回神颗粒对中度创伤性脑损伤的机制以及临床应用研究

杨金颖

天津市武清区中医医院制剂室 301700

创伤性脑损伤(Traumatic brain injury，TBI)是由各种原因创伤引起的脑组织损害，其发病率、病死率和致残率均较高，是临床常见疾病，其中中度TBI最为常见。回神颗粒是我院的院内制剂，由人参、石菖蒲、鹿角、丹参、五味子等多味中药组成，主要功效为补益五脏、化淤祛痰、开窍通络。回神颗粒对中度创伤性脑损伤有显著的保护作用，它可以通过改善机体应激状态、减轻微循环紊乱状态、改善机体认知功能，能抑制ICAM-1的表达来减轻其炎性反应，还能通过遏制钙超载、减轻NMDAR-1及AQP-4的过度表达来减轻其脑水肿情况。关于回神颗粒的研究较多，本文总结了回神颗粒对中度创伤性脑损伤的保护作用机制和近年来回神颗粒的临床应用，为更好地科研探索提供参考。

1 回神颗粒对中度创伤性脑损伤的保护作用机制

1.1 通过益气扶正、活血化淤、开窍醒神等作用治疗TBI 崔俊波[1]将36例中度TBI患者随机分为对照组18例(采用西医基础治疗)和治疗组18例(在西医基础治疗加用回神颗粒)，结果治疗组的总有效率为73.3%，对照组为40.0%，两组无显著性差异。但是，两组同期比较的多个神经量表评分却有显著差异，其中治疗组格拉斯哥昏迷评分(GCS)(3、7、15d)、简化急性生理学评分(SAPS)(7、10、15d)、残疾分级评分(DRS)(7、15d)、格拉斯哥预后评分(GOS)(7、10、15d)的改善均明显优于对照组(P<0.05)。说明回神颗粒可以改善机体应激状态、减轻微循环紊乱状态，而且能改善机体认知功能。

1.2 通过抑制ICAM-1的表达，遏制钙超载、减轻NMDAR-1及AQP-4的过度表达来治疗TBI 脑内炎性反应参与脑创伤后继发性脑损伤及损伤修复阶段，黏附分子ICAM-1的水平影响颅脑损伤早期炎性反应损伤程度；创伤性脑水肿是TBI后最重要的继发性病理生理反应，与脑水肿密切相关的是中枢神经系统兴奋性氨基酸谷氨酸离子型受体-N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(NMDAR-1)和一种水通道蛋白(AQP-4)。实验结果说明[2-4]，在转录水平上，回神颗粒抑制ICAM-1的表达；在分子水平上，回神颗粒能够遏制钙超载，并减轻NMDAR-1及AQP-4的过度表达；在NSS评分上，回神颗粒能够明显改善TBI大鼠的NSS评分，并改善其神经功能和促进大鼠的生长发育。具体实验结果[2-4]如下：崔俊波应用液压性脑损伤装置建立中度TBI模型，创伤压力为(170±10)kPa，作用时间为(20±2)ms，他随机将大鼠分为6组：正常组、假手术组、模型3d组、模型7d组、治疗3d组、治疗7d组。治疗3d组和治疗7d组大鼠在创伤后立即用2ml药液(其中含回神颗粒0.27g)灌胃1次，之后两组均每日早晚各灌胃1次，2ml/次药液。他采用RT-PCR检测6组动物损伤区脑组织内ICAM-1、脑组织内NMDAR-1和AQP-4的变化情况。结果发现，两个模型组的ICAM-1表达、NMDAR-1及AQP-4的表达均较正常组显著增加(P<0.01)，治疗3d组的ICAM-1的表达较正常组显著增加(P<0.01)，而治疗7d组中ICAM-1表达的升高没有统计学意义(P>0.05)；治疗3d组与模型3d组比较，ICAM-1、NMDAR-1及AQP-4的表达均明显降低，差异具有统计学意义(P<0.05)；治疗7d组与模型7d组比较，只有ICAM-1的表达明显降低，差异具有统计学意义(P<0.05)。他采用双光束荧光分光光度计测定6组动物脑细胞内游离钙浓度，结果发现，治疗3d组较模型3d组明显降低，差异具有统计学意义(P<0.01)，而模型3d组较正常组明显升高(P<0.01)。他还采用光镜和扫描电镜观察6组动物脑损伤区脑细胞的病理形态学改变，结果发现，两个模型组和两个治疗组均可见到明显改变，而且两个治疗组较两个模型组均明显减轻。对于神经损伤(NSS)评分，他分别于创伤后1d、3d、7d对正常组、假手术组、模型7d组和治疗7d组进行评分，分别于创伤后1d、3d对模型3d组和治疗3d组进行评分，结果发现，两个模型组和两个治疗组的每个时间点NSS评分均明显降低(P<0.01)，而且两个治疗组的NSS评分较两个模型组明显提高，差异具有统计学意义(P<0.01)。对于称取每只动物的体重，他在造模前和取材前均分别称重，结果模型组动物体重较正常组明显下降(P<0.01)，治疗组动物体重较正常组没有明显下降(P>0.05)，但比较每组动物造模前和取材前体重，发现模型组体重明显下降(P<0.01)，治疗组体重明显有所增加(P<0.01)。

2 回神颗粒的临床应用研究

2.1 对重型颅脑损伤脑保护作用 李传勇等[5]对100例重型脑外伤患者随机分成对照组40例(仅采用单纯西医治疗)和研究组60例(在西医治疗基础上使用回神颗粒治疗)，两组患者一般资料差异无显著性。 结果研究组治疗总有效率为93.3%，颅压恢复情况及昏迷转醒时间上均明显优于对照组(总有效率为80.0%)，差异具有统计学意义(P<0.05)。说明回神颗粒能保护重型颅脑损伤所致的脑神经细胞破坏，可使患者血肿明显吸收，并缩小水肿区及软化灶，很大程度降低残死率，提高生存质量。

2.2 治疗周围神经损伤 赵廷浩等[6]探讨回神颗粒对周围神经损伤的治疗效果，他们对清洁级Wistar大鼠行左侧坐骨神经钳夹损伤，制成神经损伤模型，造模成功后使用回神颗粒治疗。实验结果表明回神颗粒能明显促进坐骨神经损伤后神经组织形态，并促进失神经支配腓肠肌肌细胞的恢复，回神颗粒组与模型组比较，腓肠肌肌细胞截面积差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3 对PC12细胞损伤的保护作用 回神颗粒含药脑脊液能减轻Aβ25-35所致的PC12细胞损伤，具有细胞保护作用。刘江等[7]采用PC12细胞建立24h Aβ25-35所致损伤模型，将实验分成正常组、模型组，回神颗粒含药脑脊液高剂量组(20%)、中剂量组(15%)和低剂量组(5%)以及空白脑脊液组。他们在PC12细胞中同时加入各剂量回神颗粒含药脑脊液和20μmol/L Aβ25-35，培养24h后，使用MTT法检测细胞活力。结果发现回神颗粒含药脑脊液各剂量组均比模型组能显著提高Aβ25-35所致受损PC12细胞的生存率，且随着浓度的增加，细胞存活率也逐渐提高，在20%浓度时达到最高。而且，回神颗粒含药脑脊液可以在0～72h各时间点抑制神经细胞的凋亡，但时间越早，其细胞凋亡率越低。张玉岭等[8]采用脑脊液药理学和PC12细胞培养相结合的方法，用回神颗粒含药脑脊液在体外培养缺血缺氧损伤的PC12细胞，在PC12细胞损伤后的6h、12h、24h、72h，用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果发现损伤的PC12细胞模型在损伤6h已经开始凋亡，24h则达到凋亡高峰，48～72h也仍然维持较高的水平。

2.4 治疗血管性痴呆(VD) VD是脑血管疾病发生后的一种严重影响患者恢复的疾病。回神颗粒可以改善脑组织的缺血缺氧状态，并且恢复脑细胞的活力，治疗效果可靠且持久。陈宝贵等[9]随机将病例分为观察组(118例，服用回神颗粒)，对照组(30例，服用西药喜得镇)，采用国际通用智力量表(MMSE)评分标准，观察两组患者在时间定向力、空间定向力、语言功能等方面的改善情况，结果观察组总有效率为89.83%，对照组为60.00%，对两组有效病例追踪观察6个月，好转维持率观察组为99.06%，对照组为83.33%，恶化率观察组为0.94%，对照组为16.67%。此外，崔俊波等[10]观察回神颗粒治疗VD的临床疗效和MMSE积分改善情况，他们将患者随机分为治疗组(118例，应用回神颗粒)和对服组(62例，应用喜得镇)，结果发现回神颗粒组对于轻度和中度VD疗效明显优于喜得镇组，而对于重度VD则两组无差异；对有效病例6个月随访表明回神颗粒组好转维持率明显优于喜得镇组。

2.5 治疗急性高血压脑出血 高血压脑出血是由颅内血肿及脑水肿所致的颅压高及神经元损伤。陈慧娲等[11]研究回神颗粒对该病的疗效，53例发病72h内的高血压脑出血患者被随机分为治疗组31例(在对照组用药的基础上加服回神颗粒)和对照组22例(采用西医基础治疗)，两组患者一般资料、神经功能缺损及并发疾病比较差异无统计学意义。结果治疗组有效率为90.3%，对照组为77.3%，差异有统计学意义(P<0.05)。关于血肿吸收情况，在出血量相近的基础上，治疗组吸收量和吸收率方面均明显高于对照组(P<0.001)。

2.6 治疗中风后运动性失语 运动性失语是脑卒中较为常见的并发症，回神颗粒明显改善言语表达的流利性、复述、命名、书写等各种能力，为治疗中风后运动性失语之良方。刘文通等[12]将79例中风后运动性失语患者随机分为对照组(采用西医基础治疗)及治疗组(在对照组基础上加服回神颗粒)，14d后治疗组患者在言语表达的流利性、复述、命名、书写等各方面的功能改善情况明显优于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)，而且连续6个月服用回神颗粒的临床疗效明显优于对照组(P<0.05)。

3 结语与展望

崔俊波建立中度TBI模型采用液压性脑损伤装置，液压损伤法是密闭颅腔内的压力因为液压装置的骤然改变而间接造成的脑损伤。而是近十余年来应用最广的颅脑创伤模型就是利用动物模型来模拟临床脑损伤，其致伤机理类似于人类头部撞击后的脑变形。大鼠液压冲击脑损伤模型中动物容易获得，致伤能量测定简洁方便，具有较好的稳定性和可重复性，能够较好的重现临床闭合性脑损伤。

ICAM-1是一种单链跨膜糖蛋白，属于黏附分子免疫球蛋白超家族，它是评价颅脑损伤早期炎性反应损伤程度的重要指标。在神经系统疾病中，在多种炎性反应递质、细胞因子、缺血和缺氧再灌注或者应激反应等刺激下，ICAM-1表达也会明显升高。NMDAR-1是中枢神经系统兴奋性氨基酸谷氨酸离子型受体，它介导的神经元兴奋毒性损伤与脑损伤的发生密切相关。水通道蛋白-4(AQP4)是一种膜通道蛋白家族成员，它在脑内广泛分布，对水跨膜转运有高度选择性，在脑外伤、脑出血、脑炎、脑水肿的过程中起着十分重要的作用。AQP4是胶质细胞、脑脑脊液及血管间的水调节和转运的重要物质，对维持大脑水平衡起着重要作用，很有可能参与和介导了各种脑水肿的形成。

回神颗粒中人参性甘，微苦，平，归肺、脾、心经，能大补元气，补脾益肺，安神益智，为君药；石菖蒲辛苦燥温通，芳香走窜，不但有开窍醒神之功，兼具化湿、豁痰，辟秽之效，鹿角味咸，性温，归肝、肾经，具补肾助阳，强筋健骨之功，二者共为臣药；其他药均为佐使药。全药合用共奏补益五脏，化瘀祛痰、开窍通络之功。

通过分析已有的文献，回神颗粒在治疗中度创伤性脑损伤、脑缺血和脑梗死、防治阿尔茨海默病有显著效果，其作用机制包括改善脑组织缺血缺氧、抑制细胞凋亡保护脑细胞、促进损伤神经修复、促进神经功能和学习记忆功能、基因调控及基因表达等，对临床的指导意义重大。但是，回神颗粒的药味众多，作用机制较复杂，对于其作用机制的研究还不够深入、不够透彻，尤其对中度创伤性脑损伤的研究机制相对不足，而且对有些疾病的作用机制还是空白。回神颗粒的药理研究多是针对颗粒而言，没有确切到具体的有效成分。所以应进一步研究回神颗粒的作用机制和有效成分，开展更多的药理实验，在分子水平和基因水平更深入地研究回神颗粒的作用机制，还可以更多的开展临床试验来深入研究回神颗粒的临床疗效，使回神颗粒的临床研究更加完善，为回神颗粒的安全性评价和临床研究提供更多科学数据。