胃癌前疾病不同中医证型与HSP70、COX-2基因多态性的关系*

★ 严新 甘淳* 吴旭涛 赵化成 朱宏

(1.江西中医药大学第二附属医院 南昌 330012;2.江西中医药大学科技学院 南昌 330004)

基因多态性在阐述人体对疾病的易感性，解释疾病临床表现的多样性方面都发挥着巨大作用。近年来，基因多态性与肿瘤之间相互关系的研究日渐深入。有文献报道，HSP70、COX-2等的基因多态性能增加胃癌的患病风险，而对胃癌癌前疾病积极治疗可以很好的预防其癌变的发生[1-2]。胃癌癌前疾病运用中医药理论进行辩证施治，可以改善患者症状，效果良好。本研究以HSP70、COX-2基因作为研究对象，探讨在胃癌癌前疾病不同中医证型中它们的多态性分布变化，旨在发现其与中医证型的相关性。

1 资料与方法

1.1 诊断标准 参照中华医学会消化内镜学分会达成的《中国早期胃癌筛查及内镜诊治共识意见》中关于胃癌前疾病的分类，指胃的良性疾病，包括胃溃疡、慢性萎缩性胃炎、胃息肉、手术后残胃等。辨证分型参照中国中西医结合消化系统专业委员会制定的《慢性胃炎的中西医结合诊治方案》，分为以下三种类型，分别为肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证[3-4]。

1.2 入组与排除标准 入组标准: (1)年龄小于65岁的成年患者；(2)诊断为胃癌前疾病并且能进行准确的中医辩证分型；排除标准: (1)既往于1月内接受过质子泵抑制剂治疗者；(2)伴随其他系统严重疾病者；(3)已经确诊为胃癌并行相关手术者。

1.3 观察指标及方法

1.3.1 基本信息录入 包括患者一般身份信息，联系方式，入院记录需要包含的主诉及病史相关信息，消化内镜检查结果及病理报告，患者的辩证分型等。

1.3.2 静脉血采集 符合纳入标准的患者，抽取适量静脉血并按要求妥善保存，以备后续开展各基因组的DNA检测。

1.3.3 基因检测 运用等位基因专一性实时荧光PCR技术确定各基因多态性位点。相关实验操作委托第三方生物检测公司进行。

1.4 统计学方法 采用卡方检验，应用社会科学统计软件包(SPSS22.0版本)，以概率型非线性回归计算相对危险度及其95%可信区间，评价HSP70、COX-2各基因型与胃癌前疾病不同中医证型发病风险的关系，P<0.05有统计学差异。

2 结果

2.1 肝胃不和证、脾胃湿热证、脾胃虚弱证及对照组中HSP70-1:190G/C各基因型的分布情况 HSP70-1:190G/C的基因型共3种，分别为CC、CG和GG, 其中CC在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为0%，10.7%，12%和6.2%；CG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为50%，35.7%，48%和46.9%；GG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为50%，53.6%，40%和46.9%。以上三种基因型在各组之间的分布无明显统计学差异。将携带HSP70-1:190CC和携带HSP70-1:190CG型者合并后与携HSP70-1:190GG基因型比较，各组之间仍无明差别。

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2 肝胃不和证、脾胃湿热证、脾胃虚弱证及对照组中HSP70-2:1267A/G各基因型的分布数据 HSP70-2:1267A/G多态性位点基因型共3种，分别为GG、AG和AA, 但本实验仅检验出GG和AG两种。GG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为90%，60.7%，80%和87.5%；AG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为10%，39.3%，20%和12.5%。通过统计学数据分析,携带HSP70-2:1267AG基因型的肝胃不和证患者，较对照组有显著性差异(P=0.024,OR=5.824,95%CI: 1.123-30.202)。

表2 各组HSP70-2:1267A/G基因型分布比较 例(%)

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.3 肝胃不和证、脾胃湿热证、脾胃虚弱证及对照组中COX-2:899G/C各基因型的分布数据 COX-2:899G/C的基因型共两种，分别为CG和GG, CG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为20%，7.1%，32%和15.6%；GG在对照组，肝胃不和证，脾胃湿热证，脾胃虚弱证中的分布频率分别为80%，92.9%，68%和84.4%。COX-2:899CG与COX-2:899GG基因型在各组别间比较无明显差别。

表3 各组COX-2: -899G>C基因型分布比较 例(%)

组别COX-2:899 G/CCGGG对照组4(20)16(80)肝胃不和证2(7.1)26(92.9)脾胃虚弱证28(87.5)4(12.5)脾胃湿热证8(32)17(68)脾胃虚弱证5(15.6)27(84.4)

注：与对照组比较，*P<0.05。

3 讨论

HSP70是一类热应激蛋白，参与细胞周期的调节，凋亡以及脱氧核糖核酸损伤的修复，研究表明，HSP70在肿瘤中的表达量，与肿瘤的恶性程度呈正相关[5]。该蛋白的基因多态性与肿瘤的生成关系密切，王玉珍等[6]对159例肺癌患者和202名健康人群进行HSP70-1:+190(G/C)和HSP70-2+1267(A/G)的基因多态性检测，发现HSP70-1+190(G/C)位点多态性可能与河南汉族人群的肺癌易感性有关。M Ferrer等[7]对39名胃癌患者，79名健康人群，55名慢性胃炎及52名十二指肠溃疡患者进行了HSP70-202+1267 and HSP70-Hom02+2437的基因多态性研究，结果发现，相比GG基因型，HSP70-202+1267GA基因型患胃癌风险明显升高。Partida[8]的研究也得到了类似的结果。本次研究结果表明，在不同的胃癌前疾病中医证型中，HSP70-2:1267A/G位点基因多态性分布频率不同，HSP70-2:1267AG基因型在肝胃不和证组中的表达显著高于对照组，本次研究结果表明，胃癌前疾病肝胃不和证患者如携HSP70-2:1267AG型基因则转变成胃癌的几率可能增加。

COX-2为一类诱导性酶，在人体正常组织中极低表达或不表达，当机体出现炎症或发热等时可诱导其表达。研究表明，COX-2在胃癌组织中呈高表达，其表达高低与预后密切相关[9]。COX-2基因多态性与胃癌易感性紧密相关[10-11]。朱克详等[12]检测了甘肃河西地区健康人群和胃癌患者COX-2-899G>C, COX-2codon 587G>A的基因多态性，结果发现，COX-2 -899G>C的C等位基因与胃癌的患癌风险密切相关，而COX-2 codon 587G>A基因多态性与该地区胃癌的易感性无关。本次研究结果表明，COX-2:899G/C多态性位点有CG和GG两种基因型, 这两种基因型在健康人群和胃癌癌前疾病患者中分布无明显差异，各证型之前的分布频率也无明显差异。提示COX-2:899G/C多态性位点可能不是胃癌癌前疾病不同中医证型的分子基础。

根据文献报道，针对健康人群和胃癌患者的COX-2 -899G>C基因多态性研究发现，COX-2 -899G>C的C等位基因与胃癌的患癌风险密切相关，本文中COX-2-899G>C基因型在各组的分布无显著性差异，提示COX-2:899G/C多态性位点可能不是胃癌前疾病不同中医证型的分子基础。基因多态性受多方面因素影响，比如地域，种族等，查阅文献可以发现同一个基因同一个位点在同一个疾病上有阳性结果有阴性结果，所以，后续拟扩大样本量，同时增加对胃癌患者的研究，以排除地域等差异导致基因多态性的差异。

本研究结果提示胃癌前疾病不同中医证型的基因型分布频率不尽相同， 因受病例数及位点选择的局限，所得结果还需要进一步的大样本量，多基因多位点的研究证实。