吴睿智,李培培,邢江盼,王晓丹,宫新城
(河北农业大学中兽医学院,河北 保定 071001)
家兔夏季繁殖性能低下,被误认为是一种正常的生理习性,现在研究发现,造成这种情况的原因主要是夏季气温升高导致的公兔精液品质降低。使用激素类药物可以短时间内改善家兔性欲,但对于精子的产生、成熟效果不大。中药饲料添加剂无有害残留、耐药性小、毒副作用小等天然优点,利用中药饲料添加剂生态养兔具有较高的经济效益和发展前景。为改善夏季公兔繁殖能力低下的情况,试验选用滋阴助阳、健脾消暑的中药组成方剂“消暑促精散”,加入兔日粮中,研究其对公兔精液品质及睾丸、附睾的影响。
1.1 药品 五味子、菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子、党参、黄芩、淫羊藿、白术、广藿香,购自河北省万国药房,粉碎备用。
1.2 试验器材 细胞计数仪(alit001艾利特国际贸易有限公司)。兽用血细胞分析仪(KT6280,南京普朗医疗设备有限公司)。自制假阴道采精器。1 mL注射器、盖玻片、载玻片、擦镜纸等从保定试剂公司购买。
1.3 实验动物分组饲养 新西兰成年种公兔24只、母兔5只,体重约3.0 kg,购自河北农业大学兔场,全价饲料饲养5 d后,将公兔随机分为对照组和试验组,每组12只。试验组每天饲喂中药4.4 g/只,全价饲料正常饲喂;对照组及母兔饲喂全价饲料。
1.4 消暑促精散对公兔繁殖能力的影响 公兔每3 d采精1次,并观察记录爬跨情况、检测精液品质;试验第30天测量体温。试验35天剖杀所有公兔,取睾丸、附睾制备切片镜检。
2.1 气温记录 夏季气候炎热,试验时间为7月31日至9月3日。试期间最高气温为8月3日,34℃,每日最高温度平均为30℃。
2.2 公兔爬跨情况 夏季气温升高,公兔性欲下降,使用“消暑促精散”后,各组公兔每3 d观察并记录1次爬跨情况。如表1所示,试验组有爬跨行为的公兔数量明显升高,为(8.46±1.16)只/d,与对照组相比差异显著(P<0.05)。
2.3 公兔采精量情况 试验开始后,每3 d采精1次,并记录采精量。如表2所示,试验组公兔采精量为0.79±0.16 mL,与对照组相比差异显著(P<0.05)。
表1 消暑促精散对公兔爬跨行为的影响
表2 采精量变化
2.4 各组公兔精液品质情况 采精后,测定各组精子总数、精子密度、存活率和畸形率。如表3所示,试验组公兔精子总数升高为(1 858.31±461.25)个/20 uL,精子密度升高为(2.0581±0.42)107/mL,精子畸形率降为(29.12±0.0784)%,与对照组相比差异显著(P<0.05)。给药组精子存活率上升,为(27.78±0.0411)%,与对照组并无显著差异。
表3 公兔精液品质情况
2.5 各组公兔体温情况 在试验第30天测定两组公兔的体温情况,如表4所示,结果显示试验组公兔体温为(38.24±0.39)℃,与对照组无显著差异。由此可知,消暑促精散不会对公兔体温产生较大影响。
表4 公兔体温变化
2.6 公兔睾丸组织切片 睾丸是精子的生成部位。曲精小管内含有不同发育阶段的生精细胞和支持细胞等。给药组使用消暑促精散后,睾丸组织与对照组发生变化。如中插彩版图1所示,给药组睾丸纵隔结构清晰,曲细精管间质排列紧密,基膜与管壁完整,管腔中可见游离的精子。而对照组曲细精管管腔扩张,生精细胞分布较疏松,管腔内游离精子量少于给药组。
2.7 公兔附睾组织切片 睾丸生成的精子储存在附睾中,由附睾组织切片可见,给药组附睾管腔内胞质饱满,精子较多,偶见生精细胞。对照组附睾主细胞胞质疏松明显,胞内空泡化程度较大,附睾管腔内精子明显少于给药组。在40×物镜下观察,见中插彩版图2。利用ImageJ软件,计算得给药组储精面积为(40 464.78 ±362.49)μm,而对照组中储精面积为(4 627.07 ±413.29)μm,差异显著(P <0.05)。
研究表明,夏季高温会影响公兔的精液品质,使精液量减少,精子密度降低,精子畸形率增加[1],但是到目前为止,可以解决这一问题的中药饲料添加剂仍有待开发。为提高夏季公兔繁殖能力,本试验采用中药饲料添加剂“消暑促精散”,以补肾益精的古方“五子衍宗丸”(由五味子、菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子组成)为基础,添加党参、白术、淫羊藿、广藿香、黄芩,共计10味药材。其中党参可补气养血;白术健脾;淫羊藿可补肾阳,强筋骨;广藿香可芳香化湿,和中解暑;黄芩可清热燥湿,使用“消暑促精散”可对公兔夏季繁殖能力产生促进作用。试验结果显示,试验组公兔爬跨行为明显增强,采精量明显增高,公兔精液品质上升,公兔体温维持正常水平,睾丸生精能力增强,附睾储精面积增大,由此可见,中药饲料添加剂“消暑促精散”确实可以对公兔夏季繁殖能力产生促进作用。
研究“五子衍宗丸”对公兔夏季繁殖能力的试验[2]中,药物确实可以提高公兔繁殖能力,但给药的公兔体温普遍升高。而此次试验中,使用“消暑促精散”的公兔体温正常,且繁殖能力增强。公兔体温的维持可能与组方中含有的黄芩和广藿香有关,黄芩有清热燥湿的功效,黄芩苷可通过抵抗睾丸支持细胞热应激、调控睾丸支持细胞分泌产物水平,改善睾丸支持细胞功能,进而改善生精功能[3]。广藿香祛湿解暑,可有效抵抗夏季高温对公兔生殖发育的影响,有研究表明,广藿香通过增强血清超氧化物歧化酶活性,降低肌酸激酶活性,从而保护家兔免受热应激造成的氧化损伤,以抵抗夏季高温[4]。因此,“消暑促精散”中所含的黄芩、广藿香两味药,可有效消暑降温,此方剂可有效提高公兔夏季繁殖能力。
弓素梅[5]等研究表明,中药饲料添加剂可以实现动物性食品安全生产,提高养殖效率,对畜牧业发展有深远意义。“消暑促精散”在五味子、菟丝子、枸杞子、车前子、覆盆子补肾益精的基础上,加淫羊藿以助肾阳,加党参、白术健脾,以后天补益先天,加黄芩、广藿香防治夏季高温,可有效提高公兔夏季繁殖能力,并维持公兔正常体温。将“消暑促精散”在兔业养殖中推广,预计将有较好的经济效益和发展前景。