黑线姬鼠和大林姬鼠消化系统中过氧化物酶的比较分析

贾修歧 杨新宇 王喜伟 徐春雨 金志民

摘要：为给黑线姬鼠（Apodemus agrarius）和大林姬鼠（Apodemus peninsulae）实验动物化及农林害鼠防治等研究提供基础生化数据，采用PAGE方法比较分析2种鼠消化系统中过氧化物酶的分布和活性并建立电泳谱图。结果表明，黑线姬鼠和大林姬鼠消化系统中过氧化物酶均有表达，同种个体间以及2种鼠间消化系统中过氧化物酶的活性和分布存在明显差别。

关键词：黑线姬鼠（Apodemus agrarius）;大林姬鼠（Apodemus peninsulae）;消化系统;过氧化物酶;电泳

中图分类号：Q956         文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2019）23-0148-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.23.036           开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Comparative analysis of peroxidase in digestive system of

Apodemus agrarius and A. peninsulae

JIA Xiu-qi，YANG Xin-yu，WANG Xi-wei，XU Chun-yu，JIN Zhi-min

（College of Life Science and Technology，Mudanjiang Normal University，Mudanjiang 157011，Heilongjiang，China）

Abstract： In order to provide basic biochemical data for the experimental animalization of Apodemus agrarius and A. peninsulae and the prevention and control of agro-forest and rats， the distribution and activity of peroxidase in the digestive system of two kinds of mice were compared and analyzed by PAGE method. The results showed that the peroxidases in the digestive system of A. agrarius and A. peninsulae were all expressed， and there were significant differences in the activity and distribution of peroxidase between the same individuals and the digestive system of the two species.

Key words： Apodemus agrarius; A. peninsulae; digestive system; peroxidase; electrophoresis

黑线姬鼠（Apodemus agrarius）和大林姬鼠（Apodemus peninsulae）同属姬鼠属，均为中国东北地区农林害鼠优势种[1]。

过氧化物酶（Peroxidase，POD）是生物体内重要的自由基清除剂，主要功能是清除氨基酸分解代谢及糖醛酸合成代谢等过程中形成的过氧化物，在肝细胞中数量较多。过氧化物酶的标志酶是过氧化氢酶，主要是将过氧化氢水解，对细胞起保护作用[2]。随着生命科学和医学研究的发展， 对实验动物品种的需求也越来越多， 将野生动物培育并开发为实验动物是实验动物工作发展的重要方向[3]。黑线姬鼠和大林姬鼠作为实验动物具备易野外易捕捉，饲养成本低等优良特点，了解2种鼠消化系统中POD的分布及活性对其作为实验动物具有重要意义。

关于黑线姬鼠和大林姬鼠的相关研究报道较多[4-10]，但鲜见关于其消化系统中POD研究的相关报道。通过PAGE方法对黑线姬鼠和大林姬鼠消化系统（胃、小肠、大肠、肝脏）中POD进行比较分析，为2种鼠实验动物化和农林害鼠的防治提供基础生化数据。

1  材料与方法

1.1  动物来源

黑线姬鼠和大林姬鼠为2019年4—6月采用笼捕法捕自黑龙江省牡丹江市牡丹峰国家自然保护区的健康成年个体，各3只。

1.2  仪器试剂

主要仪器有DYY-III2稳压稳流电泳仪（北京市六一仪器厂）、高速冷冻离心机（Beckman Coultar）、微量移液枪（Eppendorf）、凝胶成像系统（美国Alpha公司AlphaImager Mini）。主要试剂有Tris、HCl、TEMED、过硫酸铵、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、溴酚蓝、蔗糖、琼脂糖、丙三醇、冰乙酸、乙酸钠、过氧化氢、核黄素、联苯胺等，均为天津市大茂化学试剂有限公司生产的分析纯或生化试剂。

1.3  样品制备

将黑线姬鼠和大林姬鼠的消化系统（胃、小肠、大肠、肝脏）在无菌条件下取出，分别置于研钵中，加入pH 7.6的磷酸缓冲液冰浴研磨，分装离心管离心（5 000 r/min，4 ℃，30 min），取上清液即为POD提取液。

1.4  電泳分析

采用PAGE不连续体系电泳方法[11]进行黑线姬鼠和大林姬鼠的胃、小肠、大肠、肝脏中POD分离，POD染色和比较分析方法参照文献[12]。

2  结果与分析

黑线姬鼠和大林姬鼠的胃、小肠、大肠、肝脏中POD电泳照片和具体情况见图1、表1。分离出POD1至POD17共计17条电泳谱带，迁移率为0.14～0.97，其中，黑线姬鼠的胃、小肠、大肠、肝脏分别分离出8、7、6、7条电泳谱带，大林姬鼠的胃、小肠、大肠、肝脏分别分离出10、6、6、9条电泳谱带，POD3、POD17为黑线姬鼠特有谱带，POD1、POD2、POD8、POD14为大林姬鼠特有谱带，其余为2种鼠共有谱带。

POD2为大林姬鼠胃和小肠所共有，其活性一致;POD4、POD6是2种鼠消化系统中共有谱带，其中POD4表现为2种鼠各消化系统POD活性一致，POD6则表现为黑线姬鼠强于大林姬鼠;POD5为黑线姬鼠肝脏和大林姬鼠胃共有谱带，其活性比较为黑线姬鼠（肝脏）强于大林姬鼠（胃）;POD7为黑线姬鼠的大肠和小肠以及大林姬鼠的胃、小肠、大肠、肝脏共有谱带，其中，黑线姬鼠的大肠和小肠POD活性一致，大林姬鼠的消化系统POD活性比较为肝脏强于胃强于小肠等于大肠;POD9为黑线姬鼠和大林姬鼠小肠、大肠、肝脏共有谱带，其活性比较为肝脏强于小肠强于大肠，其中，肝脏表现为大林姬鼠强于黑线姬鼠，小肠表现为黑线姬鼠强于大林姬鼠;POD10是黑线姬鼠胃、小肠、大肠和大林姬鼠的胃和小肠所共有，其中黑线姬鼠的胃、大肠POD活性一致，大林姬鼠小肠POD活性强于胃，黑线姬鼠和大林姬鼠胃部POD活性一致，黑线姬鼠小肠POD活性则弱于大林姬鼠;POD11为黑线姬鼠和大林姬鼠的胃、大肠、肝脏共有谱带，其中黑线姬鼠POD活性为肝脏强于大肠强于胃，大林姬鼠POD活性为肝脏强于胃强于大肠，2种鼠肝脏POD活性一致，黑线姬鼠大肠POD活性强于大林姬鼠，胃部POD活性则弱于大林姬鼠;POD12为2种鼠胃特有谱带且活性一致;POD13为2种鼠肝脏和大林姬鼠的胃所共有，其中2种鼠肝脏活性一致，大林姬鼠胃POD活性强于肝脏;POD15为2种鼠大肠、肝脏共有谱带，其中2种鼠肝脏POD活性均强于大肠，2种鼠大肠POD活性一致，黑线姬鼠肝脏部位POD活性则弱于大林姬鼠;POD16为黑线姬鼠胃和小肠共有谱带且活性一致。

3  小结与讨论

通过PAGE方法对2种鼠消化系统中胃、小肠、大肠、肝脏中POD进行研究发现，在2种鼠消化系统中POD均有表达，且2种鼠POD谱带分布以及主带区大致相同，但也存在明显差别，2种鼠消化系统中POD活性最强的是肝脏，胃次之;黑线姬鼠小肠POD的活性强于大肠，大林姬鼠小肠、大肠POD活性一致，大林姬鼠消化系统中POD整体上强于黑线姬鼠，说明在野外生存环境中大林姬鼠的抗逆性要优于黑线姬鼠。黑线姬鼠和大林姬鼠作为实验动物具有诸多优点，且2种鼠都为东北农林主要害鼠，研究2种鼠消化系统中POD，能为其作为实验动物和解决农林害鼠问题提供基础生化数据。

参考文献：

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