肠道菌群与子宫肌瘤的相关性分析

张亚芳，吴青京，王青慧，陈芬

0 引言

子宫肌瘤是女性常见的生殖系统良性肿瘤，但发病原因并不是很明确，有可能是受到体内外多种因素相互作用的生理结果，涉及到子宫正常肌层细胞的过度增殖生长。近些年流行病学的研究已证实，子宫肌瘤的生长和瘤体的维持有赖于女性体内性激素，尤其是雌激素、孕激素的水平[1]，而雌激素的合成及分泌又受到多种体内外因素相互影响。随着现代生活环境改变、抗生素及生物制剂的应用，人体肠道菌群成分和数量的改变，对人体运动、免疫、内分泌及性激素水平状态均存在重要影响[2-4]。而雌激素水平的改变是女性子宫肌瘤发病的一个独立影响因素。相关研究也已经证实，除了雌激素、孕激素对子宫肌瘤有影响外，体内微量元素、生长因子、免疫细胞等与子宫肌瘤同样具有密切的关系。人体肠道菌群数量庞大，时刻影响着人体生理功能，对机体激素合成与分泌、微量元素、生长因子、免疫系统等影响深远。本研究分析育龄女性肠道菌群情况及部分菌群种类的水平，为肠道菌群情况与子宫肌瘤发病的相关性提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 收集2015年6月至2017年7月海南省妇幼保健院收治的育龄女性子宫肌瘤患者70例作为研究对象，年龄为25～45岁，平均年龄（36.6±3.3）岁；将同期来我院行健康体检女性70例，设为对照组，年龄为23～46岁，平均年龄（35.8±4.5）岁。两组就诊者的年龄分析比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.1.2 纳入标准 （1）观察组所有子宫肌瘤患者均符合临床及B型超声诊断的标准；（2）两组受检对象均属育龄女性，未绝经。排除标准：（1）受检者患有明显消化道急、慢性疾病；（2）排除既往有胃肠道手术史者；（3）排除1月内服用外源性雌孕激素、抗生素及对消化道有刺激作用的生物、化学制剂；（4）排除妊娠和哺乳期女性；（5）排除患有重要脏器病变和精神障碍者；（6）排除对本研究的知情同意书不认可者。

1.1.3 标本采集 收集两组受检者新鲜大便，取大便中段约5 g于无菌干燥试管内，保存于-80℃冰箱中。

1.2 标本DNA的提取和检测

按照实验室无菌操作要求，根据DNA提取操作步骤进行粪便DNA的提取，并进行DNA聚合酶链反应—梯度凝胶电泳，用荧光定量PCR技术检测肠道菌群中细菌总数、双歧杆菌、粪肠球菌、大肠杆菌、拟杆菌、梭杆菌、变形杆菌和乳酸杆菌的数量，以（拷贝数/克湿粪）表示。检测详细步骤按试剂盒说明。

1.3 统计学方法

采用SPSS20.0软件系统对标本数据进行数据分析。计量数据以（±s）表示，采用t检验；进行Pearson相关性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组受检对象各肠道菌群状况比较

子宫肌瘤组患者肠道的细菌总数、乳酸杆菌水平均明显高于对照组，两者相比差异有统计学（P＜0.05）。子宫肌瘤组粪肠球菌、大肠杆菌水平高于对照组，但两者相比差异无统计学意义（P＞0.05）。其中子宫肌瘤组的双歧杆菌、拟杆菌、梭杆菌和变形杆菌水平均明显低于对照组，两者对比差异有统计学意义（P＜0.05），见表 1。

2.2 肠道菌群与子宫肌瘤发病的相关性分析

经Pearson相关性分析，子宫肌瘤组肠道细菌总数、双歧杆菌和乳酸杆菌水平与子宫肌瘤发病呈正相关（P＜0.05）；拟杆菌、梭杆菌、变形杆菌与子宫肌瘤发病呈负相关（P＜0.05）；其中粪肠球菌、大肠杆菌与子宫肌瘤的发病相关性不显著（P＞0.05），见表2。

3 讨论

子宫肌瘤是女性生殖系统中最常见的良性肿瘤，在育龄女性群体中发病率约为23%[5]，是引起子宫红色变性、子宫蒂扭转和生殖器炎性反应的主要因素，甚至引起女性不孕症。相关报道指出[6]，无排卵的不孕女性容易发生子宫肌瘤，体内的雌激素水平较正常女性体内的高。随着饮食结构改变、抗生素和免疫抑制剂的使用，人体肠道菌群的组成和数量发生改变，在对人体肠道菌群关注度的提高发现，肠道菌群与人体心血管疾病、内分泌疾病、免疫系统及激素水平的代谢密切相关[2-4]。对子宫肌瘤的深入研究已证实，子宫肌瘤的发病及形态的维持依赖于体内雌激素水平，雌激素的合成和分泌受到维生素D、维生素E和碘、硒等微量元素影响[7-9]。再者，相关研究报道，体内免疫细胞、生长因子及微量元素的异常与子宫肌瘤的发生有关[10-11]。肠道菌群的状态直接或间接的影响着人体生理功能，对胃肠道内食物的发酵提供了多种生物活性和通路，同时对维生素D、维生素E和碘、硒等微量元素的代谢吸收具有重要的调节作用[8-9]，而微量元素参与机体生理功能，并参与女性生殖激素分泌功能。

表1 两组受检者各肠道菌群水平比较 (±s, n=70)Table1 Comparison of intestinal flora levels between two groups (±s, n=70)

表1 两组受检者各肠道菌群水平比较 (±s, n=70)Table1 Comparison of intestinal flora levels between two groups (±s, n=70)

Groups Total number of bacteria Bifidobacterium Enterococcus faecalis Escherichia coli BacteroidetesFusobacteriumProteus speciesLactobacillus Observation 9.67±0.15 8.33±0.38 7.35±0.38 7.32±0.48 5.67±0.43 4.36±0.49 4.73±0.25 6.72±0.34 Control 8.73±0.62 9.57±0.30 7.17±0.20 7.20±0.13 7.52±0.51 8.42±0.61 7.82±0.36 3.40±0.37 P 0.045 0.016 0.312 0.778 0.007 0.000 0.000 0.000

表2 肠道菌群水平与子宫肌瘤发病的相关性分析Table2 Correlation between intestinal flora and pathogenesis of uterine leiomyoma

人体的免疫系统能够发现、识别及清除对机体有损害的损伤因子，并能维持身体内、外环境的平衡与稳定状态，同时能促进吞噬细胞产生TNF-α，使损伤的平滑肌细胞发生增生性病变。有研究报道[10]，TNF-α与子宫肌瘤的发生具有相关性，其机制可能是抑制了机体的免疫状态。而研究也证实，肠道菌群的状态对机体的免疫系统具有重要影响[12]，最终导致免疫系统的平衡打破，免疫因子激活，引发子宫肌瘤。

近些年研究发现，子宫肌瘤是一种高度依赖体内雌、孕激素的良性肿瘤。在子宫肌瘤体内，雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）水平高于正常的子宫肌层。再者，子宫肌瘤主要高发于育龄期女性，而在此年龄段的女性雌、孕激素水平较其他年龄段高。长期服用雌激素的女性，子宫肌瘤的发生率较未服用的高，在停用雌激素或绝经期后，瘤体将逐渐缩小[13]。身体内微量元素和电解质参与性激素的合成，而肠道菌群的失调对维生素及碘、硒等微量元素的吸收转运均具有重要的调节作用[8-9]，这可能是导致子宫肌瘤发生的原因。

相关的研究表明[13-14]，机体内的生长因子与子宫肌瘤的发生具有相关性，尤其是与表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、转化生长因子（TGF）关系最为密切，研究发现其促进子宫肌瘤的生长机制可能与促进子宫平滑肌细胞的分裂、增殖和与瘤体血管的生成有关。雌激素相关的研究发现[15]，在子宫肌瘤瘤体内EGF受体、VEGF受体、TGF受体水平较正常子宫肌层高，生长因子受到雌激素的影响作用于内分泌系统，也使子宫肌瘤细胞增殖和分裂加强。而肠道菌群的水平状态对生长因子也起到调节作用[16]。

综上所述，子宫肌瘤的发生是一个多因素相互作用的结果。肠道菌群不但对人体内微量元素、免疫系统、生殖性激素及生长因子产生影响，从而与子宫肌瘤形成密切的相关性；还与人体的骨代谢、甲状腺、精神、肠道屏障和肿瘤病变等有紧密联系[17]。由于本研究样本量相对较少，加之在观察菌群种类上选择最常见的几种，观察指标相对欠缺，将在后期加大患者数量，增加观察菌群种类，以完善其他菌群种类对子宫肌瘤的发生乃至人体疾病的相关性进一步分析。