益气滋阴通腑方对吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能的影响

郭占芳 张红武 杨如意 曹昌霞 孙兆 徐海珍 王宏斌 王秋萍

摘要：目的  研究益氣滋阴通腑方对吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能的影响。方法  将昆明种小鼠90只，随机分为6组，分别设为西沙比利组、模型组、空白组、中药高、中、低剂量组，每组15只。除空白组外，其余5组均予皮下注射吗啡，建立慢性传输型便秘（STC）模型。中药高、中、低剂量分别给于7.2、3.6、1.8 mg/（kg·d）益气滋阴通腑方颗粒剂浓缩液灌胃，模型组、空白组均予同等量次的蒸馏水注入胃内，各组均灌胃10 d。实验结束后，小鼠回盲部注入活性炭悬液，以检测小鼠肠道传输功能，在无张力状态下测量肠道全长及被墨汁染色的肠道长度，继而计算肠道推进率。结果  益气滋阴通腑方高、中、低各组均可改善肠动力障碍，与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05），但不同剂量组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。中药各组与西沙比利组比较，效果接近，差异无统计学意义（P>0.05）。但同时我们观察到，中药组的小鼠在整个实验过程中，无论是皮毛、精神状态、进食量，均明显好于西药组。结论  中药益气滋阴通腑方对吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能障碍有明显改善作用，显著改善肠道动力，并可提高小鼠生存质量。

关键词：益气滋阴通腑方;肠道传输功能;小鼠;吗啡

中图分类号：R574.62                                文献标识码：A                                DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.09.052

文章编号：1006-1959（2019）09-0156-02

Abstract：Objective  To study the effect of Yiqi Ziyin Tongfu Recipe on intestinal transit function in mice with constipation caused by morphine.Methods  90 Kunming mice were randomly divided into 6 groups， which were set to cisapride group， model group， blank group， Chinese medicine high， medium and low dose groups， 15 in each group. Except for the blank group， the other 5 groups were given subcutaneous injection of morphine to establish a chronic transit constipation （STC） model. The high， medium and low doses of traditional Chinese medicine were given to 7.2，3.6，1.8 mg/（kg·d）Yiqi Ziyin Tongfu Granules concentrated solution. The model group and the blank group were all injected into the stomach with the same amount of distilled water， and each group was intragastrically administered for 10 d. At the end of the experiment， the activated carbon suspension was injected into the ileocecal part of the mouse to detect the intestinal transit function of the mouse， and the length of the intestine and the length of the intestine stained by the ink were measured under no tension， and then the intestinal propulsion rate was calculated.Results  The high， middle and low groups of Yiqi Ziyin Tongfu Recipe could improve intestinal dysmotility. Compared with the control group， the difference was statistically significant （P<0.05）， but there was no significant difference between the different dose groups（P>0.05）. Compared with the cisapride group， the effects of the Chinese medicine group were similar，the difference was not statistically significant （P>0.05）. At the same time， we observed that the mice in the Chinese medicine group were significantly better than the western medicine group in terms of fur， mental state and food intake throughout the experiment. Conclusion  The Chinese medicine Yiqi Ziyin Tongfu Recipe can significantly improve intestinal transit dysfunction in mice with constipation caused by morphine， significantly improve intestinal motility and improve the quality of life of mice.

Key words： Yiqi Ziyin Tongfu Recipe;Intestinal transit function;Mouse;Morphine

吗啡所致便秘属慢传输型便秘（STC）的一种，目前发病机制尚不明确。新近研究认为肠神经系统（ENS）相关递质可能在其发生发展中起关键性作用。以往研究显示自拟益气滋阴通腑方治疗硫酸吗啡控释片所致便秘患者，可有效缓解因口服吗啡所致便秘患者的临床症状，提升血清胃动素水平[1]，有效率达90%以上。基于此，本研究拟通过建立吗啡诱导的小鼠便秘模型，观察益气滋阴通腑方治疗吗啡所致小鼠便秘的效果，进而为吗啡所致便秘的发病机制及临床诊治提供参考。本研究通过观察益气滋阴通腑方对吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能的影响，进一步探讨益气滋阴通腑方对吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能的影响的防治作用。

1材料与方法

1.1实验动物  选取检疫合格小鼠90只，雌雄各半，体重23～29 g，购自西安交通大学医学院实验动物中心。实验动物质量合格证编号：61001700002872，实验动物许可证编号SCXK（陕）2017-003。实验前分笼饲养，适应性喂养3 d。

1.2药品及试剂

1.2.1药品  ①盐酸吗啡注射液（青海制药厂，生产批号：161210-1，10 mg /支）1支，加9 ml灭菌注射用水配成1 mg/ml的吗啡注射液溶液，贮存于4 ℃冰箱备用。②西沙比利（西安杨森制药有限公司，生产批号：H10960289，5 mg/片），放入研钵中细研后，使用注射用水配置成2%的溶液，贮存于4℃冰箱备用。③益气滋阴通腑方颗粒剂：白术30 g、黄芪30 g、地黄15 g、玄参10 g、木香10 g、麻仁15g、大黄10 g，由本院中药房提供及鉴定，将药物混合浸泡1 h后，分别制成1 g/ml、2 g/ml、4 g/ml的浓缩液，贮于4℃冰箱中备用。

1.2.2试剂  印度墨水，购自西宁恒硕生物科技有限公司。用药结束后，各组小鼠禁食水24 h，局部麻醉成功后，经回盲部推入印度墨水0.5 ml。

1.3动物分组  按照随机数字表法将小鼠分成6组，即模型组、空白组、西沙比利组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组，每组15只。

1.4模型制备  空白组予正常喂养，另5组进行STC模型制备。参照许海尘等的方法[2]。按2.5 mg/（kg·d）的剂量予1 mg/ml的吗啡注射液皮下注射，1次/d，连续45 d建立STC模型。观察小鼠第1次黑色大便排出时间、日均排便粒数和平均每粒粪便质量等的测定结果，测定小鼠肠道动力减退，粪便重量减少，肠道推进力减弱，符合慢传输型便秘的生理特点，评价STC模型制备成功。

1.5给药方法  按小鼠体表面积换算出每天所需剂量。中药高、中、低剂量组分别予7.2、3.6、1.8 mg/（kg·d）益气滋阴通腑方颗粒剂浓缩液灌胃，西沙比利组予2.9 mg/（kg·d）西沙比利溶液灌胃，空白组、模型组给同等量的蒸馏水灌胃，各组均灌胃14 d。

1.6标本采集及指标检测  使用印度墨水，运用活性炭溶液推进法检验小鼠肠道传输功能。治疗后所有小鼠禁食24 h。使用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（40 mg/kg），仰卧固定在手术台，剪去腹毛，常规消毒，纵行切开腹部正中约2.5 cm，用皮试注射器经回盲部推入印度墨水0.8 ml。2 h后取出回盲部至肛门的肠道，在无张力情况下测量被墨汁染色的肠道长度及全部肠道的长度，计算肠道推进率。肠推进率=印度墨水推进距离/肠道全长×100%。

1.7统计学方法  采用SPSS 19.0统计学软件进行分析，计量资料使用（x±s）表示，正态分布资料的两组组间比较采用配对样本的LSD-t检验，计数资料使用（%）表示，比较采用？字2检验，检验水准α=0.05，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

中药益气滋阴通腑方各组与空白组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。中药高、中、高剂量组之间比较，差异无统计学意义（P>0.05）;中藥各组与西沙比利组比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

3讨论

STC属于中医“便秘”范畴，常见原因有饮食不节、情志失调以及年老体虚等[3]。中医认为，阿片温燥，辛香走串，能引起大小肠气机不畅导致便秘[4]。益气滋阴通腑方由白术、黄芪、地黄、玄参、木香、麻仁、大黄组成，其中白术具有益气健脾的疗效，临床多用于脾虚食少，腹胀泄泻等，老中医经验重用生白术可治疗便秘[5]。黄芪有非常好的益气功效，临床常用于气虚证的治疗;玄参滋阴清热，用于热病伤津;木香可行气理气，用于脾胃气滞证;麻仁润肠通便，用于肠燥便秘;大黄具有攻积滞、清湿热、泻火、凉血、祛瘀、解毒等功效，成分有多种蒽醌类化合物[6]。本研究通过建立吗啡诱导的小鼠STC模型，观察该方剂对便秘小鼠肠道传输功能的影响，进而为STC的发病机制及临床诊治提供参考。

肠动力功能主要与肠道蠕动力量有关[7]，其受到多种因素的影响[8]，如不良的生活习惯、药物因素等多因素作用的结果。肠推动率是观察小鼠肠动力的重要指标。本研究中，益气滋阴通腑方高、中、低各组均可明显改善肠动力障碍，并且各组之间无明显差异，说明中医药治疗该类疾病时，只要辩证准确，即能受到良好的疗效，与剂量无明显的相关性。中药各组与西沙比利组比较，效果接近，说明中药组疗效与西药常规治疗效果接近。

综上所述，益气滋阴通腑方高、中、低量组均可有效改善吗啡所致便秘小鼠肠道传输功能障碍，并与传统药物西沙比利组相似，为今后临床更好运用益气滋阴通腑方治疗因服用吗啡类制剂所致便秘患者提供了有力的证据。

参考文献：

[1]郭占芳，张红武，杨如意，等.益气滋阴通腑方治疗硫酸吗啡控释片所致便秘的临床研究及对胃动素的影响[J].中药药理与临床，2017，33（1）：204-206.

[2]许海尘，林琳，张红杰，等.慢传输型便秘模型的建立及其机制探讨[J].医学研究生学报，2004，17（6）：502-504.

[3]周仲瑛.中医内科学[M].第2版.北京：中国中医药出版社，2007：249-256.

[4]翟春霞.中医治疗吗啡类药物所致便秘的进展[J].中国中医药科技，2014，21（2）：371-372.

[5]张建国，张勇前，雷威，等.邵金阶重用生白术治疗便秘的经验[J].基层医学论坛，2018，22（22）：3143-3144.

[6]陈东东，李丽，张村，等.提取温度和时间对大黄片主要蒽醌苷类成分的影响[J].中国实验方剂学，2009，15（10）：50.

[7]董佳容，陆金根.复方中药治疗慢性功能性便秘实验研究进展[J].辽宁中医药大学学报，2015，17（3）：219-222.

[8]贡钰霞，王浩，钱海华，等.枳实、白术配伍治疗慢传输型便秘量效分析[J].河南中医，2018，38（7）：1066-1069.

收稿日期：2019-1-6;修回日期：2019-2-14

编辑/宋伟

基金项目：青海大学中青年课题（编号：2016-QYY-8）

作者简介：郭占芳（1974.11-），男，青海西宁人，本科，主任医师，副教授，主要从事中医肿瘤方向的研究