Bcl-2、P53联合P57、Ki-67表达在葡萄胎中的意义

刘景城

（福建卫生职业技术学院 福建 福州 350101）

葡萄胎是临床常见妊娠滋养细胞疾病，虽然属于良性病变，但具有生长活跃、潜在恶变的特点，相关资料显示，4%左右的部分性葡萄胎和20%左右的完全性葡萄胎可发展为侵蚀性葡萄胎或绒毛膜癌[1-2]。近年来有研究发现不同类型葡萄胎的Bcl-2表达程度不同，其过度表达可能与葡萄胎转化为侵蚀性葡萄胎密切相关[3]。本研究分析Bcl-2、P53、P57、Ki-67表达在葡萄胎中的意义，现报道如下。

表1 PM组、CM组及对照组中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表达情况

1.资料与方法

1.1 一般资料

收集2010年1月至2017年8月于福建中医药大学附属第二人民医院检查的部分性葡萄胎（PM）标本90例、完全性葡萄胎（CM）30例展开研究，同期抽取正常子宫绒毛组织的30例作为对照。所有标本均明确诊断，年龄24～43岁，平均（26.8±5.4）岁。

1.2 方法

对所有病例标本进行EliVisionTMplus免疫组织化学染色，染色步骤包括脱蜡、水化后使用苏木素浸染5min，自来水洗1min，1%盐酸酒精分化3s，再用自来水冲洗30～60min，0.5%伊红酒精染液浸染1min，完成后脱水、二甲苯透明、中性树胶和盖玻片封固。接着将载玻片贴上标签，常规石蜡3μm连续切片，将载玻片在60℃温度下烘烤30min，脱蜡、水化组织切片，并高压抗原修复、阻断内源性过氧化物酶活性、滴加一抗、试剂，最后在DAB溶液下进行显色处理，对组织中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表达进行检测。一抗为鼠抗人单克隆抗体Bcl-2、P53、P57、Ki-67，试剂盒选用EliVisionTMplus试剂盒。

1.3 结果判断

根据Beesle法分为四级：（+++）为强阳性，阳性细胞数＞50%；（++）为中度阳性，阳性细胞数为25%～50%；（+）为弱阳性，阳性细胞数＜25%；（-）为阴性，无明显阳性细胞。各蛋白阳性判断标准：Bcl-2、P53、P57、Ki-67均通过综合积分法进行阳性判断，以着色强度计分与阳性细胞百分比计分相加的总评分评价，≤2分为（-），3分为（+），4分为（++），5～6分为（+++），7分为（++++）。

1.4 统计学方法

采用SPSS20.0软件分析，经χ2检验计数资料，以率表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 不同类型子宫葡萄胎中各蛋白表达情况

PM组和对照组中，P53、Bcl-2、Ki-67呈低表达，P57呈高表达；而在CM组中，P53、Bcl-2、Ki-67表达增强，P57表达不明显。四种抗体在CM组与PM组及对照组之间存在显著差异（P＜0.05）；而PM组与对照组之间则无明显差异（P＞0.05），见表1。

2.2 年龄与各蛋白表达的关系

120 例患者中年龄＞40岁有27例，＜40岁有93例。结果可见年龄＞40岁Bcl-2表达阳性率明显高于年龄≤40岁患者，而其他蛋白表达与年龄无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 年龄与个蛋白表达的关系

3.讨论

目前常规HE染色组织病理学依然是大多医院诊断葡萄胎的主要方法，虽然该方法诊断鉴别葡萄胎有重要作用，不过随着影像学发展、葡萄胎早期发现，为形态学诊断、鉴别带来了难度，加之医师经验、水平差异影响，葡萄胎病理诊断可重复性差，因此如何对早期滋养层细胞增生疾病准确诊断、鉴别十分关键[4]。

Ki-67是一种重要抗体，主要代表细胞繁殖指数，在增生的滋养细胞中表达，以细胞核为阳性表达部位，本研究发现Ki-67在CM中存在较高的表达率，而在PM及正常子宫绒毛组织中呈低表达，说明该抗体对部分性、完全性葡萄胎有重要的鉴别诊断价值。P57是一种细胞周期抑制因子，位于母方11号染色体上，由于CM不含母方染色体，故其无P57有丝分裂抑制因子，本研究中P57在PM中呈阳性表达，在CM中则呈现低表达或未表达。P53是一种抑癌基因，其可发生突变，进而导致抑癌基因缺失，引发癌变；Bcl-2基因使原癌基因，其能够抑制细胞凋亡。本研究中发现该两种基因在PM及正常绒毛组织中呈低表达，在CM中呈高表达，由此可见其表达可为治疗提供准确指导。P53、P57、Ki-67表达早已被证实在葡萄胎中具有较高的鉴别诊断价值，而本研究发现Bcl-2在不同类型子宫葡萄胎中表达程度也不同。Bcl-2蛋白具有延长细胞寿命的生物学功能，还能够使细胞对各种凋亡刺激因素抵抗力提高，延迟、阻止多种因素引起的细胞凋亡，Bcl-2表达阳性率高的细胞寿命长，细胞凋亡的进程也更为缓慢，进而可造成细胞堆积，增加肿瘤发生率。在本研究中可以看出，Bcl-2蛋白在正常子宫绒毛组织中仅30.0%的阳性率，而在部分性葡萄胎中阳性率为72.0%，在完全性葡萄胎中阳性率为86.7%，该蛋白在部分和完全性葡萄胎中表达阳性率显著高于正常者，由此可见Bcl-2可作为鉴别滋养细胞肿瘤的有效指标。同时研究发现，在部分性葡萄胎中Bcl-2主要呈现阳性低表达（38.7%），而在完全性葡萄胎中主要呈现高表达（53.3%），说明该蛋白表达可反映出葡萄胎严重程度，对于预后有一定预测意义。此外，在本研究中比较年龄与各蛋白表达情况发现，年龄＞40岁Bcl-2表达阳性率明显高于年龄≤40岁患者，而其他蛋白表达与年龄无统计学意义，说明年龄与Bcl-2呈正相关，即年龄越大Bcl-2表达阳性率越高，综合上述来看，进一步说明年龄＞40岁患者预后效果可能相对于年龄≤40岁患者更差。

综合上述，Bcl-2、P53联合P57、Ki-67表达在葡萄胎鉴别诊断中发挥了重要作用，具有较高的鉴别诊断意义。