香菇高粱菌种制作工艺的优化

段 超 贾峥嵘 杨 杰 陈 丽 薛变丽

（1山西省农业科学院棉花研究所，山西运城044000；2山西省农业科学院食用菌研究所，山西太原030031）

香菇（Lentinus edodes）是最著名的食用兼药用真菌之一，也是我国重要的食用菌出口产品，在民间素有“山珍”之称[1]。菌种生产作为食用菌栽培的首道工序，关系着食用菌生产的成败[2]。目前，食用菌菌种生产中常用棉籽壳、木屑、谷粒及木条为原料制作栽培种[3]。谷粒菌种包括小麦菌种、高粱菌种、玉米菌种等。宋莹等对宾王菇麦粒菌种做了试验[4]。高粱菌种比传统的棉籽壳木屑菌种制种工艺简单、发菌快，能很大程度缩短香菇菌种生产时间。然而，关于香菇高粱菌种的研究较少且生产工艺不成熟。为此，笔者采用正交试验对香菇高粱菌种的生产工艺进行优化。

1 材料与方法

1.1 供试香菇菌株

供试菌株为香菇庆科212，由山西省农业科学院棉花研究所提供。

1.2 培养基制作

选择新鲜无霉变的高粱种子，根据配方（高粱88%，麸皮10%，碳酸氢钙1%，生石灰1%）计算需要用的各原料。将干高粱浸泡到溶有生石灰的自来水中，高粱浸泡1～2 d后将其从水中捞出沥干，按配方将麸皮、碳酸氢钙与高粱混合均匀，分装入17 cm×23 cm袋中，每袋装料0.45 kg左右。培养料装袋后快速高压灭菌2 h，灭菌完、冷却后在无菌环境下对其接种。

1.3 试验设计

单因素试验：试验1设置3种浸泡时间为24 h，48 h，72 h，浸泡温度设置为25℃，浸泡液为3%石灰水溶液。

试验2 为了避免开水煮高粱不好控制时间，同时为了降低能耗。设置3种浸泡温度为15℃，25℃，35℃，45℃，浸泡时间设置为48 h，浸泡液为3%石灰水溶液。

试验3 设置4种浸泡液生石灰浓度为1%，3%，5%，7%，浸泡时间设置为48 h，浸泡温度设置为25℃。

上述三个试验每个处理制作100袋。

试验4 正交试验设计

在单因素试验的基础上，对浸泡时间、浸泡温度和浸泡液生石灰浓度进行3因素3水平L9（33）正交试验。每个处理设置3个重复，每个重复制作100袋，试验因素及水平见表1。

表1 正交试验设计

1.4 观察内容及方法

观察并记录菌丝长势、菌丝颜色、满袋时间、污染袋数。按以下标准评价菌丝体菌丝长势：+++，表示菌丝浓密；++，表示菌丝一般；+，表示菌丝稀疏。菌丝颜色分为浓白、白和较白。

2 结果与分析

2.1 不同浸泡时间的高粱制作香菇菌种结果

由表2可知，浸泡时间为48 h的高粱培养基菌丝长势浓密，满袋时间最短，但有少量的污染袋。浸泡时间为24 h，满袋时间较浸泡时间48 h稍长。浸泡时间为72 h，菌丝长势弱，满袋时间长，污染袋数多。可见制作香菇高粱菌种，高粱适宜的浸泡时间为24～48 h。

图1 生长中的香菇高粱菌种

图2 长满的香菇高粱菌种

图3 转接高粱菌种（左）与棉籽壳菌种（右）栽培种长势比较

表2 不同浸泡时间浸泡高粱制香菇菌种结果

2.2 不同浸泡温度浸泡高粱制作香菇菌种结果

如表3所示，浸泡温度为15℃和25℃时，高粱菌种菌丝长势强，浓密，满袋时间短。浸泡温度为45℃时，菌丝长势弱，稀疏，满袋时间长，污染严重。有此可见，香菇高粱菌种高粱适宜的浸泡温度为15～25℃。

表3 不同浸泡温度浸泡高粱制香菇菌种结果

2.3 不同生石灰浓度浸泡液浸泡高粱制作香菇菌种结果

添加不同质量浓度的生石灰对培养基灭菌前后的pH值均有影响，不同的pH值直接影响菌丝的生长情况[5]。如表4所示，生石灰浓度为1%～3%时，高粱菌种菌丝长势强，浓密，满袋时间短，污染袋数少。生石灰浓度为7%时，菌丝长不满菌袋，污染严重。有此可见，制作香菇高粱菌种，高粱浸泡液适宜的生石灰浓度为1%～3%。

表4 不同生石灰浓度浸泡液浸泡高粱制香菇菌种的结果

表5 正交试验结果分析

2.4 正交试验结果

通过单因素试验中选出的最佳水平：浸泡时间为 24～48 h，浸泡温度为 15～25℃，生石灰浓度为1%～3%。在此基础上，对浸泡时间、浸泡温度和生石灰浓度进行三因素三水平的正交试验。每个处理重复3次。正交试验结果见表5。

这三个因素中，生石灰浓度为最主要的影响因素，浸泡时间次之，浸泡温度为影响最小的因子。

根据正交试验所得的香菇高粱菌种生产的最佳条件为A2B3C1。说明在制作香菇高粱菌种时，高粱较为适宜处理方式为：高粱的浸泡时间为36 h，浸泡温度为25℃，生石灰浓度为1%。浸泡时间过短会导致高粱心泡不透，且造成灭菌的时候灭菌不彻底，接种后香菇菌丝长势不强，且容易感染杂菌。浸泡温度在15～25℃差别不大，在实际生产过程中视情况选用室温即可。浸泡液生石灰浓度过高，会导致高粱碱性太强，抑制香菇菌丝的生长，并导致污染率上升。

3 小结

香菇菌种一般采用棉籽壳或木屑为主要原料，制作的菌种接种时不易散开，在生产中需要更多的原种。选用高粱制作原种，可以减少每袋接种量，且高粱比小麦、棉籽壳、玉米颗粒小，易散开，萌发点多，可缩短发菌时间。

培养料含水量是影响菌丝生长和出菇的重要因素，含水量适宜才能保证菌种质量[6]。然而，高粱菌种在制作过程中如果浸泡制不透或过度而破裂，导致培养基含水量不足或过多，含水量不足会导致灭菌不透污染上升，含水量过多导致培养基呈糊状，影响透气和菌丝生长[7]。

试验结果对于高粱产地利用高粱制作香菇菌种，具有一定的参考作用。