E-cad启动子区甲基化与其在子宫内膜异位症的表达的相关性分析

叶丽珍

（广东省广州医科大学附属第二医院妇产科 510260）

研究目的：本研究通过检测子宫内异症的异位内膜及对照组在位内膜组织的E-cad启动子区甲基化状况与其蛋白表达关系，探索内异症可能的发病机制，以及在发生、发展中的作用，为子宫内膜异位症的治疗找到新的突破点，并为进一步可能的临床治疗建立理论基础。

研究方法：

1.样本资料：采用随机对照法，收集广州医科大学附属第二医院妇科2013年1月至2015年1月手术治疗的并经病理证实的标本共65例，其中异位内膜组织（巧克力囊肿囊肿）45例为研究组，对照组为20例同期因诊刮、子宫切除而取到的正常子宫内膜组织。

2.方法：通过免疫组化、Western Blotting检测E-cad异位与在位内膜表达情况；并采用甲基化特异性PCR检测异位与在位内膜E-cad启动子甲基化状况。

3.统计学分析：采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。用X2和Spearman's等级相关性分析比较异位内膜与正常子宫内膜E-cad蛋白表达及甲基化情况。P＜0.05有统计学意义。

对比结果：

1.内异症组E-cad蛋白阳性率为40%，对照组中E-cad蛋白阳性率为 100%。Χ2=20.526，P=0.000，P＜0.05，有统计学意义。

2.内异症组13例I-II期样本中，E-cad蛋白阳性率为61%，17例III期样本中，E-cad蛋白阳性率为41%，15例IV期样本中，E-cad阳性表达率降低为2%，内异症组E-cad蛋白阳性率在不同的临床分期呈直线相关，Χ2=5.023,P=0.081，P>0.05，无统计学意义。

3.45 例内异症组中甲基化例数为26例，甲基化率为58%；20例对照组中甲基化例数为0，甲基化率为0%。X2=19.259,P=0.000，P＜0.05。有统计学意义。

4.内异症组I-II期E-cad启动子甲基化率为23%，III期甲基化率为 59%，IV 期甲基化率为 86%。Χ2=9.702，P=0.008，P＜0.05，有统计学意义。

5.Spearman's等级相关分析显示在内异症不同临床分期中E-cad启动子甲基化与蛋白表达之间相关系数，分别是I-II期r=-0.850，III期 r=-0.842，IV 期 r=-0.961，P=0.000，P＜0.05，有统计学意义。

（一）内异症组异位内膜和对照组在位内膜组织中E-cad蛋白表达情况分析

把收取的45例内异症异位内膜和20例对照组正常子宫内膜样本为对照分别石蜡包埋切片，以E-cad为一抗，进行免疫组化试验，得到每个样本的免疫组化的组织切片，按照上面试验方法介绍的E-cad蛋白表达阳性与阴性判定方法，判定E-cad蛋白是否表达。按照要求读片，根据文献报道正常的子宫内膜腺上皮有E-cad表达，而内异症中E-cad蛋白有低表达或者不表达。实验结果见表1内异症组、对照组E-cad蛋白阳性率表达比较。（n,%）

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E-cadheri n基因启动子CpG岛的异常甲基化可能是导致蛋白表达下调的原因之一。诸多恶性肿瘤中，E-cad基因启动子区域呈现高度甲基化引致的E-cad表达丧失是肿瘤侵袭性的可能机制，那么，在具有与恶性肿瘤相似远处种植行为的内异症发病中，E-cad启动子甲基化也可能是引起该基因表达下降或丧失的关键原因。

结论

E-cad在子宫内膜异位症中呈低表达，E—Cad启动子5端CpG岛甲基化可能是内异症中该基因失活的机制之一。E-cad启动子区域5’CpG岛在内异症中呈高甲基化状态，而在正常内膜组织则为非甲基化状态，E-cad基因启动子异常甲基化可能与为内异症有密切相关性，可能参与内异症的发生、发展。E-cad基因启动子区域5’CpG岛在III、IV期内异症者中的甲基化率显著高于I、II期，而E-cad蛋白表达率则相反。E-cad启动子甲基化程度越高，其蛋白表达越低，内异症临床分期越晚。