 0.3 mg/L and the concentration of ZT was 0.01 mg/L in the medium; The multiple proliferation was the highest for 5.32， when the concentration of TDZ was 6 mg/L in the medium.

Key words： Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.; tissue culture; auxin; cytokinin

凸尖杜鹃（Rhododendron sinogrande Balf. f. et W. W. Sm.）为常绿乔木，属杜鹃花科杜鹃花属，原产于云南西部和西北部、西藏东南部，生于海拔    2 100～3 600 m的高山杜鹃林或针叶林中。该物种花型美丽，颜色鲜艳，具有很高的观赏价值，在盆栽中的应用性也很高。但是，由于它生长于海拔较高的地方，且生长环境特殊，同时受季节和母本材料等的限制，导致目前无法进行大量的商品化生产。

杜鹃花属于中国十大名花之一，深受广大花卉爱好者的喜爱，但其栽培繁殖存在一定的问题。杜鹃的繁殖方式主要是种子繁殖、扦插繁殖、压条繁殖、嫁接繁殖等[1]。杜鹃花科植物的多数种在扦插繁殖过程中往往难以生根，并且由于多种因素的影响，杜鹃花科植物扦插即使生根，通常也难以成活[2]。再者，播种、扦插和嫁接等方法比较容易受季节和母株材料的影响，导致杜鹃繁殖系数降低，并且生长周期长，不适宜进行大规模的商业化生产[3]。

运用植物组织培养技术繁育观赏植物，具有繁殖系数高、繁殖速度快、不受季节影响、易于产业化等优点[4]。因为组织培养属于无性繁殖，后代产生变异的可能性较低，同时，比起常规的扦插、嫁接、种子繁殖等方法，它的繁殖速度成倍增加，且繁殖率很高[5]。目前，国内对杜鹃花的研究主要集中在种子繁殖、扦插繁殖、压条繁殖、嫁接繁殖以及植物分类学研究等方面，而对其组培快繁体系建立的研究报道较少[6]。杜鹃资源的组织培养只在少数几个种类上进行过研究[7，8]，而鲜见关于凸尖杜鹃的组织培养研究。为此，试验通过对凸尖杜鹃组织培养体系的构建，以期为其商品化生产奠定基础。

1  材料与方法

1.1  材料

1.1.1  研究对象  以凸尖杜鹃为研究对象，播种后，待实生苗长到1.0～1.5 cm时作为组织培养的外植体。

1.1.2  试剂及仪器设备

1）试剂。1/4 MS培养基、玉米素（ZT）、吲哚丁酸（IBA）、噻苯隆（TDZ）、NaOH溶液、0.1% HgCl2溶液、75%的乙醇、工业乙醇、无菌水。