VEGF基因多态性与负性生活事件的相关性及对重度抑郁症易感性的影响

彭 玲陈 莹邹 莹

重度抑郁症（Major depressive disorder，MDD）是一种常见的精神科疾病，其临床特征主要有思维迟缓、情绪低落以及兴趣减退[1]。目前，其发病机制尚未研究清楚，临床研究[2-3]显示，神经营养因子的失调在抑郁症的病理生理学中起重要作用。MDD的神经营养假说说明压力降低了边缘脑结构中神经营养因子的水平，而抗抑郁药具有相反的作用，因此是MDD的病理生理和治疗的基础[4-5]。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是由内皮细胞产生的血管生成和促有丝分裂因子[6]，研究[5，7]显示VEGF有助于海马神经发生，对应激相关神经元损伤的神经具有保护作用。有研究[8]显示，电惊厥性发作增加了海马VEGF表达，海马中VEGF表达水平的增加对于发挥与抗抑郁药有关的作用相关。在MDD的发病过程中，环境因素与遗传因素均起重要作用，本研究探讨VEGF基因rs2010963位点基因多态性与负性生活事件相关性及对重度抑郁症易感性的影响，具体研究报道如下。

1 临床资料

选择2014年8月—2016年8月我院收治的重度抑郁症患者85例作为研究组，根据研究组患者的年龄、性别匹配招募85名健康人作为对照组。研究组中纳入标准：（1）年龄 20～65 岁；（2）所有重度抑郁症患者均由我院精神科两名具有丰富临床经验的精神科医生根据《精神障碍诊断和统计手册 (第五版)（DSM-IV）》[9]进行确诊。（3）患者的抑郁症严重程度由17项汉密尔顿评分抑郁量表（HAMD-17）[10]评估。HAMD-17总分在17分及以上。排除标准：（1）有药物引起的继发性抑郁障碍史；（2）有严重的暴力和自杀倾向；（3）木僵状态或者有严重的强迫症；（4）有酒精滥用史；（5）处于怀孕期或哺乳期的妇女。对照组的排除标准：（1）有家族性抑郁症发病史；（2）有精神类疾病史。本研究获得了我院医学伦理委员会的批准，所有受试者均签署了知情同意书。研究组与对照组的年龄、性别比例、教育背景等一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表 1。

表1 研究组与对照组一般资料比较[例（%）]

表2 VEGF基因rs2010963位点序列扩增引物信息

2 方法

2.1 VEGF基因rs2010963位点测序 取所有受试者外周血2mL，采用Qiagen公司（德国）生产的血液基因组抽提试剂盒（QIAamp DNA Blood Mini Kit，批号51140）抽提基因组DNA，设计引物（见表2），扩增VEGF基因rs2010963位点，将PCR扩增产物送上海桑尼生物科技有限公司测序，并对测序结果进行基因分型研究。

2.2负性生活事件评估采用生活事件量表[11]（Life event scale，LES）进行评价。该量表包含48条常见的生活事件，分为三个方面，第一个方面是家庭生活方面（28条目），第二个方面是工作学习方面（13条目），第三个方面是社交和其他（7条目），该量表由受试者根据自身实际情况独立自主答题。负性生活事件包括丧亲、离婚、发生严重疾病、住房和金融危机、失业、工作压力和与同事的关系问题等。正性和负性生活事件的得分由研究人员评定，算出总生活事件评分。生活事件的评估包括四个方面：发生时间（“无”=1；“一年以上”=2；“过去一年”=3；“慢性”=4），性格（“好”=1；“坏”=2），影响情绪（“无”=1；“轻度”=2；“中度”=3；“严重”=4；“极其严重”=5） 和影响持续的时间（“≤3 个月”=1；“3-6 个月”=2；“6-12 个月”=3；“＞12 个月”=4）。高、低水平负性生活事件的临界值规定为2分，2分及以上为高水平负性生活事件。

2.3 统计学方法 本研究数据的统计分析应用SPSS 20.0软件，首先进行χ2检验，以测试SNP基因型分布的Hardy-Weinberg平衡（HWE），计数资料的表示方法为[n（%）]，VEGF 基因 rs2010963 位点基因型以及等位基因在研究组与对照组的比较采用χ2检验，采用多重Logistic回归分析VEGF基因与环境的相互作用，P＜0.05表示差异有统计学意义。

3 结果

3.1 VEGF基因rs2010963位点各基因型和等位基因频率 研究组与对照组VEGF基因rs2010963位点各基因型分布符合哈迪-温柏格（Hardy-Weinberg）平衡（P＞0.05）。研究组与对照组VEGF基因rs2010963位点各基因型频率之间的差异有统计学意义（χ2=7.201，P=0.027），但是各等位基因频率之间的差异无统计学意义（χ2=0.963，P=0.327），见表3，rs2010963位点各基因型测序结果见图1。

表3 研究组与对照组VEGF基因rs2010963位点各基因型和等位基因频率比较[例（%）]

图1 VEGF基因rs2010963位点测序结果。A为CC基因型，B为CG基因型，C为GG基因型

3.2 VEGF基因多态性与负性生活事件的相关性VEGF基因rs2010963位点C等位基因携带者与较高的负性生活事件之间的相互作用显著，P=0.002，OR=4.832，95%CI=1.522～15.877，其它基因携带者与负性生活事件之间的相互作用见表4。

4 讨论

环境因素在重度抑郁症的发病过程中起着非常重要的作用，其中压力已经被证实是重度抑郁症的诱发因素之一，负性生活事件是压力的来源之一，包括常见的健康问题、人际交往问题、工作问题等相关方面[12-13]。临床研究[14]显示，MDD患者经历比健康人更为紧张的生活事件，表明负性生活事件与MDD相关。

表4 VEGF基因多态性与负性生活事件的相关性[例（%）]

研究[15]发现，VEGF基因的rs699947位点多态性与耐药性抑郁症显著相关，另外还有研究[16]发现，VEGFR2 1416T/A多态性与复发性抑郁障碍有关。本研究结果显示，重度抑郁症患者组与对照组VEGF基因rs2010963位点各基因型频率之间的差异有统计学意义（χ2=7.201，P=0.027），VEGF 基因 rs2010963位点C等位基因携带者与较高的负性生活事件之间明 显 相 关 （P=0.002，OR=4.832，95%CI=1.522 ～15.877）。这些结果表明，VEGF基因多态性与环境因素的相互作用增加了发展MDD的风险，与相关研究[17]结果一致。有研究[18]认为，遗传学不仅增加了MDD的易感性，而且还能够增加患者通过选择高风险环境来体验负性生活事件的可能性。本研果发现，携带C等位基因（CC+CG）的个体在暴露于高程度负性生活事件时患MDD风险最高。本研究的不足，首先是样本量较少，在统计基因型频率时可能存在较大的误差影响结果的客观性。另外，本研究中LES量表的使用是回顾性的，可能存在一定的主观偏差影响结果的客观性。