姚少玲 南安市动物疫病预防控制中心 福建南安 362300
猪瘟是严重危害全球养猪业的重要传染病之一,给养猪业带来了巨大的经济损失。目前,虽然很多猪场已经认识到了CSF的危害,而且很多猪场也免疫了猪瘟疫苗,但是据猪场人员反映还是会有猪瘟的发生。从猪场中了解到大部分猪场对于猪瘟的免疫都是照搬资料上的或者是凭自己感觉来制定免疫程序,这就可能存在猪瘟免疫的漏洞,因此,科学的免疫程序对于防御猪瘟的发生具有重要的作用。目前,常见的猪瘟诊断方法包括临床诊断和实验室诊断。实验室诊断又包括病毒分离和血清学方法诊断。本试验则采用的是酶联免疫吸附试验(ELISA)方法来检测某规模化猪场的猪瘟抗体水平。
1.1 血清样品 由福建省某规模化猪场提供;采集60头仔猪血液样品(20日龄仔猪血液样品30份,50日龄仔猪血液样品30份);15头母猪血液样品。
1.2 试剂盒 IDEXX猪瘟Ab抗体检测试剂盒,购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。
1.3 仪器 离心机、移液枪、一次性移液器吸头、500 mL量筒(配制洗涤液用)、96孔板酶标仪。
2.1 血清制备 采集猪场60头仔猪、15头母猪的血液样品,其中20日龄仔猪血液样品30份、50日龄仔猪血液样品30份。3 000 r/min离心5 min,分离血清,置于-20℃保存备用。
2.2 检测方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)。
对样本的猪瘟抗体进行ELISA检测,结果见表1、图1-图2。20日龄仔猪群猪瘟抗体合格率为20.00%、变异系数52.38%;50日龄仔猪抗体合格率为63.33%、变异系数29.42%;母猪的抗体合格率为80.00%、变异系数19.64%。
从检测结果可以看出,送检的20日龄小猪群体猪瘟抗体未能达到合格水平,而且非常不稳定。可能原因有:(1)仔猪没有吃足初乳;(2)母猪本身的猪瘟抗体水平不高;(3)个别母猪免疫失误;(4)部分母猪和乳猪有可能感染了免疫抑制病,由此干扰导致猪群免疫反应。建议除了注意以上几点,找出针对性措施外,还要注意以下几点:(1)加强母猪的猪瘟疫苗免疫(加强免疫同时特别注意免疫注射操作);(2)检测阴性仔猪其母猪血液中的猪瘟抗体水平是否合格;(3)必要时在小范围试验仔猪的猪瘟疫苗超免。但由于该猪场提供的样品数目有限,并不能全面反映该猪群小猪的抗体水平。
送检的50日龄小猪群体猪瘟抗体基本达到合格水平,同时建议仔猪猪瘟二免时间为60日龄左右。最好在仔猪做了猪瘟疫苗二免后的1个月(90日龄左右),再采集15~20头有代表性的小猪血样,进行肉猪猪瘟疫苗二免后的免疫效果调查与评价。
送检的母猪群体猪瘟抗体基本达到合格水平,但有部分猪只的抗体水平不合格,可能的原因有:(1)部分猪免疫失误(疫苗注射操作失误、不规范、疫苗失效等存在一些问题);(2)部分猪免疫抑制病(蓝耳病、圆环病毒等)的干扰导致猪群免疫抑制;(3)注射疫苗时部分猪正在患病或使用了免疫抑制性药物,如地塞米松、四环素等;(4)原来母猪群的猪瘟抗体水平太低或有部分猪猪瘟带毒。从目前检测的15头母猪的猪瘟抗体来看,基本已经合格,但检测数量实在不足,有必要对母猪群的猪瘟抗体做更多更全面的检测。
表1 送检样品ELISA检测的合格率和变异系数
图1 猪瘟抗体水平检测情况
图2 猪瘟抗体水平合格率和变异系数
通过该次的随机抗体检测发现,20日龄仔猪群猪瘟抗体合格率为20.00%、变异系数为52.38%;50日龄仔猪群猪瘟抗体合格率为63.33%、变异系数为29.42%;母猪群猪瘟抗体合格率为80.00%、变异系数为19.64%(一般情况下,变异系数≤45%时猪群较稳定)。说明该猪场仔猪的抗体水平很不稳定,仔猪群体处于猪瘟抗体保护不稳定状态,建议注意仔猪群的猪瘟免疫。因此,确定具体的免疫程序成了该场防御猪瘟的最主要措施。
通过对试验数据的分析,鉴于有许多乳猪的猪瘟抗体(母源抗体)不足,必要时要给重胎母 猪加强猪瘟疫苗免疫。待猪场疫情稳定后,改为标准免疫。