7-脱甲氧基娃儿藤碱(DEM)镇痛抗炎作用试验

张永康， 杨 刚， 李生虎

(宁夏职业技术学院，宁夏 银川 750021)

7-脱甲氧基娃儿藤碱(DEM)，又名安托芬，是牛心朴子(CynanchumkomanoviiAL Iljinshi)中的主要有效成分，研究发现其具有抗肿瘤、抗菌、杀菌等药理活性[1]，但对7-脱甲氧基娃儿藤碱(DEM)的抗炎镇痛作用未见报道，鉴此，本研究通过小鼠热板法试验和二甲苯致小鼠耳壳肿胀试验，对DEM的镇痛作用和抗炎作用进行试验。

1 材 料

1.1 试验药物

7-脱甲氧基娃儿藤碱(DEM)，由笔者工作所在实验室从牛心朴子植物中分离得到。二甲苯，批号870116分析纯，西安化学试剂厂生产。

1.2 试验仪器

Db-2型电热板，苏州威尔实验用品有限公司制造；AR1140电子天平，美国制造。

1.3 试验动物

ICR小鼠100只，体重18～24 g，雌、雄小鼠各50只，购于宁夏医科大学实验动物中心，试验动物均于室温下自由饮水采食，所喂饲料为全价条状饲料，购于宁夏医科大学实验动物中心。

2 方 法

2.1 DEM对小鼠热板法镇痛作用的影响

选用水温55 ℃的水浴锅，把小鼠置于水浴锅上，小鼠因热刺激而出现舔后足或踢后腿或四肢乱动的反应，以此反应为痛反应指标，若反应时间延长，则表明该药具有镇痛作用，但以60 s为限，不出现反应把小鼠取出，以免损伤足部[2]。选取30只雌小鼠(雄小鼠因阴囊受热刺激易松弛，与“热板”接触面积较大，常影响反应结果)，随机分为3组，每组10只，第1组为对照组，第2组为10 mg/kg药物组，第3组为30 mg/kg药物组，臀部肌肉注射，试验时用秒表记录小鼠自放于热金属板上至出现疼痛反应的时间，作为痛阈的指标。在给药前先测定每只小鼠的痛阈，反应不规则者，如过敏、迟钝、或喜跳动者挑出不要，给药后在第1 h内每隔15 min测定一次痛反应时间，记录痛阈值并进行统计学分析(t检验，组间比较)。

2.2 DEM对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响[3]

小鼠40只随机分为4组，每组10只，第1组为生理盐水对照组，第2组、第3组、第4组分别为0.25 mg，0.50 mg，0.75 mg剂量组，臀部肌肉注射DEM注射液，每次0.5 mL，每12 h注射1次，共注射3次，对照组注射等量生理盐水，末次给药1 h后于小鼠左耳涂二甲苯(25 μL/耳)，45 min后用打孔器打下2片耳片称重，以左右耳重量差计算耳增重。

3 试验结果

3.1 DEM对小鼠热板法镇痛作用

选取30只雌小鼠，随机分为3组，每组10只，第1组为对照组，第2组为10 mg/kg药物组，第3组为30 mg/kg药物组，臀部肌肉注射，试验时用秒表记录小鼠自放于热金属板上至出现疼痛反应的时间，作为痛阈的指标。结果表明，30 mg/kg体重的DEM对热板法所致小鼠的疼痛反应具有明显的抑制作用，结果见表1。

表1 DEM对小鼠热板法痛阈值的影响

注：a表示与生理盐水组相比较差异极显著；b表示与给药前相比较差异极显著(P<0.01)。

3.2 DEM注射剂对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响

以二甲苯所致小鼠耳壳肿胀作用为模型，把40只小鼠随机分为4组，肌肉注射不同剂量DEM注射液，对照组注射等量生理盐水，末次给药1 h后于小鼠左耳涂二甲苯，45 min后用打孔器打下2片耳片称重，以左右耳重量差计算耳增重。试验结果(表2)表明，最小剂量在0.50 mg/kg时对二甲苯所致小鼠的耳壳肿胀有明显的抑制作用(P<0.01)，作用与剂量呈正相关性。

表2 DEM注射剂对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响

注：a表示与生理盐水组相比差异极显著；b表示与0.25 mg相比差异极显著(P<0.01)。

4 讨 论

牛心朴子又称老瓜头(CynanchumkomaroviiAL Iljinshi)，属于萝摩纲萝摩科鹅绒藤属(CynanchumL.)植物，为直立半灌木，高达50 cm，常生长在沙漠、河边及荒山坡，垂直分布可达2 km左右。民间用于镇痛、杀虫, 藏医用于退烧、止泻，也用于治疗胆囊炎。近年来研究发现牛心朴子在医学上有抗癌、抗炎、抗菌、止咳、祛痰及平喘作用。张永康等[4]报道牛心朴子总碱对家兔的乳房炎有一定的治疗作用；张珠明等[5]报道牛心朴子总碱对引起奶牛乳腺炎的常见致病菌在体外有一定的抑制作用，揭示出牛心朴子在治疗奶牛乳房炎方面具有很大潜力。祁利明等[6]报道牛心朴子总生物碱对腹腔注射醋酸引起的小鼠扭体有明显的镇痛作用，而其挥发油的镇痛作用不明显；农兴旭等[7]报道其总生物碱36.5 mg/kg，给药2 h后均可明显抑制由角叉菜胶所致大鼠足肿胀作用；杨卫东等[8]报道牛心朴子总碱对急慢性炎症模型具有明显的抑制作用，可以明显降低大鼠足趾肿胀部位的炎症组织内PGE2的含量，提示牛心朴子总碱的抗炎作用与其抑制炎症部位的PGE2合成和释放有关。杨文莉等[9]报道牛心朴子生物总碱对大鼠佐剂性关节炎的继发性炎症有抑制作用。陈靖等[10]报道老瓜头镇痛、抗炎的活性部位在二氯甲烷层。本研究通过热板法对DEM的镇痛作用进行试验，结果表明DEM的浓度在30 mg/kg体重具有明显的镇痛作用。通过二甲苯致小鼠耳壳肿胀的试验，证明DEM剂量在0.50 mg时对二甲苯致小鼠的耳壳肿胀有明显的抑制作用，进一步揭示了牛心朴子生物碱中具体成分DEM的抗炎作用，关于抗炎的具体机理，还需更进一步研究。