仔猪伪狂犬病继发大肠杆菌病的诊断

2017年11月，垫江县某新建猪场的仔猪发生一种发病率高、死亡率高、以高热、神经症状为特征的疫病。笔者通过临床检查、病理剖检、实验室检验，确诊为猪伪狂犬病继发大肠杆菌病，现报告如下。

（一）疫病情况

此场原为一小学改造而成，分东西两栋圈舍，外有围墙相隔。于2017年11月8日从外县引入16头纯种约克母猪，1头纯长白公猪，30头50日龄左右荣昌仔母猪，132头两月龄内育肥仔猪；13日有14头仔猪出现减食、发热、后躯不能站立，到16日，数量增至78头，当时诊断为饲料中毒和水肿病，更换饲料并投与抗菌素、对症治疗，疫病得到一定控制。但至20日，病猪出现呼吸困难、颈部水肿、后躯不能站立，神经症状，部分倒地，呈划水状，死亡迅速。特别是原发病后看似正常者，一旦再发病，死亡很快。11月23日当天，全场就死亡仔猪32头，即报告至县动物卫生监督所，后经确切诊断，积极处理，至28日，有效地控制了病情，全场无新增病例，12月5日，停止死亡。

（二）临床症状

病猪主要表现精神沉郁，食欲不振、甚者绝食，呼吸加快，体温升高，一般在40℃～41℃。个别仔猪呕吐，多数拉乌青色稀粪。耳腹出现紫色斑块，眼睑水肿，颈部肿胀。多数仔猪在出现临床症状后不久即出现不同程度的神经症状，一些仔猪出现间歇性抽搐，唾液分泌增多，出现间歇性转圈运动，有的仔猪呆立不动，头触地或抵墙，共济失调；有的仔猪因后肢麻痹呈犬坐姿势，进一步发展为四肢麻痹，完全不能站立，侧卧，四肢呈游泳状划动。严重者呼吸困难，叫声嘶哑，口吐白沫，体温下降，持续性抽搐，很快死亡。

（三）剖检变化

对当天死亡的8头死亡仔猪进行对比剖检：

1.颈部皮下水肿，切口浸出淡黄色液体。

2.颌下淋巴结、呼吸道淋巴结、肠系膜淋巴结肿大、出血，切面呈大理石样变化。

3.心包积液，心包炎，严重者心脏与心包膜粘连，剥开心包膜，心脏表面呈现绒毛状，心肌出血。

4.喉头充血，肺水肿、瘀血

5.肝、脾稍肿大，表面散在有粟粒大灰白色坏死灶。

6.肾表面、皮质及髓质内可见针尖大小的出血点。

7.胃肠浆膜及肌层出现广泛性出血，胃肠粘膜脱落、出血，肠系膜有胶冻样纤维素性附着物。

8.脑膜及脑膜下出血，灰质部有小点状出血。

9.肠道内寄生大量蛔虫。

（四）实验室检验

1.取病死猪的肝、肺、脾、脑、肾等病料进行涂片、染色、镜检，可观察到呈球状、杆状、革兰氏阴性细菌。

2.无菌取病死猪心包液、肺、十二指肠粘膜、肠系膜淋巴结，接种于血琼脂培养基上，37℃培养，仔细观察。24 h左右出现一种呈β溶血的菌落。40 h左右出现一种不溶血小菌落。

3.将4.2分离到的溶血性菌落，接种于普通琼脂培养基中，37℃培养18～24 h，发现培养基上有呈圆形、整齐、隆起、湿润、光滑及灰白色的菌落生长，直径约2～3 mm。取此菌划线接种于麦康凯琼脂培养基中，37℃培养18～24 h，发现有红色菌落生长。

取此菌涂片、染色镜检，呈革兰氏阴性、中等大小杆菌。

生化鉴定：对培养所得的细菌进行葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖发酵试验。结果均能发酵上述糖类，并产酸产气。

4.取病死猪心血5份及前腔静脉采取病猪血液15份，离心制作血清，等检。

5.用伪狂犬病胶乳凝集试验试剂盒进行伪狂犬病检测。试剂盒由武汉科前动物生物制品有限公司生产，批号：170301。

（1）凝集反应强度标准：

+ + + + 全部胶乳凝集，颗粒聚于液滴边缘，液体完全透明。

+ + + 大部胶乳凝集，颗粒明显，液体稍浑浊。

+ + 约50%胶乳凝集，但颗粒较细，液体较浑浊。

+ 有少许凝集，液体呈浑浊。

- 液滴呈原有的均匀乳状。

出现“+ +”以上凝集判为阳性。

（2）阳性对照试验：将阳性血清进行2倍系列稀释，取1滴（20μl）与等量胶乳抗原进行胶乳凝集试验，结果胶乳抗原与1∶64稀释的阳性血清出现“+ +”凝集反应，与1∶32、1∶16稀释的阳性血清出现“+ + +”凝集反应，与1∶8以内稀释的阳性血清出现“+ + + +”凝集反应。

阴性对照试验：阴性血清加抗原，未发生凝集反应。

稀释液对照试验：抗原加稀释液混合后，未发生凝集反应。

（3）被检血清试验：取20份被检血清各一滴（20μl），阳性血清、阴性血清、稀释液各1滴（20μl），分别置于玻片上，各加等量胶乳抗原1滴，混匀，搅拌并摇动1～2 min，在3～5 min内观察，判定结果。

（4）20份检测血清试验结果如下：

反应强度 - + + + + + + + + + +待检血清数 2 1 10 5 2

从以上结果可以看出，呈阳性反应的待检血清数量为17份。占待检血清数量的85%。

通过以上疫病调查、临床检查、病理剖检、实验室检测，可以确诊：此批仔猪疫病是由猪伪狂犬病引起，并继发大肠杆菌病。

（五）防治

1.首先作好隔离。对出现症状的猪，全部隔离到东边圈舍。

2.全场使用碘伏、百毒杀、复合酚等进行彻底消毒，对入场口、入舍口设立消毒池，每日更换新鲜消毒液。

3.对健康猪采用猪伪狂犬弱毒疫苗进行紧急预防注射。疫苗由四川华神生物制品有限公司生产，批号：170808。

4.停止饲喂颗粒料。给予以玉米为主的粉料，加倍量添加多种维生素、阿莫西林粉或氟苯尼考原粉，减少料中蛋白质及微量金属含量，以降低应激，控制继发感染。避免饲喂发霉饲料、油巴、胡豆等不易消化性饲料。

5.对出现症状者，使用氨苄西林、卡那霉素、氟苯尼考、恩诺沙星等控制感染。

6.对症治疗。严重者，可使用5%葡萄糖生理盐水、CoA、ATP、VitC等进行腹腔注射，使用时注意将液体温度调节到正常体温。

7.加强护理。保持舍内温度，可使用红外线灯升温；饲料少量多次；注意保护极弱仔猪。

8.使用左旋咪唑或丙硫咪唑进行驱虫。

9.禁止饲养犬、猫，扑杀老鼠。

（六）讨论

1.仔猪伪狂犬病近来病例发生较多，又极易继发其他疾病。从本次疫情来看，尽早诊断、及时紧急防疫是控制本病最关键的措施。因此，一旦有疫情发生，尽早进行实验室鉴别诊断，以指导临床，扑灭疫病。

2.大肠杆菌病是临床上最常见的一种疾病，其本身可单独发生，也可因其它疾病引起继发感染。作好同型菌株的大肠杆菌防疫，是控制本病的关键。

3.仔猪的长途运输，是引起许多疫病的诱因。由于高致病性蓝耳病引起许多地方的猪发病而死亡，导致仔猪的长途调运，也让现在的疫病更加复杂、多变。