植物内源RNAi抑制CRISPR编辑效率

2019年3月14日，深圳大学莫蓓莘教授研究组以拟南芥为模式植物，系统评估了内源RNAi对不同启动子驱动的Cas9系统编辑效率的影响。研究结果显示，组成型表达的强启动子，如35S CaMV启动子驱动的Cas9表达，受内源RNAi的影响较大，而胚特异性表达的启动子，如EC1.2启动子驱动的Cas9表达，则不受内源RNAi的影响。在拟南芥RNAi突变体rdr6、dcl2、dcl3、dcl4背景下，35S-Cas9系统的基因编辑效率较野生型（WT）背景下有显著提高；基于此，利用人工miRNA（amiRNA）抑制拟南芥内源RNAi通路关键基因RDR6，将amiR-RDR6与Cas9元件构建在一起，可以有效提高35S-Cas9系统的基因编辑效率；同时，利用amiR-RDR6的发育表型，可有效地筛选不含Cas9 T-DNA插入的纯合突变体。该研究为CRISPR/Cas9介导的农作物基因编辑技术的改良提供了新思路。

相关研究结果在线发表在《Science China Life Science》上。