HPLC法测定天麻头痛片中阿魏酸含量

马传芳 朱丹红

摘  要：目的：HPLC法对天麻头痛片中的阿魏酸物质的含量加以测定，确定该中药药品的质量。方法：在HPLC的技术要求下，选择色谱柱，检测实验中的流动相为乙腈-0.1%冰醋酸的溶液，两者比例为（20：80），对天麻头痛片样品展开检测。结果：在0.00961到0.07688μg范围内，阿魏酸物质可保持良好的线性关系，r的数值为0.9996，实验的最终回收率为96.9%，RSD数值为1.8%。结论：使用HPLC的方法对天麻头痛片展开检测，检测过程简单，检测方法具有良好的重复性，该方法适用于对阿魏酸成分的定量分析。

关键词：HPLC;天麻头痛片;阿魏酸含量;测定过程

天麻头痛片为中药药品，由当归、川芎以及天麻等六味中药材制成该药品，其主要功效包括散寒止痛、养血祛风，一般可在治疗血瘀头痛、血虚头痛以及风寒头痛的治疗过程中发挥作用，在该药品中，当归与川芎中的阿魏酸物质发挥着重要的作用，因此在衡量药品治疗时，必须重点关注阿魏酸的具体含量，确保药品的实际药效正常发挥，选择利用高效液相色谱法来测定阿魏酸物质含量，测量过程如下：

1 材料与方法

1.1 一般材料

安捷伦1200高效液相色谱仪，VWD检测器;紫外可见分光光度计TU-1901;阿魏酸对照品（中国食品药品检定研究院）;乙腈为色谱纯，其余均为分析纯，水为超纯水;天麻头痛片。

1.2 方法

色谱柱为安捷伦SB-C18（4.6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-0.1%冰醋酸溶液（20：80），柱温：35℃，检测波长为316nm，流速1.0ml/min。

对照品溶液的制备，取阿魏酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含4μg的溶液。

检测波长选择取4μg/ml的阿魏酸对照品溶液，用紫外可见分光光度计TU-1901，在250-350nm波长下进行自动扫描，最大吸收峰在316nm，选择此波长作为阿魏酸的检测波长。

供试品溶液的制备：取天麻头痛片药品20片，除去包衣，研细，称取约为0.5g，精密称定，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（设置频率为40KHz，功率为250W）20min，溶解后冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀过滤，取续滤液经由微孔滤膜之后被有效过滤，最终获取的滤液即为实验所需的供试品溶液，滤液同样需要被保存到棕色量瓶内。

阴性对照溶液的制备：按处方除当归、川芎外的其它几味中药饮片，依处方制成样品，再按上述供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10ul，按上述色谱条件进行操作，结果表明阴性对照溶液对样品无干扰。

2 结果

线性关系考察：分别精密吸取上述阿魏酸对照品溶液2.5，5.0，10.0，15.0，20.0μL，按上述色谱条件测定峰面积以峰面积积分值为纵坐标，阿魏酸对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线。其回归方程为Y=26817620.11X+27479.81，r=0.9996结果表明，阿魏酸进样量在0.00961～0.07688mg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验：精密吸取同一供试品溶液10μ1，注入高效液相色谱仪，连续进样5次，测定色谱峰峰面积，结果表明，精密度良好，RSD=1.7%（n=5）。

重复性试验：精密称取同批样品各5份，分别按供试品溶液制备方法操作，精密吸取各供试品溶液10μL，分别注入高效液相色谱仪，测定。结果样品平均含量为0.0103mg/片，RSD=2.2%（n=5）。

稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，按0、2、4、6、8小时间隔，分别进样，测定色谱峰面积，结果表明，样品溶液在8h内保持稳定，RSD=1.9%（n=5）。

回收率试验：取本品（含量0.0103mg/片平均片重0.3105g/片）20片，除去包衣，研细，各取粉末0.25g，共5份，精密称定，分别精密加入阿魏酸对照品溶液（8μg/ml）1.0ml，按样品含量测定项下方法操作，测定，结果阿魏酸平均回收率为99.4%，RSD为1.8%。

样品含量测定：取3批样品，按供试品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件，依法测定，批号170512、170604、170714阿魏酸含量分别为0.0103mg/片、0.0148mg/片、0.0132mg/片。

3 讨论

阿魏酸在酸枣仁、升麻、川芎、阿魏以及当归药材中具有相对较高的含量，同时也作为药材的关键有效成分存在，判定阿魏酸的含量可评测相关药品的质量。阿魏酸能够帮助人体抵抗血小板大量聚集的问题，相关血小板血栓素的生成问题也能够被有效解决。前列腺素在该物质的影响可具有更强的活性，因此可以起到缓解人体血管痉挛以及镇痛的作用。该物质在制备控制白细胞以及治疗心脑血管类疾病的药品中被使用，属于关键原料，除了有抗炎、影响淋巴细胞的作用外，还在人体中起到保护皮肤以及健美的作用。考慮到阿魏酸的重要药用作用，必须保障其在药品中的含量，因此本身使用高效液相色谱方法高效、便捷以及能精准确认该物质的含量。

检测环节中，对流动相比例、检测波长、超声时间、实验所用溶剂、处理样品所用的方法等进行了研究。能够有效处理样品的方法主要包括超声与回流两种，最终确定利用甲醇进行超声处理工作时，处理时间为20min时，可以获取完全且简便的提取效果。

本方法灵敏、简便，重现性好，结果准确，可以用于该制剂的质量控制。

参考文献

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[2]杨金颖.Hplc法同时测定头痛滴丸中的阿魏酸和木犀草苷的含量[J].天津药学，2018（3）.

[3]史雪霞，李运.Rp-hplc法测定九味羌活丸中阿魏酸和欧前胡素的含量[J].甘肃医药，2017，36（7），516-518.