董亚茹 赵东晓 陈传杰
摘要:以二月兰(Orychophragmus violaeeus)种子为材料,采用室内培养皿发芽方法,分别统计其在清水和0.5% NaCl中的萌发指标并测量幼苗生长指标,以研究60Co-γ射线对二月兰种子萌发及早期幼苗生长的影响。结果表明,在0~300 Gy剂量范围内,60Co-γ辐射提高了二月兰种子的发芽率,同时降低了种子的发芽势。在水处理条件下,60Co-γ辐射对二月兰幼苗株高、根长、鲜重都有不同程度的促进作用。在0.5%NaCl处理条件下,60Co-γ辐射对二月兰幼苗的株高和鲜重产生了一定的促进作用,对根长的生长则是低浓度促进高浓度抑制。
关键词:二月兰(Orychophragmus violaeeus);60Co-γ射线;种子萌发;生长指标
中图分类号:S681.9 文献标识码:A
文章编号:0439-8114(2018)15-0071-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.15.018 开放科学(资源服务)标识码(OSID):
Effects of 60Co-γ Radiation on Seeds Germination of Orychophragmus violaeeus
under NaCl Stress
DONG Ya-ru,ZHAO Dong-xiao,CHEN Chuan-jie,SUN Jing-shi,DU Jian-xun
(Sericulture Research Institute of Shandong Province,Yantai 264002,Shandong,China)
Abstract: The effects of 60Co-γ ray on the seed germination and early seedling growth of Orychophragmus violaeeus were studied using the method of indoor petri dish germination method,and the germination indexes in water and 0.5% NaCl were measured. The results showed that 60Co-γ radiation increased the germination rate of Orychophragmus violaeeus seeds,and decreased the germination potential of seeds in the dose range of 0~300 Gy. Under the condition of water treatment,60Co-γ radiation had different effects on the plant height,root length and fresh weight of Orychophragmus violaeeus seedlings. Under the condition of 0.5% NaCl treatment,60Co-γ radiation promoted the plant height and fresh weight of Orychophragmus violaeeus seedlings,but the growth of root length was promoted at low concentration 60Co-γ radiation and inhibted at high concentration 60Co-γ radiation.
Key words: Orychophragmus violaeeus; 60Co-γ ray; seed germination; growth index
二月蘭(Orychophragmus violaeeus)为十字花科诸葛菜属(Orychophragmus)植物,又名诸葛菜、菜籽花,为十字花科诸葛菜属一年或二年生草本。因农历二月前后开始开花,故称二月兰。作为一种优良的地被植物,二月兰同时又兼具观赏、油料、食用、饲料、生态、药用[1-3]等众多用途,具有较高的研究、开发和应用价值。此外,二月兰还具有广泛的适应性,具有耐寒[4],耐阴,耐土壤贫瘠等特点,在酸性和碱性土壤中均可生长。作为一种重要的具有潜在利用价值的种质资源,目前诸葛菜属植物已引起人们的广泛关注,并在资源收集与驯化栽培、杂交育种、组织培养、抗逆性及其相关基因的克隆等多方面得到了研究[5]。
辐射诱变育种是获得新种质资源和选育新品种的有效途径之一,中国自1957年开始辐射育种工作以来,辐射育种取得了重大成就[6]。在抗性研究方面,中国先后获得了耐盐的大豆、水稻、烟草、油菜、花生等突变体[7]。其中60Co-γ辐射是辐射诱变育种最常用的方法之一[8],60Co-γ辐射在提高植物的耐盐性方面也已有报道[9]。
为此,试验利用60Co-γ射线对二月兰种子进行辐射处理,对种子在清水和0.5% NaCl中的发芽指标和生长指标进行了研究,探明二月兰种子有效的辐射诱变剂量,旨在为今后进一步筛选耐盐型二月兰突变体提供参考,对今后培育耐盐新品种工作具有重要的理论和实践意义。
1 材料与方法
1.1 材料
供试种子为2016年采收的二月兰种子,种子净度≥98.0%。将二月兰种子装入自封袋内,在山东省农业科学院辐照中心进行60Co-γ射线辐射处理,共设7个辐射计量处理,分别为0、50、100、150、200、250、300 Gy。
1.2 方法
1.2.1 种子发芽指标测定 选取健壮、饱满、大小一致的二月兰辐射种子,用75%乙醇消毒3 min,去离子水冲洗5~6次。25 ℃下去离子水浸种24 h,将种子用无菌滤纸沥干水,备用。每个培养皿(直径90 mm)铺两层无菌滤纸,放置40粒种子,一组用去离子水进行萌发,另一组用0.5%的NaCl进行萌发。每个处理3次重复。每天观察种子萌发情况,并统计发芽数,突破种皮的胚轴长度为2 mm时视为种子发芽。各项发芽指标计算公式如下:
发芽率(GP)=n/N(n为第10天时的种子发芽数,N为供试种子总数);
发芽势(GE)=n3 /N(n3为第3天时的种子发芽数,N为供试种子总数)。
1.2.2 幼苗生长指标测定 14 d后,每个重复随机选取10株幼苗,测定幼苗株高、根长、鲜重。
1.3 数据处理
所有数据均用Excel统计并制图。应用SPSS 20.0统计分析软件对不同处理下的发芽率、发芽势、株高和根长等各项指标进行差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 60Co-γ辐射对二月兰种子萌发的影响
由表1可以看出,0~300 Gy剂量辐射范围内,无论是在水处理还是在0.5% NaCl处理条件下,随着辐照剂量的增加,60Co-γ辐照对二月兰种子的萌发率都呈现了一定的促进作用,但与对照相比差异不明显。水处理条件下,50和150 Gy时发芽率均达到最大值99.17%。盐处理条件下,发芽率最低值也达到91.67%。同样条件下60Co-γ辐射对二月兰种子发芽势则产生了抑制作用,水处理条件下,在200 Gy时二月兰种子发芽势为54.17%,比对照降低了10个百分点,与对照相比差异显著。盐处理条件下,除了50 Gy时发芽势与对照无显著差异,其他剂量辐照明显降低了种子发芽势,150 Gy时二月兰种子发芽势仅为39.17%,与对照相比差异显著。
2.2 60Co-γ辐射对二月兰幼苗生长指标的影响
分析图1至图3可以看出,水处理条件下,60Co-γ辐射对二月兰幼苗株高、根长、鲜重都有不同程度的促进作用。不同剂量60Co-γ辐射对二月兰幼苗株高的促进作用不明显,均与对照差异不显著。而不同剂量60Co-γ辐射对二月兰幼苗根长和鲜重影响较大,随着辐射剂量的增加,两者都呈现逐渐升高的趋势。在250和300 Gy两个辐射剂量下,二月兰幼苗株高和根长均达到最大值,与对照相比差异显著。
盐处理条件下,不同剂量60Co-γ辐射对二月兰幼苗株高、根长、鲜重产生了不同程度的影响。在0~300 Gy范围内,随辐射剂量的增加二月兰幼苗株高呈递增趋势,250 Gy时达到最大值,与对照差异显著。不同剂量辐射对二月兰幼苗根长的影响则呈现先增高后降低的趋势,在200 Gy时达到最大值,与对照相比差异显著。不同剂量60Co-γ辐射对二月兰幼苗鲜重有轻微促进作用,但效果不明显,不同处理下鲜重值与对照无明显差异。
3 小结与讨论
60Co-γ射线可对植物的生长发育产生一定的抑制或促进作用,不同辐射剂量对不同植物的影响不同[10]。有研究表明,低剂量的辐射处理对种子发芽具有促进作用,而高剂量的辐射抑制种子发芽且对种胚产生伤害[11-13]。本研究结果表明,在0~300 Gy剂量范围内,60Co-γ辐射能够提高种子发芽率,这与60Co-γ辐照对光果甘草和乌拉尔甘草种子萌发特性研究的结果相似[9,14]。提高发芽率的同时,辐射却降低了种子的发芽势,在盐处理下尤为明显。发芽势反映了种子的发芽速度和整齐度,可见辐射处理加剧了NaCl对种子的胁迫效应,延缓了种子的萌发速度。
根长和幼苗生长量被广泛用于植物对辐射敏感程度的度量,水处理条件下,随着辐射剂量的提高,二月兰幼苗生长量呈现递增的趋势,且对根系生长的影响大于地上部分的影响,熊秋芳等[15]的结果也表明,相对于子叶萝卜幼苗根系对辐照更为敏感。在盐胁迫下,不同剂量辐射对二月兰幼苗根长的影响则呈现先增高(0~200 Gy)后降低(250~300 Gy)的趋势,可见低浓度的辐射处理更有利于二月兰幼苗根系在NaCl胁迫环境下生长。
试验结果表明,在0~300 Gy的范围内,60Co-γ辐射对二月兰种子的萌发和幼苗生长具有一定的促进作用,水处理比盐处理表现得更为明显。
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