猪支原体肺炎的诊断及防制

段茜 石国林 陈张华 李福泉

摘要：猪肺炎支原体（Mhp）是引起猪支气管肺炎的主要病原，严重危害着养猪事业的发展。对猪支原体肺炎的病原学特征、诊断、疫苗及综合防制等进行了介绍，以期避免或减少该病发生，保障养猪业健康发展。

关键词：猪肺炎支原体;诊断;防制

中图分类号：S858.28        文献标识码：B        文章编号：1007-273X（2019）01-0021-02

猪支原体肺炎又称猪霉形体肺炎，是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，MHP）引起的一种以感染猪表现咳嗽、喘气、生长不良等症状为特征的接触性、慢性传染病。

猪支原体肺炎多为地方流行性，世界各地均有发生，对养猪业的健康发展造成了严重的影响。由于猪感染MhP后，其呼吸道纤毛的清除能力被损坏，致病微生物很容易定植和侵袭;同时MhP的感染会降低巨噬细胞的吞噬力，损害机体免疫功能，从而使MhP持续存在，导致二次感染，引起猪呼吸系统疾病综合征的发生，增大了当前猪病诊断、预防控制的难度[1]。MhP一旦感染猪群，传播速度快，如不及时采取措施很难将其根除，被喻为全球养猪业的“隐形杀手”。

1  病原学特征

MhP属柔膜体纲支原体目支原体科支原体属，呈高度多形性，如环状、球状、点状等。革兰氏染色阴性，但不易着色;姬姆萨染色或瑞氏染色为淡紫色，着色良好。MhP对外界环境的抵抗力较弱，存活不超过24 h。由于缺乏细胞壁，MhP的耐药性广泛，对青霉素、链霉素和磺胺类等药物均不敏感。

2  诊断

2.1  病原分离培养鉴定

分离培养常用于检测和鉴定大多数细菌性微生物，而分离培养被认为是检测MhP的“金标准”。由于MhP的培养需要特殊的培养基且生长十分缓慢，通常需要4～8周的生长才能被检测到，在分离培养过程中也容易被其他支原体或细菌覆盖生长，因此要成功分离培养MhP比较困难。

2.2  血清学检测

血清学试验是检测猪群是否感染MhP最常用的方法，现有凝集试验（AT）、间接血凝反应试验（IHA）、补体结合试验（CF）、酶联免疫吸附试验（ELISA）等技术已用于MhP抗体的检测。其中，ELISA是相对敏感且使用较多的检测方法，其测定的抗体效价比IHA和CF的结果高10～20倍。即使在感染后期，ELISA法的敏感性仍很高，可检测到感染后1年的抗体[2]。

2.3  分子检测

2.3.1  聚合酶链式反应（PCR）检测  PCR检测方法具有敏感性高、特异性好、检测速度快、操作简单和重复性好等优点，同时克服了分离培养困难、血清学检测时易发生交叉反应等缺点。因此PCR检测技术在MhP的检测中发展迅速。随着科技的发展，科学家们相继建立了多重PCR、巢氏PCR、荧光定量PCR等技术。

2.3.2  原位杂交技术  原位杂交技术（ISH）可用于检测福尔马林固定、石蜡包埋的肺组织以及试验感染猪肺组织中MhP DNA，其缺点是操作繁琐、费时，在生产上的应用受到很大限制。Ruiz等[3]采用原位杂交技术对福尔马林固定组织切片中的猪肺炎支原体、猪滑液支原体和猪鼻支原体进行了鉴定，发现该方法能将3种支原体很好地区分开来。

3  猪支原体肺炎疫苗

由于MhP没有细胞壁，对常规抗生素不敏感，以及耐药性和MhP免疫保护的特殊性等问题，使得科学家们致力于寻求通过免疫来对MhP进行预防和控制。目前国内外用于预防MhP感染常用的商品化疫苗有常规灭活疫苗、弱毒疫苗及佐剂全细胞苗，一些新型的疫苗如活载体疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗及口服微球苗等正处于实验室研发阶段。

3.1  灭活疫苗

目前国内使用的灭活苗主要依赖于进口，如法国的“猪克喘”灭活疫苗、美国的“瑞倍适”灭活疫苗、德国的“茵格发”灭活疫苗，以及西班牙的“喜可舒”灭活疫苗等。以往研究认为在疫苗免疫过程中，细胞免疫和黏膜免疫起主要作用。最新研究发现灭活疫苗主要激发机体的体液免疫应答，几乎不会激发细胞免疫应答，因此灭活疫苗抵抗MhP感染的能力要比活疫苗低[4]。

3.2  弱毒疫苗

弱毒疫苗能激发机体产生较强的细胞免疫及黏膜免疫，免疫效果较灭活疫苗好。中国兽药监察所将MhP菌株在乳兔体内连续传代700多次，获得了一株保持较好免疫原性的兔化弱毒株，用该弱毒株制备的疫苗安全有效，对猪无副作用[5]。但该疫苗采用胸腔注射的免疫途径，且产量低、成本高，使其在基层动物防疫中难以广泛应用。

3.3  新型疫苗

一些新型疫苗如活载体疫苗、DNA疫苗、亚单位疫苗以及口服微球苗等正处于实验室研发阶段。苏国东等[6]制备了MhP重组P42蛋白的亚单位疫苗，采用油性佐剂免疫感染猪，结果表明该亚单位疫苗能激发机体产生强烈的细胞免疫反应和体液免疫反应。

4  综合防制

仅仅通过疫苗防控猪支原体肺炎效果不佳，因此需加强综合防制措施。第一，注意引种，采取全进全出制度;第二，对仔豬进行早期免疫，合理用药;第三，加强生产管理，有计划地进行卫生消毒;第四，避免怀孕母猪的隐性感染，及时检疫、隔离发病猪。

为控制猪支原体肺炎的发生，全世界已投入大量的人力物力。但由于MhP培养难度大、对抗生素不敏感等因素，使猪支原体肺炎的发病率仍较高。因此需要采取一系列综合措施控制该病的发生，包括引种、优化管理、监测发病范围、应用分离株的分子分型等技术以分析感染的传播模式以及研制有效的疫苗和设计合适的免疫接种方案。

参考文献：

[1] 陈溥言.家畜传染病学（第五版）[M].北京：中国农业出版社，2006.

[2] SHEN Y，HU W，WEI Y，et al. Effects of mycoplasma hyopneumoniae on porcine nasal cavity dendritic cells[J].Vet Microbiol，2017，198：1-8.

[3] RUIZ A，GALINA L，PIJOAN C. Mycoplasma hyopneumoniae colonization of pigs sired by different boars[J].Can J Vet Res， 2002，66（2）：79-85.

[4] 张  旭，白方方，武昱孜，等.PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展[J].生物技术通报，2012（5）：54-60.

[5] 肖国生，曹三杰，黄小波，等.猪肺炎支原体检测芯片的研制及初步应用[J].中国预防兽医学报，2008（1）：57-63.

[6] 苏国东，刘茂军，周勇岐，等.猪支原体肺炎活疫苗（168株）的免疫效力研究[J].中国兽药杂志，2012，46（9）：4-6，14.