宋 波,何 灿,文国琴
(西华师范大学 生命科学学院,四川 南充 637000)
随着人们生活水平提高,与此同时消费观念也在发生转变,人们在日常生活中使用的洗手产品,已经不仅局限于肥皂和香皂了,使用洗手液的人数逐渐变多。因为肥皂和香皂有很多缺点,如在使用时很大可能会从手中掉落,而且气候的变换会影响使用如夏天香皂会变软。最主要的是它们会沾上手上的脏东西,很容易出现交叉感染。相对而言洗手液就具有一些优势,洗手液大多都是液体,通过挤压瓶体泵头取量,这样的方式不仅很方便控制用量而且避免了细菌的交叉感染问题[1]。洗手液的最基础的作用就是清洁双手还在一定程度上保护了手部皮肤,通过在市场的观察,我们可以发现,市场上售卖的洗手液种类较多,品牌数量可达数十种,这让消费者在挑选时存在一定困惑。同时也能发现大多数的洗手液品牌都标明具有抗菌、抑菌作用,杀菌类洗手液不仅有清洁皮肤的作用,同时有抗菌、抑菌的效果,具有广泛的市场前景。
现在社会更注重生活品质的提高,消费者以前大多数都是使用肥皂和香皂作为洗手产品,现在的消费者则喜欢使用洗手液这种新型的产品,除了对洗手液要求具有基本的清洁功能外,消费者也往往期待有其他的一些功能。商家也推出了多种类型的洗手液,洗手液按功能大致分为三种:一是普通洗手液,起到清洁去污的作用;二是特殊洗手液,具有一定清洁及抗菌、抑菌等功能;三是重油污洗手液,用于工业类油污( 例如机油、汽油、黄油、柴油等) 和顽固污渍的清洗[2]。本次实验的对象就是特殊类的洗手液,就是实验观察具有抑菌作用的洗手液具体的效果如何。面对众多品牌,消费者不知道如何选择,针对洗手液的抑菌效果,本实验检测和比较了3种常见洗手液的抑菌效果,可以帮助消费者们们更好的地选择一些品牌的洗手液。
3种市售品牌洗手液,分别为蓝月亮、优颂、威露士。
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌,取自西华师范大学微生物实验室。
电子分析天平、无菌操作台、移液枪、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、分光光度计等。
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、蒸馏水。
1.4.1 圆形滤纸片的制备
用直径为8mm的圆形打孔器制备多个圆形滤纸片,完成后放入培养皿,并用报纸保好然后121℃高压蒸汽灭菌30min[3-4]。
1.4.2 菌液制备图
从已经生长好的菌种斜面上挑取少量的菌种移植至另一新鲜斜面培养基上,将新接种细菌的斜面试管放入恒温培养箱中培养24h后,备用。待长出细菌后,将两种供试菌进行活化,用适量无菌水稀释制成菌悬液,备用。测OD值,使OD保持在0.25左右。
1.4.3 涂布平板
用移液枪吸取0.1mL已经制备好的菌悬液至牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的表面中央。,用涂布器将菌液均匀的涂布在培养基的表面,使菌液分布均匀静置几分钟备用[5]。
1.4.4 样品的稀释
用无菌水对3种洗手液进行稀释处理,稀释浓度为100%原液、80%稀释液及60%的稀释液。
1.4.5 滤纸片法测定抑菌效果
将大小相同直径为8mm的圆形滤纸片浸入相应浓度的洗手液中,然后将滤纸片放入已经涂布有大肠杆菌和金黄色葡萄杆菌的平板中央,在培养皿盖上贴上标签,做好标记。将培养皿倒置放入恒温培养箱中于37℃培养24小时后用游标卡尺测量抑菌圈的直径。
图1 浓度为60%、80%、100%的威露士对大肠杆菌的抑制效果
图2 浓度为60%、80%、100%的威露士对金黄色葡萄球菌的抑菌效果
如图1所示为三种浓度威露士洗手液对大肠杆菌的抑菌效果。如图2所示是三种浓度威露士洗手液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。我们能看出随着浓度的增大,抑菌圈的直径越大,这说明浓度越大,威露士洗手液的抑菌作用越强。
通过对比发现,随着浓度的增大,金黄色葡萄球菌的抑菌效果变化更明显。由两图可知培养基上滤纸片周围均产生抑菌圈,抑菌圈的大小不同,表明浓度为60%、80%、100%的威露士洗手液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑菌作用且抑菌效果不同。
图3 浓度为60%、80%、100%的蓝月亮洗手液对大肠杆菌的抑制效果图
图4 浓度为60%、80%、100%的蓝月亮洗手液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果
如图3所示从左到右依次为蓝月亮洗手液浓度为60%、80%、100%时对大肠杆菌的抑菌效果。由图4可知从左到右依次是蓝月亮洗手液浓度为60%、80%、100%时对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。由两图可知培养基上滤纸片周围均产生抑菌圈,抑菌圈的大小不同,表明浓度为60%、80%、100%的蓝月亮洗手液对大肠杆菌具有抑菌作用,对金黄色葡萄球菌也有抑菌作用,两者的抑菌效果不同。
图5 浓度为60%、80%、100%的优颂洗手液对大肠杆菌的抑制效果图
图6 浓度为60%、80%、100%的优颂洗手液对金黄色葡萄球菌的抑制效果图
如图5所示从左到右依次为优颂洗手液浓度为60%、80%、100%对大肠杆菌的抑菌效果。由图6可知从左到右依次是优颂洗手液浓度为60%、80%、100%对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。由两图可知培养基上滤纸片周围均产生抑菌圈,抑菌圈的大小不同,表明浓度为60%、80%、100%的优颂洗手液对大肠杆菌具有抑菌作用,对金黄色葡萄球菌也有抑菌作用,两者的抑菌效果不同。
表1 三种浓度威露士洗手液的抑菌圈直径
由表1可知,威猛先生洗手液浓度分别为60%、80%、100%时,对大肠杆菌产生的抑菌圈直径依次是20mm、21mm、22mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径依次是18mm、23mm、25mm。产生的抑菌圈直径越大,说明洗手液的抑菌效果越好。从表中我们可以发现,威猛先生洗手液的浓度越高,其对两种细菌的抑制作用越强。而且,当浓度为60%时,洗手液对大肠杆菌的抑制作用比对金黄色葡萄球菌强,但是当浓度为80%和100%时,洗手液对大肠杆菌的抑制作用比金黄色葡萄球菌弱。
表2 三种浓度蓝月亮洗手液的抑菌圈直径
由表2可知,蓝月亮洗手液浓度分别为60%、80%、100%时,对大肠杆菌产生的抑菌圈直径依次是28mm、35mm、30mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径依次是30mm、28mm、25mm。产生的抑菌圈直径越大,说明洗手液的抑菌效果越好。从表中我们可以发现,蓝月亮洗手液的浓度越高,其对金黄色葡萄球菌的抑制作用越强,但是对大肠杆菌的抑制作用出现异常,浓度为100%时的,大肠杆菌的抑菌圈直径小于浓度为80%时的直径。同时我们可以发现,当浓度为60%时,洗手液对大肠杆菌的抑制作用比对金黄色葡萄球菌弱,但是当浓度为80%和100%时,洗手液对大肠杆菌的抑制作用比金黄色葡萄球菌强。
表3 三种浓度优颂洗手液的抑菌圈直径
由表3可知,浓度分别为60%、80%、100%时,优颂洗手液对大肠杆菌产生的抑菌圈直径依次是20mm、22mm、28mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径依次是18mm、24mm、28mm。抑菌圈直径越大,说明洗手液的抑菌效果越好。从表中我们可以发现,优颂洗手液的浓度越高,其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用越强。而且,当浓度为60%时,洗手液对大肠杆菌的抑制作用比对金黄色葡萄球菌强,当浓度为80%时,洗手液对金黄色葡萄球菌的抑制作用比大肠杆菌强,当浓度为100%时,洗手液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果相同。
表4 浓度为60%时三种洗手液的抑菌圈直径
由表4可知,当三种洗手液浓度都为60%时,威露士、蓝月亮、优颂对大肠杆菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是28mm、20mm、20mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是30mm、18mm、18mm。抑菌圈直径越大,抑菌效果越好,所以3种品牌中,蓝月亮的抑菌效果最好,威露士和优颂效果相同。
表5 浓度为80%时三种洗手液的抑菌圈直径
由表5可知,当三种洗手液浓度都为80%时,威露士、蓝月亮、优颂对大肠杆菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是35mm、22mm、21mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是28mm、24mm、23mm。抑菌圈直径越大,抑菌效果越好,所以3种品牌中,蓝月亮的抑菌效果最好,优颂次之,威露士最差。
表6 浓度为100%时三种洗手液的抑菌圈直径
由表6可知,当三种洗手液浓度都为100%时,威露士、蓝月亮、优颂对大肠杆菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是30mm、28mm、22mm;对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈直径从大到小依次是28mm、25mm、25mm。抑菌圈直径越大,抑菌效果越好,所以3种品牌中,蓝月亮的抑制大肠杆菌的效果最好,优颂次之,威露士最差。优颂抑制金黄色葡萄球菌的效果最好,威露士和蓝月亮相同。
由实验可知,3种洗手液都产生了抑菌圈,说明它们均对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用,其中蓝月亮洗手液经过一系列的浓度梯度的稀释,其大肠杆菌抑菌圈直径一直保持在最大,所以蓝月亮抑制大肠杆菌效果最好,优颂和威露士抑菌效果次之。浓度为60%和80%时,蓝月亮抑制金黄色葡萄球菌的效果最好,浓度为100%时,优颂效果最好。从总体上看,蓝月亮的抑菌效果最好,优颂次之,威露士最差。
产品的有效抑菌成分:蓝月亮抑菌洗手液为o-苯基苯酚[6],威露士洗手液为对氯间二甲基苯酚(PCMX)0.18%~0.22%,优颂洗手液为对氯间二甲基苯酚0.2%~0.3%。从实验现象,我们发现三款洗手液都能产生抑菌圈,但抑菌圈的直径大小不同,这可能与三种洗手液的抑菌成分有关,其中,o-苯基苯酚这一抑菌成分的效果比对氯间二甲基苯酚好一些。尽管威露士洗手液和优颂洗手液的抑菌成分相同,都为对氯间二甲基苯酚,但它们产生的抑菌圈大小仍不同,原因可能是抑菌成分的浓度不同,优颂洗手液中抑菌成分稍高。
勤洗手是控制疾病的传播和防止感染最有效、最简单可行的方法,对消化道传播的疾病和经呼吸道传播的疾病都有良好的预防作用[7]。