CLIA和ELISA检测乙肝病毒感染血清标志物的效果探讨

王磊

机体感染乙肝病毒后便会形成乙肝, 如果不予以及时的处理和临床干预, 随着病情发展则会逐步出现严重肝炎、肝硬化, 甚至肝癌等重症疾病［1］。因此, 及早予以准确有效的乙肝病毒感染检测有利于及早采取积极治疗措施, 改善患者生存质量。为探讨CLIA及ELISA检测乙肝病毒感染血清标志物的效果, 对本院收治的90例乙肝患者进行了本次研究,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择本院2015年2月～2017年4月收治的90例乙肝患者作为研究对象, 所有患者均符合乙肝临床诊断标准, 经临床和实验室检验排除其他病毒感染类型肝炎、酒精性肝炎、肝硬化等。其中男47例, 女43例, 年龄最小24岁,最大78岁, 平均年龄(45.32±11.27)岁。

1.2 方法 患者于晨起时分别抽取其空腹静脉血3 ml, 在室温环境下进行离心处理后提取血清, 并置于冰箱内保存待测。所有患者的血清平均分成A、B两份, 并做标记。然后分别进行CLIA法和ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb五项乙肝病毒血清学标志物指标。CLIA法采用上海研拓生物有限公司生产的检测仪及其配套试剂盒, ELISA法采用上海科华实验系统有限公司生产的KHB-st-360型酶标检测仪, 试剂盒由厦门新创科技有限公司提供, 具体操作均严格按照试剂盒说明进行, 由国家卫生部(现卫健委)临床检验中心提供的乙肝血清标志物的定值参比血清。

1.3 观察指标及判定标准 对比两种检测方法乙肝病毒标志物阳性检出率、低水平HBsAg的检测效果、HBsAg检测灵敏度。ELISA法阳性判定标准：HBsAg、HBsAb、HBeAg标本OD值与临界OD值的比值≥1为阳性, HBeAb、HBcAb标本OD值与临界OD值的比值≤1为阳性。CLIA法阳性判定标准：HBsAg＞0.05 IU/ml, HBsAb＞10 IU/ml, HBeAg、HBcAb标本RLU与临界值RLU比值≥1为阳性, HBeAb标本RLU与临界值RLU比值≤1为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法乙肝病毒标志物阳性检出率对比 CLIA法检测HBsAg、HBeAg、HBeAb阳性检出率分别为62.22%(56/90)、68.89%(62/90)、30.00%(27/90), 均显著高于ELISA 法的 46.67%(42/90)、52.22%(47/90)、16.67%(15/90), 差异具有统计学意义(P＜0.05)。CLIA法检测HBsAb、HBcAb阳性检出率分别为61.11%(55/90)、70.00%(63/90), 与ELISA法的60.00%(54/90)、64.44%(58/90)比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 两种检测方法低水平HBsAg的检测效果对比 经确诊,90例患者中低水平HBsAg患者45例。CLIA法检出45例(100.00%), ELISA法检出30例(66.67%), 对比差异有统计学意义(P＜0.05)。其中, HBsAg水平0.06～0.2 IU/ml时, CLIA法检出8例, ELISA法检出2例, 对比差异有统计学意义(P＜0.05)；HBsAg水平 0.21～0.5 IU/ml时：CLIA 法检出 13例 , ELISA法检出5例, 对比差异有统计学意义(P＜0.05)；HBsAg水平0.51～1.0 IU/ml时：CLIA法检出19例, ELISA法检出18例,对比差异无统计学意义(P＞0.05)；HBsAg水平1.0～3.0 IU/ml时：CLIA法检出5例, ELISA法检出5例, 对比差异无统计学意义(P＞0.05)。HBsAg水平＜0.5 IU/ml时, CLIA法的检测效果高于ELISA法, ＞0.5 IU/ml时, 两种方法检测效果相同。

2.3 两种检测方法HBsAg检测灵敏度对比 采用阴性血清对2.0 IU/ml HBsAg定值参比血清进行倍比稀释, CLIA法最低检出浓度为0.030 IU/ml, ELISA法最低检出浓度为0.129 IU/ml, CLIA法的灵敏度高于ELISA法。

3 讨论

乙肝虽是由于乙肝病毒感染而引起的, 但是其传染性强,感染率高, 且容易发展为肝炎、肝硬化、肝癌等重症疾病,严重影响人类健康［2］。有研究表示［3］, 有效、快速的检验可动态监测乙肝病毒感染情况。因此, 及早准确监测乙肝病毒感染情况对临床预防和治疗均具有重要意义。

CLIA法和ELISA法是临床上检测乙肝病毒血清标志物的常用方法, 其中ELISA法具有快速简便的优点, 在乙肝疾病诊治过程中具有一定效果。但是ELISA法只能对乙肝病毒血清标志物进行定性分析, 而不能定量分析, 临床诊断过程中无法判断乙肝病毒感染复制情况, 甚至有时候还会出现检测结果不稳定的现象。CLIA法是一种同时结合化学发光反应和免疫反应的检测方法, 与ELISA法相比, CLIA法的灵敏度及准确率更高、特异性更强, 能快速进行定量分析, 弥补了 ELISA 法的缺陷［4-6］。

本次研究结果显示, CLIA法检测HBsAg、HBeAg、HBeAb的阳性检出率均显著高于ELISA法, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。这主要是因为CLIA法中的顺磁性微粒是固相载体,体积小而表面积大, 因而具有更大的反应面积。此外, 因标志物可循环利用而能有效延长发光时间, 增加强度, 准确显示乙肝病毒感染具体情况, 进一步提高了检测检出率和灵敏度［7,8］。本次研究结果也显示, CLIA法对低水平HBsAg的检测效果优于ELISA法, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。可见, CLIA法可有效避免低水平HBsAg样本的假阴性漏检现象。此外, CLIA法最低检出浓度为0.030 IU/ml, ELISA法最低检出浓度为0.129 IU/ml, CLIA法的灵敏度高于ELISA法。

综上所述, 在乙肝病毒标志物临床检测中, CLIA法检测的阳性检出率更高, 且对于低水平HBsAg的检测效果和灵敏度均优于ELISA法, 值得临床推广应用。