白芍总苷治疗类风湿关节炎药理作用及机制研究进展

李丽萍，张杜娟，冯坤苗

(1 济南市妇幼保健院，济南250001; 2 中国人民解放军海军军医大学)

类风湿关节炎(RA)是一种以软骨破坏及骨破坏为主的自身免疫性疾病，病变可累及全身多个关节[1]。发病初期，患者关节红肿、疼痛，局部皮肤有灼热感；随着病情的加重，患者关节内滑膜组织增生，随之关节内形成血管翳，进一步对患者的关节软骨或骨间进行破坏，最终使得患者关节畸形、运动能力丧失，影响正常生活[2,3]。目前，还未找到根治RA的方法，现阶段的治疗以改变病情的抗风湿药物和生物制剂为主；但是，此类药物一般价格昂贵，患者的药物耐受较差。所以，寻找一种可以控制病情、不良反应小的药物成为学者研究的目标。白芍为毛茛科植物芍药的干燥根，具有养血调经、敛阴止汗、柔肝止痛和平抑肝阳的作用[4]。在最近的研究中，其活性成分在动物模型中显示出了对糖尿病和酒精性脂肪肝的治疗作用[5,6]。其用于治疗RA最早记载于《金匮要略》中，书中记载的药方“桂枝芍药知母汤”可治疗“诸肢节疼痛，身体魁羸，脚肿如脱”。查阅中国中医科学院信息所建设的古籍数据库和方剂组成发现，库中含有白芍，并具有治疗风湿性关节炎古代相关病名的方剂有60首[7]。研究发现，白芍的主要有效成分为一组糖苷类物质，被统称为白芍总苷(TGP)，其中芍药苷(PF)占90%以上。研究表明，TGP具有抗炎、镇痛、抑制自身免疫反应等药理作用，对RA有确切的疗效，不良反应少[8,9]。现对近年来TGP治疗RA的药理作用及机制的研究进展综述如下。

1 TGP治疗RA的药理作用

1.1 抗炎作用 有研究发现，TGP可通过抑制大鼠腹腔单核巨噬细胞产生分泌的TNF-α和IL-1抑制因介质诱导产生的滑膜炎[10]；Wang等[11]研究发现,TGP能够通过抑制单核细胞作用缓解慢性炎症，机制是通过抑制人外周血单核细胞中的IL-1β调高单核细胞的噬菌作用，同时上调前列腺素E2(PGE2)和TNF-α，增加HLA-DR和CD80表达。在苯酚胶浆盆腔炎大鼠模型中，口服TGP 200 mg/kg,一定程度上改善了大鼠病理情况，减少腹腔白细胞计数，继而降低毛细血管的通透性，起到抗炎作用[12]。刘锋[13]通过建立CIA小鼠模型，腹腔注射TGP 14 d后，CIA鼠前后足关节肿胀明显减轻；同时，关节病理切片中浸润的中性粒细胞、淋巴细胞明显减少，滑膜组织增生减轻，毛细血管增生减少，血管翳形成受到抑制，TNF-α、IL-1、IL-6表达被抑制。这表明TGP可缓解CIA小鼠关节炎症反应，减轻滑膜组织病变，并通过抑制TNF-α、IL-1、IL-6水平抑制炎症反应。

1.2 镇痛作用 李辉等[14]采用小鼠热板法进行试验，发现TGP对小鼠的热板导致的疼痛有明显的抑制作用。洪嘉琪等[15]利用弗氏完全佐剂诱导小鼠炎症疼痛模型研究发现, 用80 mg/kg PF腹腔注射治疗后，小鼠机械性痛阈与热板痛阈均明显升高。并且实验证明，PF缓解慢性炎症疼痛可通过抑制炎症因子释放，也可通过抑制脊髓小胶质细胞的激活，而此过程依赖抑制Akt-NF-κB信号的激活[15,16]。另一个研究小组通过大鼠坐骨神经的慢性压迫性损伤(CCI)诱导神经性疼痛建立模型，以研究PF是否可以缓解神经性疼痛。结果表明，PF能显著减轻这种神经病理性疼痛，并降低了脊髓中TNF-α和IL-1β促炎细胞因子的水平[17]。同时，有研究证明PF的这种镇痛效果是通过腺苷A1Rs发挥作用的[18,19]。

1.3 免疫调节作用 风湿免疫性疾病是一种免疫调节性疾病，存在多个调节通路、免疫分子、免疫细胞等参与调节。近年来对TGP的研究发现，其对免疫过程多个环节存在调节作用。通过腹腔注射环磷酰胺复制免疫低下的动物模型，给予白芍高中低剂量干预，测定碳粒廓清、迟发型超敏反应、血清溶血素含量、巨噬细胞吞噬功能；结果发现，与对照组相比，白芍组能显著提高免疫低下模型小鼠免疫器官质量，能够通过增强巨噬细胞吞噬能力增强小鼠非特异性免疫，降低迟发型超敏反应中小鼠耳肿胀度增强细胞免疫，升高小鼠溶血素含量增强体液免疫[20]。TGP对脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的量效曲线呈钟罩形，对B淋巴细胞增殖反应和IL-1诱生的负向调节，与TGP促进巨噬细胞释放PGE2有关[21]。TGP对免疫细胞因子也有一定影响。

2 TGP治疗RA的主要作用机制

2.1 TGP对IL-1的抑制作用 IL-1被称为前炎症细胞因子，是炎症发作的关键因子，能够诱导产生多种细胞因子，刺激T细胞，从而使机体处于慢性炎症状态。李振彬等[22]发现，与对照组相比，TGP可降低急性痛风性关节炎(AGA)大鼠血清中IL-1β的水平。另外，对佐剂性关节炎大鼠腹腔巨噬细胞产生的IL-1也有抑制作用[23]。在体外培养的大鼠颈椎间盘纤维环细胞炎症模型中，PF浓度为200 μg/mL时可有效抑制IL-1β的表达[24]。

2.2 TGP对IL-2的双向调节作用 IL-2是Th1分泌的主要正性调节细胞因子，多个研究发现，TGP双向调节IL-2[25]。例如，TGP可使ConA诱导的大鼠脾淋巴细胞产生的IL-2在高浓度(12.5～62.5 mg/L)时抑制生成，低浓度(0.5～12.5 mg/L)时促进分泌，有助于脾细胞产生IL-2的能力恢复。手术切除双侧颈神经节造成大鼠胸腺及脾淋巴细胞分泌障碍，IL-2减少；使用TGP后，该现象逆转，IL-2升高，提示TGP对IL-2的产生具有双向作用。

2.3 TGP对TNF-α的抑制作用 TNF-α是RA发病过程中的主要炎性物质之一，可增强血管内皮细胞吸附白细胞的能力，导致白细胞在炎症局部聚集。研究发现，RA患者关节滑液TNF-α含量明显升高，其可抑制脂肪合成酶所介导的细胞死亡，加重关节炎症状，故抑制TNF-α生成可缓解RA症状。刘锋[13]研究发现，TGP可缓解CIA小鼠关节炎症的发生，诱导滑膜细胞凋亡，并通过降低CIA小鼠血清TNF-α水平抑制炎症。吴丹[26]使用ELISA法对CIA大鼠血清TNF-α进行检测，发现经高中低剂量TGP治疗后血清TNF-α水平均明显下降，并具有统计学意义。此外，有研究表明，体外分离培养的RA患者的环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞(CCP/AST)在TGP的存在下，其分泌的TNF-α水平下调[27]。这说明TGP可通过降低TNF-α含量，对RA起治疗作用。

2.4 TGP对NF-κB活化的调控作用 目前RA的发病机制虽不是很清楚，但NF-κB可能在RA发病中起重要作用。NF-κB在细胞因子诱导的基因表达中起关键性调控作用，可通过调节细胞因子、趋化生长因子、黏附分子及多种酶的基因表达，参与机体免疫调节和炎症反应。TGP能明显抑制炎症时NF-κB的核转移，拮抗由LPS诱导的巨噬细胞NF-κB与DNA的结合活性，通过作用于多个关键环节抑制巨噬细胞NF-κB的活化，从而抑制炎症反应[28]。

2.5 TGP对IL-17的调节作用 IL-17作为一种强大的前炎症细胞因子，可促进IL-6、IL-8、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、PGE2释放，还可协同其他炎性细胞因子如TNF-α、IL-1等，促进粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-6、IL-8等分泌，从而增强其致炎活性。刘国玲等[29]研究发现，TGP可能通过下调NF-κB/p65蛋白表达，抑制IL-17等炎性因子和血清血管内皮生长因子的产生，进而减轻炎症及病理状况。

2.6 TGP对关节滑膜细胞增殖的抑制作用 研究发现，TGP能够显著抑制滑膜细胞增殖，其机制可能与其下调β抑制蛋白2的表达以及调节Wnt信号通路的活化水平有关[30,31]。PF还可抑制成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)的过度增殖，恢复低下的环磷腺苷水平，并抑制FLS分泌PGE2、IL-1β[32]。研究发现，TGP可能通过抑制关节滑膜细胞的过度异常增殖和分泌发挥其对关节滑膜的保护功能，并以关节滑膜细胞为靶细胞发挥其治疗作用。

白芍是具有多种药理活性的中药，具有免疫调节、抗炎、镇痛、保肝等作用，可用于RA、系统性红斑狼疮等免疫性疾病的治疗，且不良反应少，耐受性良好，是中外学者研究的重点药材。TGP具有多种化学成分，不同成分作用不同通路靶点，具体的作用机制还有待进一步深入研究。随着研究的不断深入，TGP作为抗RA药物具有更广阔的开发前景。