使用Cella Vision DI60系统估算血小板计数应用评价

黄继伟 黄婧芫 陈喻

【摘 要】目的：评价Cella Vision DI60系统在血小板计数方面的可靠性及准确性进行验证及评价。方法：对100例外周血涂片分别使用人工显微镜计数血小板、SysmexXN10血液分析仪计数血小板及Cella Vision DI60系统估算血小板计数。并对三种计数血小板的方法进相关性及统计分析。结果：Cella Vision DI60系统血小板估算计数结果与显微镜手工血小板计数的相关系数r2=0.998；Cella Vision DI60系统血小板估算计数结果与Sysmex XN10血液分析仪计数结果的相关系数r2=0.995，Cella Vision DI60系统血小板估算计数与Sysmex XN10仪器计数血小板和显微镜下手工血小板计数均有非常好的相关性。结论：使用Cella Vision DI60系统在外周血血小板计数有利于实现血小板计数的自动化与标准化，提高工作效率，具有较好的临床应用价值。

【关键词】 血小板计数； Cella Vision DI60系统；SysmexXN10；显微镜手工计数；实验室自动化

【中图分类号】R969.4 【文献标志码】A 【文章编号】1005-0019（2018）17-270-01

（前言）外周血细胞计数是实验室常规检查项目之一，其中血小板计数为术前检查、术后监测、血栓形成、器官移植等具有重要作用。随着血细胞分析仪技术的不断成熟，大部分患者的血小板计数可由血细胞分析仪进行，但显微镜镜检仍是金标准。对血常规异常或出现危急值时，尤其在病理条件下，必须进行人工显微镜下手工计数血小板。随着临床实验室临检复检规则的严格执行以及临床标本量的增加，以自动化仪器进行细胞形态分析是实验室自动化发展的必然趋势。Cella Vision DI60是模拟人工在显微镜下对外周血涂片进行镜检的阅片系统。本研究选取本院100例患者外周血标本，使用Cella Vision DI60估算血小板计数，Sysmex XN10血细胞分析仪血小板计数与显微镜下手工计数进行血小板计数结果进行比较，评价Cella Vision DI60系统在外周血血小板计数的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2016年12月到2017年2月，我院血常规标本100例（PLT<50×109/L50例，PLT50～200×109/L42例，PLT201～840×109/L18例），其中男性患者54名，女性患者46名，年龄为8至81岁，中位年龄为42岁。采集静脉血2mL，使用含乙二胺四乙酸二钾盐（EDTA-K2）抗凝剂的真空采血管，排除不合格标本（如采集量不足、肉眼观察可见凝块、溶血、脂血；显微镜下有血小板聚集的标本）的影响[1]。

1.2 仪器与试剂 OLYMPU光学显微镜CX-21；牛鲍计数板；草酸铵稀释液；微量吸管；SysmexXN10（B3）血细胞分析仪；Cella Vision DI60系统全自动阅片机；SysmexSP-10全自动制片机；Sysme原装玻片；SysmexXN10血液分析仪使用配套试剂及其质控液（日本Sysmex 公司） ；瑞氏‐吉姆萨染液（珠海贝索生物技术有限公司）；SysmexDCL稀释液及去离子水。

1.3 方法 工作前对Cella Vision DI60阅片机、SysmexXN10（B3）血液分析仪和SysmexSP-10自动制片机、Cella Vision DI60阅片机进行校准、调试及报警信息设置。将显微镜镜头擦拭干净，准备草酸铵稀释液、微量吸管、牛鲍计数板。并对上述100份外周血标本分别使用SysmexXN10血液分析仪自动计数血小板、由经板结果作为计数金标准）和使用SysmexSP-10自动推制片及染色（珠海贝索瑞氏-吉姆萨染液）并对制好的血片使用Cella Vision DI60系统估算血小板计数。

1.4 统计学处理 采用Microsoft office Excel 2007整理数据，采用回归方程对实验结果进行统计分析。分别对Cella Vision DI60系统估算血小板计数结果与人工显微镜计数血小板结果进行相关性分析、Cella Vision DI60系统估算血小板计数结果与SysmexXN10血细胞分析仪计数血小板结果进行相关性分析。

2 结果

2.1 Cella Vision DI60系统估算血小板计数结果与人工显微镜镜检的相关性y=0.980 X+2.727，r2=0.998 （见图1）

2.2 Cella Vision DI60系统估算血小板计数结果与SysmexXN10全自动血液分析仪计数结果的相关性y=0.978X+0.351，r2=0.995（见图2）

2.3 Cella Vision DI60系统血小板估算计数血小板与Sysmx XN10血液分析仪自动计数血小板、显微镜下手工血小板计数均有非常好的相关性。

3 讨论

血细胞数字图像分析技术从问世至今已有近50年的历史，尤其近十几年出现了突飞猛进的发展。在1966年，Prewitt等[]首先報道应用自动显微镜扫描系统进行血细胞形态分析。随后的几十年中，相关的研究和报道一直没有停止，但由于计算机软件和硬件水平受限以及自动化程度不高，该项技术并未常规用于临床试验中。直到Cella Vision DI60系统的出现，实现了血涂片上的自动化、单细胞层定位、细胞图像扫描与获取、细胞识别与预分类、报告自动生成等功能，并显著提高了检测速度和细胞图像质量[1]。针对DI60的多项研究均证实该仪器与血细胞分析仪XN1000与显微镜下手工计数血小板具有较好的相关性。从此全自动阅片机真正进入临床实验室，并广泛投入使用。

在检测过程中发现，使用DI60进行血小板计数，对推片、染色滴油的要求较高，尤其受染色质量影响较大。在计数中发现因染色不均导致计数方格的数量不准确，影响最终计算出的结果。因此，在实际工作中应尽量将仪器参数设置在最佳状态，以保证仪器的运行，实现检查过程中的自动化、标准化。[2]

Cella Vision DI60系统采用数字扫描拍摄将细胞形态显示在电脑屏幕上，与显微镜相比存在一定的视差，操作人员需要适应在电脑屏幕上观察细胞形态。对Cella Vision DI60外周血血小板计数效果评估表明，DI60能够准确地计算出血小板的数量，与SysmexXN10全自动血细胞分析仪计数血小板、显微镜下手工计数血小板具有较好的相关性。

此外，Cella Vision DI60系统的细胞图库（包括自带的参考细胞图库和日常工作中遇到的有借鉴价值的细胞图像）便与借鉴学习、回顾对比，有利于实验室人员鉴别细胞形态学能力的提高。虽然Cella Vision DI60不能完全替代人工，其结果必须经过人工审核才能出报告，但其自动化分析模式有助于降低操作人员的漏检或经验不足带来结果报告的差异。

Cella Vision DI60的优势在于：1.阅片效率高。据相关资料显示，Cella Vision DI60的阅片效率为每小时30-60张，人工计数为每小时5-8张，与人工显微镜下计数浏览全片相比节省大量时间。本实验室使用Cella Vision DI60以来，临检组形态学检验工作的效率明显提高。2.使形态学分析趋于标注化。细胞分类计数存在主观差异性，不同实验室、不同工作人员之间，都难以做到标准完全一致，仪器标准化分析过程可降低此类问题的发生。此外，Cella Vision DI60细胞图像保存在数据库中，便于同事、专家进行交流讨论，也可用于后期查询、教学培训等、。

综上所述，通过对Cella Vision DI60的系统评价，表明其具有操作简便、速度快、相关性好，不受主观因素影响等优点，其应用有利于缓解实验室工作人员紧缺，工作强度大的现状。因此，采用标准化工作辅助检查，可以用于外周血血小板镜检计数。

参考文献

[1] Clinical and Laboratory Standards Institute . Defining，establishing，and verifying reference intervals in the clinical laboratory；Approved Guideline-Third Edition.CLSI document C28-A3c.Wayne，PA：CLSI，2010.

[2] Bitencourt ED，Voegeli CF，Gabriela DS.Validation of the sysmex sp-1000i automated slide preparer-stainer in a clinical laboratory[J].Rev Bras Henatol Hemoter，2013，35（6）：404-408.

[3] Ceelie H，Dinkelaar RB，van Gelder W. Examination of peripharal blood films using automated microscopy；evaluation of Diffmaster Octavia and Cellavision DM96.J Clin Pathol 2007；60：72e9.

[4] Swolin B，Sinonsson P，Backman S，et al，Differential counting of blood leukocytes using automated microscopy and a decision support system based on artificial neural networkseevaluation of DiffMaster Octavia.Clin Lab Haematol 2003；25：139e47.

[5] 邢瑩.闫晓华全自动数字图像分析在外周血白细胞形态学复检中的临床应用[J].中华医学杂志。2016，96（8）：634-639.

[6] 邢莹，王建中，普程伟，等.ADVIAl20/2120及多种类血细胞分析仪复检规则的建立和评价[J].中华医学杂志，2010，90（22）：1526—1530.DOI：10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.22.006.

[7] 张黎，张葵.SysmexXE‐2100 全自动血细胞分析仪血小板聚集报警信息可靠性分析[J].临床输血与检验，2012，14（1）：60-61.

[8] 乐家新，丛玉隆，王海，等 .Sysmex XE‐2100 血细胞分析仪血涂片复检规则的应用研究[J] .现代检验医学杂志，2010，25（1） ：30‐36 .

[9] 宋蓓，张国军，李芬芬 .全自动数字细胞形态分析系统CellaVision TM DM96 在外周血白细胞分类的临床应用及评价[J] .检验医学与临床，2015，12（4）：481-483.

[10] 韩凝，郭树霞，胡成进 .试析 Sysmex‐2100 血细胞分析仪血小板检测正常其他参数不显示的原因[J/CD].中华临床医师杂志（电子版），2013，7（23）：11061-11062.

[11] 张黎，张葵 .SysmexXE‐2100 全自动血细胞分析仪血小板聚集报警信息可靠性分析 [J].临床输血与检验，2012，14（1）：60-61.

[12] 尚红，王毓三，申子瑜 .全国临床检验操作规程[M].4版 .北京 ：人民生学出版社，2014：14‐16.