李红 郭婧 施嘉琛 李疆 赵立文 高文晖 赵耀
肌酐(creatinine,Cr)主要是由肌肉产生的低分子量含氮化合物,是肌酸的终末代谢产物。血液中的肌酐通过肾小球滤过,从尿中排出体外,肌酐在体内含量较为恒定,在肾脏功能损伤不严重时,尿液中肌酐的排泄很少受尿液稀释以及浓缩的影响,因此通常用尿液中肌酐含量作为尿中其他物质排泄的参照物[1]。尿肌酐校正尿微量白蛋白可替代24 h留尿检测尿微量白蛋白研究[2-3]、随机尿微量白蛋白与糖尿病、高血压早期肾损伤研究[4-6],尿微量白蛋白/尿肌酐比值与心血管病相关性研究中均用尿肌酐进行校正[7-8],在开展尿液污染物、重金属等研究中,都用到了尿肌酐含量校正[9],故尿肌酐检测的准确性至关重要。用自动生化分析仪检测肌酐常用苦味酸法和酶法,两种方法检测血液中肌酐含量差异较大[10],然而王凯等[11]报道检测尿肌酐无显著性差异。各实验室使用的仪器设备和检测试剂差别很大,为保证检测结果的一致性于2017年2月通过比较这两种方法检测尿肌酐含量的差异,探讨尿液常量、减量和稀释方式检测对尿肌酐含量的影响,为获得准确测定尿肌酐含量提供参考。
1.1仪器设备及试剂 7600日立生化分析仪(日立高新技术有限公司,日本)。苦味酸法和酶法试剂、校准品和质控品(WAKO,和光纯药工业株式会社,日本)。
1.2实验方法 在日立生化分析仪上同时用苦味酸法和酶法试剂分别检测44份尿样。使用苦味酸法,将加样量分别选择为常量分析、减量分析和1∶10仪器自动稀释三种方式测定62份尿肌酐。尿样来源于市CDC科研实验样品,均为晨尿。测定结果通过实验室信息管理系统LIS直接输出统计。
1.3统计学方法 实验数据用SPSS 20.0软件包进行统计处理。
2.1二种方法检测结果 用苦味酸法和酶法试剂测定尿肌酐结果的相关系数r=0.995,差别无统计学意义(n=44,t=1.69,P=0.05,表1)。
表1 二种方法检测结果比较
2.2三种加样量方式检测结果 常量分析、减量分析和1∶10自动稀释测定尿样肌酐结果差异极显著(n=62,F=9.65,P=0.00,表2)。
表2 三种加样量方式检测结果比较
用苦味酸法和酶法试剂测定44件尿肌酐的结果r=0.995相关性好[12],差异无统计学意义。三种加样方式测定62件尿样肌酐含量,造成常量分析、减量分析和1∶10自动稀释测定尿样肌酐结果差异大的原因,主要是与试剂适用的线性范围有关。虽然试剂厂家说明书提供的可适合检测样品有血样和尿样,但是尿样中肌酐浓度远远高于血样,不能像测定血肌酐那样直接测定尿肌酐,要通过稀释样品浓度保证在线性范围内检测尿样。目前这两种方法均被广泛使用,线性范围酶法是0.08~100 mg/dL,苦味酸法是0.13~60 mg/dL。酶法比苦味酸法试剂线性范围宽,但价格贵很多,可根据各实验室需求,确定使用试剂的方法。如果是需要各地区或者各实验室比较的数据,要预先统一试剂方法。两种方法试剂检测血样均可采用常量分析,遇到高浓度样品可减量分析复查,而尿样浓度高且个体差异大,不能使用常量、减量常规检测方法直接测定,充分利用仪器自动稀释功能,稀释样品以保证检测结果的准确性。