血小板减少及血液中微粒的临床检验分析

刘 娟

（辽宁省葫芦岛市中心医院检验科，辽宁 葫芦岛 125001）

血小板是血细胞中最小的成分。血小板在止血、凝血中发挥着极为重要的作用。从最近几年的研究中可发现，血栓形成期间，各种更小的细胞微粒发挥着非常重要的作用[1]。通过检测血小板各类微粒，有利于止血，同时还可预测、诊断血栓性疾病。本文研究分析血小板减少及血液中微粒临床检验情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选我院2016年2月至2017年2月接收的冠心病36例，急性脑梗死34例，慢性肾功能衰竭38例，化疗后急性白血病28例及健康体检者50例为研究对象。所有患者年龄为10～78岁，平均年龄为（50.3±12.5）岁。男78例，女58例。健康体检者年龄20～62岁，平均年龄为（45.6±10.2）岁。男30例，女20例。所有研究对象的基础性资料并无实质性差异，且所有患者相关疾病的诊断均符合临床判断标准。

1.2 方法：应用流式细胞仪检测所有研究对象的血小板微粒，并将3、0.8 mm作为参照标准。完成制作标本后，应用免疫荧光标记方法标记血小板为例，对照定位，检测FCM。依据一定数量的血浆计算PMPs的绝对值，并利用N表示。

1.3 统计学分析：研究活动中产生的所有数据均利用统计学SPSS19.0专用软件进行处理，计数资料利用χ2检验，计量资料以均数±标准差（±s）表示，分别采用卡方检验和t检验，以判断两组数据差异性，如P＜0.05表明差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 静息血小板释放的血小板微粒量比较：对比各组研究对象血小板微粒检测结果，健康组参数要显著低于其他各种，有统计学意义（P＜0.05）；但健康体检者与化疗后的急性白血病患者进行比较，两组检测的血小板微粒并不具有差异（P＞0.05），见表1。

2.2 活化血小板释放血小板微粒量：相对比不同状态下健康体检者的血小板微粒量，明显存在着较大的差异（P＜0.05），即静息血小板释放血小板微粒量为（1.3±5.5）×105mL血浆，活化血小板所释放的血小板微粒为（1.5±8.8）×105mL血浆。

表1 各类研究对象静息血小板释放的血小板微粒量

3 讨 论

研究表明，血液循环多由细胞颗粒提供[2]。如机体出现不同病症，那么各类微粒数量、相关抗原成分同样会发生改变。定量分析相关微粒，对止血原理、过程和血栓性疾病治疗均具有非常重要的意义。

临床检验血液细胞微粒，主要采取流式细胞术[3]。此次研究活动同样采取该种检验方法。微粒膜上的表达与来源细胞相同的表面比较分子。合理选择特异性标记分子单抗，可确定细胞来源。相对比来源细胞，微粒体积偏小。检测采取流式细胞术发射的散射光强度，可清晰反映出颗粒的大小，同时可利用荧光标记AnnexinV显示微粒外露的磷脂酰丝氨酸。而这些特点都能够为FCM检测血液中微粒提供条件，以便获得准确的检测结果。确认细胞表面标记分子，同时还可利用单克隆抗体制备来不断万神，以此提高FCM检测定量性，且还可定性分析血液中微粒[4]。如果血小板吸附于受损的血管壁中，或受到诱导剂、高切应力的作用初心活化反应的时候，就会通过出芽的方式显露囊泡，以此释放或撕裂，产生直径约为0.1～1.0 μm的血小板微粒。所暴露的磷脂表面在凝血催化活性作用下会产生促凝功能，而这就被视作为血管受损时止血时对止血过程产生影响。临床研究发现，多种血栓性疾病的形成和相关性并发症的产生，循环血小板微粒会显著增高。但是循环血小板微粒升高的具体原有至今仍不清楚[5]。其中有学者指出，PMP会引起相关微循环细胞应答，而这就会成为临床研究的热点。血小板微粒的体积非常小，如要观察其形态变化，那只能利用电子显微镜。但因含有较多的血小板膜糖蛋白，通常应用比较广泛的就是免疫学检测方法，如酶免疫、流式细胞术等多种方法。根据相应的单克隆抗体就能够识别出。

机体患有某种疾病，可通过检测微粒水平与性质的变化了解到。在现有的临床研究水平上，微粒生物学的应用价值主要体现在以下3点：首先，在研究疾病形成机制与病理结果方面，单核细胞、血小板、血管内皮细胞活化与损伤可提供参考信息[6]。细胞活化后就会产生微粒细胞，可直接反映出细胞功能状态，并揭示疾病的产生机制，可为临床病情诊断提供可靠根据。其次，判断临床治疗效率时，可将血液中微粒变化作为参考根据。最后，疾病诊断时可依据血液中微粒进行鉴别。即使血小板微粒在出血与血栓性疾病中有着非常重要的意义，但能够应用于血小板为例检测的方法并不是非常多。一般情况下就是利用流式细胞术与酶免疫分析方法。当前临床上的FCM检测血小板微粒主要采取PRP或全血法。利用此类方法可根据血小板为例来表示表达量。但如将此结果来比较试验之间的差异，会产生不利影响。由于血小板为例携带与血小板相同的膜糖蛋白，对排除血小板微粒的干扰具有一定难度[7]。在此次研究活动中，选我院2016年2月至2017年2月接收的冠心病36例，急性脑梗死34例，慢性肾功能衰竭38例，化疗后急性白血病28例及健康体检者50例为研究对象。应用流式细胞仪检测所有研究对象的血小板微粒，并将3、0.8 mm作为参照标准，比较不同组别的检测结果。对比各组研究对象血小板微粒检测结果，健康组参数要显著低于其他各种，有统计学意义（P＜0.05）；但健康体检者与化疗后的急性白血病患者进行比较，两组检测的血小板微粒并不具有差异（P＞0.05）；相对比不同状态下健康体检者的血小板微粒量，明显存在着较大的差异（P＜0.05）。即采取的是低速离心操作，预防后续标本处理期间产生血小板活化，减少人为因素对检测结果的影响。

综上所述，预测、诊断血栓性疾病中，血小板微粒具有非常重要的应用价值，同时还可活化血小板，可在临床中推广性检验应用。