新余蜜桔无核化新品系选育初报

周京华，万 渊，简火仔

（江西省新余市果业局 338000）

新余蜜桔是新余市老一辈科技工作者1977年从原新余县姚圩公社彭家大队本地早群体中选育的优变单株，该品种早结、丰产、稳产、抗病、耐瘠、耐寒，果实整齐，表皮光滑细腻，商品性状好，平均单果重70g左右，味甜肉嫩，汁多化渣，有微香，是鲜食和制罐的极好品种。经过40余年的发展壮大，产业已初具规模，2018年栽培面积1.07万hm2，总产17万t，产值超4亿元，品牌价值7.25亿元，产品稳定销售到国内20多个大中城市，并出口到一带一路多个国家，新余蜜桔已经成为新余市乡村振兴、农民致富的重点支柱产业。但美中不足的是，新余蜜桔单果平均含种子6.4粒，其“有核”的缺憾已成为制约着产业进一步发展的瓶颈。针对这一问题，我们开展了新余蜜桔少核、无核新品系的选育工作。

1 选育方法

1.1 辐射诱变

采用合理辐射剂量的60C0-r对新余蜜桔接穗进行辐射诱变，将辐射后的接穗高接到幼年温州蜜柑上，合理栽培管理，挂果后进行无核化筛选。

1.2 田间筛选

辐射接穗高接成活并开始结果后，果实成熟前对结果枝条全部标记挂牌，采摘果实重点检测单果种子粒数，对平均单果种子数2粒以下的枝条进行重点持续筛查和品质分析。

1.3 检测方法

优株基因检测分析采取SRAP分子标记分析或SSR基因检测分析；横纵径、果皮厚度采用精确度为0.02mm的游标卡尺测量，可溶性固形物采用PAL-1的数显糖度计测量。

1.4 选育技术路线如图1。

图1 选育技术路线

2 选育过程

2.1 多途径探索

新余蜜桔无核化选育工作早在1986年就已经开始，当年在子代树上采取接穗1kg，用 4000伦琴60C0-r射线辐射接穗，培育了苗木100多株，没有发现变异；1997年开始进行自然群体变异选种，由于群体过少，工作没有进展；1998年和2002年先后在浙江黄岩和中柑所引进少核本地早和脱毒少核本地早接穗，高接温柑和嫁接枳砧上。1998年引种的少核本地早均表现树势衰弱，叶片黄化，说明带有碎叶病病毒。2002年引进的脱毒少核本地早接穗，高接树上长势很好，但嫁接在枳砧上的28株苗木，有1株出现黄化现象，可能带有病毒，27株无黄花苗已隔离建园；2002年在东边园艺场通过920化控产生了少核，2003年继续进行化控试验，没有达到预期目标。

2.2 适量60C0-r辐射剂量试验

2003年3月在母本园中剪取新余蜜桔接穗75kg，精选到 25kg，分别用 4000、6000、8000 伦琴60C0-r剂量辐射，照射后的接穗在6年生温柑树上高接了2.2万个芽，嫁接成活率分别为∶71.85%、39.29%和15.84%。2005年春季采用6000伦琴60C0-r辐射新余蜜桔接穗100kg，分别在2个新余蜜桔幼年树果园高接，成活率分别为41.7%和53.6%。嫁接后进行正常管理，每年10月中下旬对结果枝条全部标记挂牌，采下果子调查单果种子数和固形物含量，对平均单果种子数2粒以下表现较好的优株进行重点分析和管理，下年进一步进行稳定性观察分析和果实品质分析等。

3 田间调查

辐射后2005年第1次采果，全园海选763个有果枝条，每个枝上果实全部采摘备检，发现9个符合选育标准（见表1）。2006年第2轮海选并对上年9个表现优的枝条重点分析，发现只有编号为A72符合选育标准，另选到A14符合要求（见表2）。2007年第3次海选，A47、A88、AA1（补）符合标准（见表3）。2008年第 4次海选未发现符合要求目标枝条。经过前4轮筛选，发现经原子60C0-r辐射后产生的变异不稳定。

表1 2005年新余蜜桔辐照无核优株初选结果

表2 2006年新余蜜桔辐照无核优株初、复选结果

表3 2007年新余蜜桔辐照无核优株初、复选结果

表4 2008年新余蜜桔辐照无核优株初、复选结果

4 稳定性观察

2009年在3个经辐射高接后的果园第5次全园海选，发现2009-3、2009-4两个枝条上的果连续多果无籽，现场采样分析，测得平均单果种子分别为1.6和0.1粒（见表5）。为确定两单株的遗传性状是否在分子水平上发生了遗传变异，2010年我们委托华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室对2个单株进行了SRAP分子标记技术分析，有8对引物扩增差异片段，结果表明2009-3、2009-4与对照存在差异条带，遗传物质构成发生了变异。

表5 2009年新余蜜桔辐照无核优株初、复选结果

但2010～2012年期间其稳定性发生反复∶2010年再采果发现2009-3、2009-4超过选育标准；2011年2009-3平均种子数为0.57粒/果，2009-4为3.0粒/果；2012年2009-3、2009-4两株系种子粒数又超过选育标准；2013年2009-3、2009-4两株系种子数又达到了标准。可见2009-3、2009-4，表现为种子数较少，综合品质优，但还不够稳定。

表6 2018年新余蜜桔无核优选株果实品质分析表

表7 2016年新余蜜桔无核优选株果实品质分析表

表8 2017年新余蜜桔无核优选株果实品质分析表

2013年秋将2009-3、2009-4枝组编号为2013-1、2013-2，采集到13个有效芽高接在5株新余蜜桔成年树上（其中2013-1号1株，2013-2号4株），进行稳定性观察与筛选。嫁接芽成活8个，经过精心管理，形成了8个枝组，编号依次为2016-1、2016-2、2016-3……2016-8。2016年开始采果观察分析，经2016、2017、2018连续3年考察，8个枝组连续3年表现稳定，所有枝组的果实种子平均都在1粒以下，全部符合选育要求，达到了无核株系的选育要求（详见表6、表7、表8）。

5 结论

通过辐射诱变、田间群选等方式，在多年的观察、筛选、嫁接、再观察、再筛选后，于2009年发现了2009-3和2009-4两个枝组（经嫁接的辐射单芽形成）符合选育要求，平均单果种子数分别为1.6和0.1粒。但在2010～2012年期间，两枝组的单果平均种子数在0～5粒间变化，其稳定性表现出不断反复的现象。这表明了经辐射诱变产生的芽变具有变异性状的不稳定性。

2013年秋将2009-3、2009-4枝组编号为2013-1、2013-2，高接在5株新余蜜桔成年树上进行稳定性观察与筛选。2016年开始采果观察分析，经2016～2018连续3年考察，2013-1和2013-2无核或少核性状逐渐表现稳定。综合2016～2018年连续3年稳定性再观察，其嫁接后8个枝组种子数和品质的检测表明，这2个无核优质株系平均种子数均在0.5以下，横纵径比新余蜜桔略小，果形指数略高，果皮厚度无明显差异，可溶性固形物略高于新余蜜桔。可见，2013-1与2013-2两个无核优株系初步符合选育预期，暂命名为辐佑1号、辐佑2号，有待下一步进行田间测试和推广试验。