液相色谱仪紫外检测器线性范围检定方法比较

陈敏 高雄兵/.云南省计量测试技术研究院；.昆明源瑞制药有限公司

0 引言

液相色谱仪[1]是化学分析中发展最快、应用最广的分析仪器，液相色谱法具有分析速度快、分离效能好和灵敏度高等优点，现已广泛应用于药品检验、产品检测、农残检测等各个方面。新购买未经过检定的液相色谱仪需要根据JJ G705-2014《液相色谱仪》检定规程的规定进行首次检定，首次检定[2]需要检定的项目有：输液系统的泵耐压、泵流量设定值误差和流量稳定性、梯度误差、柱温箱中温度设定值误差和温度稳定性、检测器中的基线噪声、基线漂移、最小检测浓度、波长示值误差和重复性以及线性范围、整机的定性定量重复性这十二个项目。本文就液相色谱仪紫外检测器首次检定项目中线性范围的检定，经思考和实践后提出一种新的检定方法，并与文献中的方法进行比较。

1 实验部分

根据JJG 705-2014的规定，液相色谱仪首次检定中线性范围是必检项目。在后续检定中，一些客户也可能存在线性范围检定的需求。线性范围是仪器检测的准确性指标，仪器线性的好坏直接关系到该仪器定量是否准确，是关乎仪器质量的一项重要指标。作者查阅了相关文献，文献[3]报道一种检定线性范围的方法是，将用于线性范围检定的不同浓度丙酮-2%异丙醇水溶液作为样品，采用2%异丙醇水溶液作为流动相，进相同体积不同浓度的丙酮-2%异丙醇水溶液，以丙酮的峰面积与浓度作标准曲线。根据文献方法进行检定得出的具体数据见表1（仪器型号：LC-2030C、编号：L21445403387AE，生产厂家：SHIMADZU），线性图见图1。

根据实际工作经验提出一种新的线性范围检定方法，将不同浓度丙酮-2%异丙醇水溶液作为成流动相（不过色谱柱），先用0.1%浓度的待测溶液作为流动相，等待基线稳定后依次更换不同浓度的丙酮-2%异丙醇系列水溶液，每更换一个浓度的流动相需要等待仪器示值稳定，记录不同浓度下仪器基线稳定后的响应信号值（类似梯度误差检定方法）。作者用该方法对一台液相色谱仪（型号：LC-2030C、编 号：L21445403387AE，生 产厂家：SHIMADZU）的线性范围进行检定，数据见表2，线性图见图2。用该方法对另一台液相色谱仪进行2次实验（型号：LC-3030C、编号：L21445510176AE，生产厂家：SHIMADZU），具体数据见表3，线性图见图3、图4。

表1 将不同浓度的丙酮-2%异丙醇水当做样品进样的线性范围数据

图1 表1数据线性图

表2 将不同浓度的丙酮-2%异丙醇水作为流动相的线性范围数据

图2 表2数据线性图

2 结果讨论

从图1可以看出，将不同浓度的丙酮-2%异丙醇水溶液当成样品进样的方法进行线性范围的检定得出的实验数据线性较好，该方法容易操作，解决了直接将样品注入检测池中仪器响应值不易稳定下来的问题，且需要的样品量少，所需时间也大大缩短。但是带来更多的影响因素，泵流速和流量的稳定性以及进样误差的影响，因此在计算不确定度时应考虑上述影响因素。

表3 将不同浓度的丙酮-2%异丙醇水作为流动相的线性范围数据

图3 表3第1组数据线性图

从图2、3、4可以看出，使用将不同浓度的丙酮-2%异丙醇水溶液作为流动相来进行线性范围的检定方法，通过对不同仪器分别进行三次实验得出数据的线性均很好，证明这一方法是可行且可靠的。该方法较规程方法容易操作，也解决了直接将样品注入检测池中仪器响应值不易稳定下来的问题，但所需样品量较文献方法大，所需时间较长，对于更换了流动相需要排气泡且基线自动归零的仪器，这一方法不适用。使用该方法进行线性范围检定，在计算不确定度时应考虑泵流速和流量稳定性两个影响因素。

图4 表3第2组数据线形性图

需要特别注意的是，按照JJG 705-2014中规定的方法进行紫外检测器线性范围检定时，应同时用低浓度的丙酮-2%异丙醇水溶液进行最小检出浓度的检定[计算公式同规程中公式（8）]，不能直接代入检定规程中用萘-甲醇溶液做出的最小检测浓度值来计算线性误差，因为用丙酮溶液得出的最小检出浓度与萘-甲醇溶液得出的最小检出限值不一样，且用同一溶液得出的检出上限和最小检出限才具有可比性，计算出的结果才更能反映仪器线性范围的准确性。根据实践经验，做最小检出限的丙酮-2%异丙醇水溶液的浓度通常较0.1%丙酮-2%异丙醇水溶液低至倍或更低，也可根据仪器自身情况来具体确定。

3 结语

本文针对液相色谱仪首次检定中的线性范围检定方法进行了探讨，结合实际工作经验提出了一种新的方法，并与文献方法进行了比较，希望可以对液相色谱仪线性范围的检定有所帮助。