气相色谱仪测定复方丹参滴丸给药制剂中异龙脑和龙脑含量

张奇 沈阳市铁西区卫生健康服务与行政执法中心（沈阳市铁西区疾病预防控制中心） （辽宁 沈阳 110021）

内容提要： 目的：使用气相色谱法测定复方丹参滴丸给药制剂中异龙脑、龙脑的含量。方法：实验采用气相色谱法进行测定，乙酸乙酯作为溶剂，水杨酸甲作为内标。色谱柱为HP-5型5%PHMEsiloxana石英毛细管柱。氮气作为本次实验的载气，分流的比例为10:1。FID检测器，检测器所设置温度为250˚C；进样口温度为200˚C；柱的温度为100˚C，保持在12min。结果：实验结束之后可明显地发现异龙脑在0.010～0.30mg/mL，龙脑在0.020～0.60mg/mL范围内呈现出良好的线性关系，异龙脑的平均回收率为97.6%，RSD为0.64%。差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：根据实验结果可明显看出，本次实验方法较为的快速、准确、可靠、所以说气相色谱法可以应用于复方丹参滴丸给药制剂中异龙脑、龙脑含量的测定。

此次研究涉及的药剂是复方丹参滴丸的水溶液，复方丹参滴丸的成分非常的复杂多样，其中最主要的就是丹参以及冰片，所以说复方丹参滴丸具有极好的活血化瘀、理气止痛的功效[1]。为了能够更深入的研究处方中冰片的含量，使用气相色谱法测试此类药剂中的异龙脑、龙脑的含量，而药剂中的冰片的含量则是这两种药品含量的和[2]。

1.资料与方法

1.1 一般资料

Agilent 6890气相色谱仪、FID检测器是本次实验主要的实验器具。此次异龙脑和龙脑含量的测试主要使用的药剂有：龙脑对照品（批号BCBM2364V）、异龙脑对照品（批号MKBJ9230V）、水杨酸甲脂对照品，均来自于Sigam。乙酸乙醇作为本次实验的色谱纯。

1.2 方法

色谱条件：色谱柱为Hp-5型5%PHMEsiloxana石英毛细血管柱，血管柱的温度为100˚C，时间为12min，总程序也是12min。FID氢火焰离子化检测器，检测器温度为250˚C；本次实验主要是使用氮气作为本次实验的载气；载气的气流流速为1.0mL/min；进样口的温度为200˚C，分流的比例为：10:1。

实验所用的内标溶液的准备：首先是准备内标溶液。在实验开始之后，将适量的水杨酸甲酯反之在适宜的量瓶中，之后将适量的水杨酸甲酯与乙酸乙酯进行融合，制成实验需要的8mg/mL溶液备用。第二，准备对照品的溶液备[3]。首先取龙脑对照品，精密称取15mg、20mg以及25mg，将三份对照品放置在100mL的量瓶中，随后在三个量瓶中分别加入4mL的内标溶液，之后再加入乙酸乙酯支撑的不同浓度的龙脑对照品溶液，进行异龙脑溶液的制备[4]。选取一定的异龙脑对照品，精密称取8mg、9mg以及12mg，将称好的三份异龙脑对照品放置在100mL量瓶之中，在三个试管中都加入4mL的内标溶液，并加入不同浓度的对照组品溶液。第三，供试品溶液的制备。使用一定量的药剂，并将药剂放在离心管中，同时要加入适量的乙酸乙酯，之后就是将混合之后的物质进行剧烈摇动，之后对这些物质进行萃取[5]。如果发生了乳化的情况就可以加入NaCL进行破乳处理，将药剂进行5min的离心处理，随后就可以使用吸管吸取萃取液并放在量瓶中。这个过程要重复两次，进行两次萃取操作，每一次萃取10mL，随后将萃取之后的溶液进行合并，加入2mL内标液，在进行定容时采用的是乙酸乙酯，并将溶液进行摇晃，直至溶液中的物质充分的溶解，使之成为供试品溶液。第四，根据相应的处方的规定将丹参以及三七用水进行煎煮处理，使之成为溶液，并将溶液中的多余的物质进行过滤，最后将这个溶液进行浓缩，在浓缩后的滤液中加入一定的乙醇，静置一段时间，使得滤液中一些物质可以沉淀下去，待滤液分层之后，取上层清液，对乙醇进行二次回收处理，并将得到的溶液进行不断的浓缩处置，直至其成为稠膏。将溶液浓缩成为稠膏之后，将适量的经过在熔融处理的聚乙二醇中加入稠膏中，并将两者搅拌均匀，最后在稠膏中加入液体石蜡，使稠膏成为包薄膜衣的滴丸，也就是阴性样品[6]。制作出阴性样品之后，称取适量的阴性样品0.2g，将称好的阴性样品放置在50mL的塑料离心管之中，然后制作阴性溶液备用。

专属性的试验：将所有已经制作完成的溶液分别注入气相色谱仪，进行测定测，并使用内标法计算其中的龙脑和异龙脑含量。有实验可以看出，空白的溶剂、阴性样品对药剂中的龙脑和异龙脑含量不产生影响。

标准曲线的制备：制备标准曲线，首先选取龙脑对照品，重量大约是100mg，将称取的100mg龙脑对照品放置在50mL量瓶中，随后在龙脑对照品中加入制作的龙脑对照品母液。并吸取龙脑对照品母液15、10、5、3、1以及0.5(单位：mL），将选取的溶液放置在50mL量瓶中，加入内标液2mL，将溶液配制成不同浓度的龙脑对照品溶液。

精密度的实验：选择同时进行制作的药剂制作份供试品溶液，并在一定的色谱条件下检测其中的含量。样品中冰片的平均含量是0.356mg/mL，RSD的含量为0.76%。

加速回收率的实验：选择一定量的给药剂并将药剂放在离心管内，将其分成9份，并在药剂中加入异龙脑标准液，随后制备供异龙脑回收率试验溶液。选取给药制剂5mL，将选取的给药制剂放在50mL的塑料离心管中，随后加入1.2mg/mL的龙脑标准液，制备供龙脑回收率试验溶液。

1.3 统计学分析

使用统计学软件SPSS 22.0对所有数据进行处理，用x±s对数据进行表示，对计量资料进行检验时使用t，对计数资料进行检验则使用χ2，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

实验结果显示，测定样品中冰片的平均含量为0.356mg/mL，RSD为0.86%，所以说精密度是比较好的。并且可以发现，龙脑以及异龙脑不同的浓度范围内才能表现出良好的线性关系。根据加样回收率试验的结果可以明显的发现，异龙脑的平均回收率为98.43%，RSD为0.65%；龙脑的平均回收率为98.53%，RSD为0.96%，可见异龙脑的平均回收率是低于龙脑的平均回收率的，且龙脑的RSD要明显的低于异龙脑的RSD。

3.讨论

在对相关的溶剂进行选择时，主要的选择原则就是对实验的影响较小，其中最适合的就是乙酸乙酯溶剂，其对样品有较好的溶解效果，又可以有效地避免空白溶剂的干扰，本次实验所使用的研究方法，都是经过一定的试验得到验证的，并且所有的研究步骤都非常的安全谨慎，得到的实验结果非常的可靠。综上所述，气相色谱法可以应用于复方丹参滴丸给药制剂中异龙脑、龙脑含量的测定。