CK-MB检测方法的研究进展

李玉泉，于宏建

天津市津南区咸水沽医院 (天津 300350)

CK-MB曾被认为是临床诊断心肌损伤的金标准，是心肌酶谱五项指标中特异度最高的指标，即使肌钙蛋白等新的心肌损伤标志物不断发展，CK-MB在心肌损伤诊治中仍具有重要意义[1]。CK-MB属于特异性心肌酶学指标，心肌中含有大量的CK-MB，可占心肌总肌酸激酶(CK)的14%[2]。正常状态下人体CK-MB/CK<5%，一旦心肌受损，血液中的CK-MB水平将迅速升高，CK-MB/CK≥6%。若在生理、病理等因素影响下，CK-MB活性则可能呈假性升高，进而影响检测结果[3-4]。本研究就CK-MB在心肌损伤中的临床研究进展进行以下综述。

1 CK与CK-MB

1.1 CK的组成、分布及功能

CK属于总酶，也被称为肌酸磷酸激酶，与细胞内能量转运、肌肉收缩、三磷酸腺苷(ATP)再生等密切相关。CK组成亚基包括M和B，分为同工酶CK-杂化型(MB)、CK-肌肉型(MM)、CK-脑型(BB)及CK-线粒体型(Mt)：CK-MB多分布于心肌；CK-MM多分布于骨骼肌；CK-BB多分布于脑组织，在胃肠道、子宫平滑肌、前列腺、肺等组织内也可检测到；CK-Mt分布于线粒体内。机体处于正常状态时，血清中通常无CK-BB，但若组织坏死，CK-BB的活力将迅速升高；与CK-BB相反，机体处于正常状态时，血清中CK-MM的含量极高，可达94%～96%，而CK-MB的含量通常<5%。CK的主要功能是将肌酸与ATP间的高能磷酸键催化，使其发生可逆性转移，并产生能量，促进肌肉收缩及系统运输。

1.2 CK-MB

CK-MB主要包括MB1与MB2两个异型，CK-MB在心肌细胞中的存在形式多为MB2。若心肌细胞受损，将释放出大量的MB2，在短时间内使血清中的CK-MB水平迅速上升，发病24 h上升至峰值，发病72 h后其水平逐渐下降，并逐渐恢复至正常，且与CK相比，CK-MB的升高更早，充分证明CK-MB在心肌损伤诊断中具有重要意义。汤淑斌等[5]对80例手足口病患儿进行分析，并选取50例健康体检儿童作为对照组，两组均进行CK-MB及肌钙蛋白I(cTnI)水平测定。结果发现，手足口病患儿CK-MB水平高于对照组，手足口病患儿CK-MB检测阳性率高于cTnI，表明CK-MB在手足口病患儿心肌损伤的早期诊断中具有重要意义。

2 CK-MB检测方法

2.1 免疫抑制法

2.1.1检测原理

免疫抑制法是检测CK-MB活性最常用的方法，主要利用抗CK-M抗体抑制M亚基活性的原理，进而测定B亚基的活性。由于正常机体中CK-BB含量极少，可忽略不计，将所检测的结果乘以2即为血液中CK-MB的活性[6]。

2.1.2免疫抑制法检测结果影响因素

免疫抑制法在CK-MB活性测定中虽然具有操作简单、费用低、检测速度快等优势，但仍存在一定局限性，且影响因素较多。免疫抑制法在检测过程中将CK-BB活性假设为零，虽然正常机体中通常无CK-BB，但若伴有相关疾病，机体将释放大量CK-BB，所获取的数据也变为CK-MB与CK-BB中B亚基之和，若此时将结果乘以2，将导致CK-MB活性假性升高。赵桂梅等[7]对1例停经38+6周的产妇进行研究，结果发现产妇子宫平滑肌及胎盘中均有CK-BB，且分娩前后子宫出现张力变化，释放大量的CK-BB，在进行免疫抑制法检测时产妇的CK-MB活性假性升高。严伟玲等[8]对110例患儿进行研究，结果发现，患儿的总CK活力较低，存在脑病、肝病、血液肿瘤等患儿CK-MB出现假性升高，其中CK-MB/CK<5%的患儿有24例，CK-MB/CK处于5%～25%的患儿有37例，CK-MB/CK>25%的患儿有49例，其中CK-MB/CK>25%的患儿血清CK-MB浓度处于正常水平，表明免疫抑制法在小儿血清CK-MB活性测定时，受到测定方法局限性的影响，导致CK-MB活性出现假性升高。与成年人相比，儿童血液中的CK-BB水平可能较高，采用免疫抑制法检测CK-MB活性时也可能出现升高现象。临床对儿童进行CK-MB活性测定时不应遵照成年人的参考标准，应根据儿童具体情况设定参考范围，避免误诊事件的发生。易甲其等[9]对500例健康儿童及500例健康成年人进行研究，结果发现，不同年龄段的儿童CK-MB水平比较无明显差异，而儿童CK-MB水平高于成年人，表明儿童CK-MB水平的正常参考范围较成年人水平广，对儿童CK-MB正常水平进行研究有助于临床诊断工作。

张华等[10]研究表明，免疫抑制法检测CK-MB活性作为心肌梗死诊断指标存在一定缺陷，CK-MB水平升高与恶性肿瘤、某些重度炎症反应等密切相关。CK-MB在恶性肿瘤患者血清中的含量可达25%～41%；若无脑部病变，血清中CK与CK-MB水平仍异常，则可能存在肺、胃肠道、前列腺等恶性肿瘤。若M亚基抗体无法有效抑制M亚基活性，也可能造成CK-MB活性出现假性升高。巨CK具有较大的相对分子量，吞噬解体较为困难，导致其易在体内滞留，且其半衰期较长，造成血肿存留时间较长。若血清中存在CK1或CK2，CK-MB也可能出现假性升高现象。张仲迎等[11]对1例83岁男性患者进行研究，结果发现，该患者CK-MB水平升高已超过4个月，且CK-MB水平较CK水平高，经进一步筛查发现该患者为前列腺癌，经治疗可见CK-MB水平明显降低，CK-MB水平假性升高可能与CK2存在有关。

2.2 酶质量法

CK-MB质量测定主要利用化学免疫发光技术，且以双抗夹心法为主，检测过程中将抗人CK-MB包被于磁微粒固相载体，并将抗体交联碱性磷酸酶作为标记物，实现对CK-MB的定量分析。CK-MB质量检测具有较高的专一性、特异度及灵敏度，且不会与CK-MM及CK-BB发生交叉反应，影响因素也相对较少[12]。王楠等[13]研究指出，酶质量法具有抗干扰能力强、灵敏度高、特异度高、操作简单、反应速度快等优势，且在各项指标检测中均可满足临床需求，可作为检测血清CK-MB活性的有效方法，但CK-MB质量检测对仪器设备的要求较高，且费用较高，使其临床应用受到限制。

2.3 电泳法

琼脂糖凝胶电泳主要根据CK同工酶不同分子量及电荷对CK-MB进行分离，扫描各酶谱后，得出各同工酶活力。电泳法还具有快速发现巨CK分子异常条带的作用，且CK-BB、巨CK等不会对检测结果造成影响[14]。但较免疫抑制法，电泳法操作更为复杂，且所需时间更长，可能无法达到CK-MB质量的定量检测。汤冬玲等[15]对血清CK-MB活性假性升高的原因进行分析，发现采用酶免疫抑制法测定非心肌梗死患者时，CK-MB>CK30%；CK-MB/CK倒置时，CK-MB活性所受到的干扰因素较多，导致测定结果高于真实值，造成假性升高。实践证明电泳法与CK-MB免疫抑制法具有互补作用，可进一步明确机体是否存在CK-BB或巨CK的干扰，增加检测结果可靠性。

3 小结

CK-MB是鉴别心肌损伤的重要酶学指标，若检测过程中发现CK-MB活性异常升高，首先应明确检测仪器、试剂等是否良好，其次明确是否出现胃肠病变、脑组织损伤、前列腺疾病等情况。目前，临床常用检测CK-MB的方法包括免疫抑制法、酶质量法及电泳法，临床应根据实际情况，排除相关影响因素，选择适宜的检测方法。