莪术油抑制hela细胞血管生成VEGF相关因子的研究

周俊

【摘要】目的：探讨莪术挥发油对人宫颈癌Hela细胞的可能作用机制。方法：采用RT-PCR法，检测在不同剂量组下VEGF-C和VEGFR-2的mRNA的表达。结果：RT-PCR结果显示：莪术油高、中剂量组VEGF-CmRNA较阴性对照组显著降低;莪术油高、中、低剂量组VEGFR-2mRNA较阴性对照组显著增加。结论：莪术油能抑制宫颈癌hela的增殖，可能与其降低VEGF-C和VEGFR-2的mRNA的表达有关。

【关键词】 莪术油;  hela细胞;   血管生成

【中图分类号】R715【文献标识码】B【文章编号】2095-6851（2019）02-248-01

肿瘤微生态系统理论认为， 肿瘤细胞的生物学行为是肿瘤微生态系统重建其系统内营养联系的结果， 而肿瘤的血管化是其重建营养联系的一种表现。因此， 干扰肿瘤的血管化过程是抑制肿瘤的有效途径。而开发血管生成抑制剂治疗肿瘤已经成为当前抗肿瘤研究领域的一大热点 。莪术油可诱导细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成，促进机体对肿瘤的免疫反应等，可较好地直接干预或辅助治疗恶性肿瘤 [1]。本课题通过体外培养人宫颈癌 Hela 细胞，初步探讨莪术油有效提取物体外抗肿瘤血管生成的可能性机制。

1材料与方法

1.1实验细胞株、动物及药物：人宫颈癌Hela细胞株，购自武汉大学保藏中心。溫莪术药材购于四川双流县温郁金基地，经鉴定为姜科植物温郁金的干燥根茎。采取压榨粗油经水蒸汽精制法制备莪术挥发油。超纯RNA提取试剂盒、HiFi-MMLV cDNA第一链合成试剂盒，购于CWbio.Co.Ltd。

1.2实验方法

1.2.1Real Time PCR法检测VEGF-C、VEGFR-2mRNA的表达将Hela细胞给予药物干预，分组如下：阴性对照组、莪术油组：根据IC50的计算结果，设计出高、中、低剂量，继续分别培养 72 小时。提取组织样本中总RNA并进行反转录。采用2-△△CT法进行数据的相对定量分析，其中△△CT=（Ct目的基因-Ct内参基因）-（Ct阴性对照基因-Ct内参基因）。

1.3数据统计采用SPSS17.0软件系统对相关数据资料进行分析，计量资料用表示，各组间两两比较采用独立样本T检验，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05时认为有统计学意义。

3结果

3.1VEGF-C mRNA表达结果莪术油高、中剂量组 VEGF-C mRNA与阴性对照组比较显著降低，差异有统计学意义;莪术油低剂量组VEGF-C mRNA与阴性对照组比较略微下降，差异无统计学意义。（表1）。

3.2VEGFR-2 mRNA表达结果莪术油高、中、低剂量组VEGFR-2mRNA与阴性对照组比较显著降低，且呈一定的计量依赖关系，差异有统计学意义。（表2）。

4讨论

肿瘤血管生成、切断肿瘤组织获得营养途径已经成为新的抗肿瘤治疗靶点，而且也成为抗肿瘤治疗中热门的研究内容[2]。肿瘤新生血管与正常组织器官的血管相比，其血管少或无平滑肌成分，对神经调控、血管活性物质的反应明显下降，血管组织内缺乏控制血管生成的调控机制等不足的表现[3]。宫颈癌组织中发现有VEGF-C 及其受体VEGFR-2（ KDR） 的表达。VEGF-C作用于肿瘤细胞上的VEGFR-2（ KDR），可能直接影响肿瘤细胞的生物学行为。宫颈癌复发者中VEGF/VEGFR-2途径通过新生血管的形成增加肿瘤的转移[4]。本次研究中，莪术油高、中剂量组 VEGF-C mRNA与阴性对照组比较显著降低，同时，高、中、低剂量组VEGFR-2mRNA与阴性对照组比较显著降低。两者的结果呈正相关性，表明莪术油可能通过下调VEGF这条信号通路，达到抗肿瘤血管生成的目的。抗肿瘤血管生成药物的优势在于针对新生血管，具有特异性， 其作用于运动的及增殖的毛细血管内皮细胞， 一般不造成骨髓抑制、胃肠道反应或脱发等副作用。因此对抗肿瘤血管生成药物方向的研究具有重要的临床意义。

参考文献：

[1]宋爱莉，许振国.莪术油对大鼠乳腺癌癌前病变组织中VEGF mRNA 表达的影响[J].中华中医药学刊，2012，30（4）：679-681.

[2]陈锡强，侯海荣，刘可春等.天然产物抗血管生成的研究进展[J].山东科学，2010，23（6）：34-38.

[3]杜雪，糜若然.VEGF-C 对宫颈癌细胞增殖和凋亡信号传导通路的影响[J].现代妇产科进展，2011，20（11）：877-855.

[4]赵淑萍，王泽华.宫颈癌中VEGF—C及其受体mRNA的表达及其临床意义[J].中国癌症杂志，2006，16（4）：290-294.