二氧化氯消毒剂对医院常见感染菌的杀灭效果观察

陈志勇 宋金武 张丽蓉 黎英文 邓金花 广东环凯微生物科技有限公司 （广东 广州 510663）

内容提要： 目的：观察二氧化氯消毒剂对医院常见感染菌的杀灭效果。方法：采用悬液定量杀菌实验方法，观察二氧化氯对医院常见感染菌的杀灭效果。结果：二氧化氯浓度为50mg/L，作用1min，对表皮葡萄球菌、粪肠球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的杀灭率均为100%；二氧化氯浓度为50mg/L，作用3min，对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的杀灭率均为100%；二氧化氯浓度为150mg/L，作用1min，对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率为100%。结论：二氧化氯消毒剂在低浓度、短时间内即可杀灭医院常见感染菌。

二氧化氯是当前被世界卫生组织确认的一种高效、安全、广谱的强力杀菌剂，其可以杀灭一切微生物，包括细菌繁殖体、细菌芽孢、真菌、分枝杆菌和病毒等。二氧化氯对微生物细胞壁有较强的吸附穿透能力，可有效地氧化细胞内含巯基的酶，同时抑制微生物蛋白质的合成从而达到杀灭微生物的效果。

目前，二氧化氯消毒剂被广泛用于饮用水消毒及食品工业微生物控制[1,2]。随着应用范围的拓展，二氧化氯已逐步用于医院空气消毒及医疗器械消毒[3,4]。本课题组对二氧化氯消毒剂对医院常见感染菌的杀灭效果进行实验，现将结果报告如下。

1.材料与方法

1.1 一般材料

实验所用二氧化氯消毒剂由广东环凯微生物科技有限公司提供。

实验指示菌为金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、表皮葡萄球菌（CMCC 26069）、粪肠球菌（ATCC 29212）、乙型溶血性链球菌（ATCC 21059）、大肠埃希菌（ATCC 25922）、鲍曼不动杆菌（ATCC 19606）、肺炎克雷伯菌（CMCC 46117）、铜绿假单胞菌（ATCC 15442）、阴沟肠杆菌（CMCC 45301）、产气肠杆菌（ATCC 13048）、白色念珠菌（ATCC 10231）、枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC 9372），均由广东省微生物菌种保藏中心提供。

1.2 方法

1.2.1 二氧化氯浓度测定

二氧化氯消毒剂浓度测定采用《二氧化氯消毒剂卫生标准》（GB 26366-2010）附录A法。

1.2.2 菌悬液制备

实验所用菌悬液按照2002版《消毒技术规范》中规定进行制备。

1.2.3 中和剂鉴定

中和剂鉴定实验按照2002版《消毒技术规范》中规定进行操作。

1.2.4 悬液定量杀菌实验

按照《消毒技术规范》（2002版）中的悬液定量杀菌试验方法，取所需浓度的二氧化氯消毒液4.5mL置于无菌试管内，于20˚C水浴锅中恒温5min，加入0.5mL菌悬液，混匀并计时。作用至预定时间，取菌药混合物0.5～4.5mL中和剂试管内，混匀。中和作用10min，取1mL接种无菌平皿，倾注琼脂培养基并混匀。所有样本均在37˚C培养箱中培养，对细菌繁殖体培养48h，对细菌芽孢培养72h，观察结果。计数平板菌落数，计算杀灭率。试验重复3次。

2.结果

2.1 中和剂鉴定实验结果

实验结果表明，用含0.5%Na2S2O3+0.3%卵磷脂+1.0%吐温-80组成的磷酸盐缓冲液（PBS）作为中和剂，可有效中和二氧化氯最高实验浓度溶液对肺炎克雷伯菌和枯草杆菌黑色变种芽孢的残余作用，且中和剂和中和产物对实验菌及培养基均无影响，见表1。

表1.中和剂鉴定试验结果

2.2 悬液定量杀菌实验

二氧化氯消毒剂对医院常见感染菌的杀灭效果如下，见表2。

表2.二氧化氯消毒液对医院常见感染菌杀灭效果

由实验结果可知，二氧化氯对实验菌的杀灭率与作用浓度、作用时间成正比；二氧化氯浓度为50mg/L，作用1min，对表皮葡萄球菌、粪肠球菌、乙型溶血性链球菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的杀灭率均为100%；二氧化氯浓度为50mg/L，作用3min，对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的杀灭率均为100%。见表3。

表3.二氧化氯消毒液对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭效果

由实验结果可知，二氧化氯对枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭率与作用浓度、作用时间成正比；二氧化氯作用浓度为100mg/L时，其对枯草杆菌黑色变种芽孢作用3min杀灭率为99.9999%；二氧化氯作用浓度为150mg/L时，其对枯草杆菌黑色变种芽孢作用1min杀灭率为100%；二氧化氯作用浓度为200mg/L时，其对枯草杆菌黑色变种芽孢作用30s杀灭率为100%。

3.结论

医院感染的病原体主要是细菌，近年来，各个地区医院对院内感染细菌的分布情况均有统计，统计结果显示，在院内感染菌中革兰氏阴性菌占比较大，其次是革兰氏阳性菌，居前几位的感染菌主要是：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌[5,6]。在革兰氏阳性菌中，二氧化氯对金黄色葡萄球菌的杀灭效果较弱；在革兰氏阴性菌中，二氧化氯对铜绿假单胞菌的杀灭效果较弱；当二氧化氯浓度为50mg/L时，作用3min，对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及白色念珠菌的杀灭率为100%；当二氧化氯浓度为30mg/L时，作用30s，对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及鲍曼不动杆菌的杀灭率为100%。

《软氏内镜清洗消毒技术规范》（WS 504-2016）中对二氧化氯消毒剂的消毒浓度及消毒时间做出了说明，即消毒浓度为100～500mg/L，消毒时间为3～5min。本次实验结果显示，二氧化氯浓度为100mg/L时，对枯草杆菌黑色变种芽孢作用3min，杀灭率为99.9999%；二氧化氯浓度为200mg/L时，对枯草杆菌黑色变种芽孢作用30s，杀灭率为100%，在比规范说明中更低浓度及更短时间即可达到高水平消毒。