食管癌细胞株ECA109及KYSE150中NFκB与VEGF信号通路研究与分析

安尼瓦尔·买买提 陈海林 依布拉音江·依布拉音

（喀什地区第一人民医院胸外科 新疆 喀什 844000）

前言

食管癌（esophageal carcinoma）是一种发病率较高的恶性肿瘤，其发生率在多发肿瘤中位居第八位，死亡率为第五位，我国是食管癌发生率最高的国家之一。此前针对该疾病的预防治理效果不佳，研究指出对食管癌的发生、发展进行分析，了解其细胞株信号通路，对于化疗等工作有一定的优化作用。我院针对上述内容进行了分析调查，所获结果如下：

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2017年1月-2017年12月收治的100例食管癌患者作为对象，收集术后癌组织及癌旁组织共50对标本进行研究。100例患者中，男性患者58例，女性患者42例，年龄45～66岁，平均年龄57.1±2.2岁，早期食管癌患者17例，中期食管癌患者29例，晚期食管癌患者54例。以样本为基础培育的细胞株分为两组，即转染NFκB s h RNA载体组、转染NFκB过表达载体组，每组25对样本，培育方式和时间相同。

1.2 纳入和排除标准

（1）所有标本均来源于食管癌患者。（2）排除患有重大疾病的患者。

1.3 方法

收集患者术后癌组织及癌旁组织共50对标本，提取mRNA及蛋白，了解NFκB、VEGF、VEGR1在转录及蛋白水平的变化情况。构建NFκB过表达质粒载体，在食管癌细胞株ECA109及KYSE150中，转染NFκB过表达质粒载体，设立对照组，通过质粒转染，转染48小时后，提取mRNA及蛋白，了解NFκB、VEGF及VEFGR1在转录及蛋白水平的表达较对照组的表达变化差异；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡，了解对细胞生物学功能的影响。明确NFκB的表达增高，可否伴随着VEGF及VEGFR1的表达增高，初步确定以上因子的相互关系。重复构建过程，明确NFκB的表达降低，可否伴随着VEGF及VEGFR1的表达减少。

1.4 观察指标

本次调查主要观察食管癌细胞株ECA109及KYSE150中NFκB与VEGF信号通路，收集细胞周期及细胞凋亡数据，对NFκB可否伴随着VEGF及VEGFR1的表达变化出现变化，并了解这种变化的规律性。

2.结果

2.1 NFκB、VEGF及VEFGR1的变化情况

通过实验发现，在转染48小时后，NFκB、VEGF及VEFGR1在转录及蛋白水平的表达方面，较对照组表达变化差异不显著，组间差异无统计学意义（P＞0.05），随着抑制剂浓度的增高，NFκB及VEGF的表达逐渐降低，对空白对照组差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 细胞周期及细胞凋亡

通过实验发现，转染48小时后，细胞周期与凋亡情况出现变化，转染NFκB s h RNA载体组、转染NFκB过表达载体组组间差异不显著，差异无统计学意义（P＞0.05），与空白对照组相比差异显著，且具有统计学意义（P＜0.05）。数据信息如表1所示。

表1 细胞周期及细胞凋亡

2.3 NFκB与VEGF信号通路

对NFκB与VEGF的信号通路进行分析，发现当VEGF及VEGFR1的表达出现变化时。NFκB的表达会同步出现变化，这种变化带有典型的规律性，NFκB的表达增高，VEGF及VEGFR1的表达同步增高，NFκB的表达降低，VEGF及VEGFR1的表达同步降低，这表明了三个因素之间的相关性，即NFκB为调控VEGF表达的上游基因[1]。

3.讨论

食管癌是一种发生率较高的恶性肿瘤，我国食管癌患者数占据世界食管癌患者总数的二分之一左右。新疆喀什地区民众受到生活习惯、食物类型的影响，罹患食管癌的几率较其他地区民众更高。大部分患者确诊时已经进入癌症晚期，手术治疗后存活不超过5年。本次研究将重点放在血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长因子受体1（VEGFR1）与转录因子蛋白（NFκB）的信号通路方面。结果上看，VEGF会减少金属蛋白酶抑制剂的释放，并通过分泌（包括自分泌和旁分泌）与血管内皮细胞生长因子受体1（VEGFR1）结合，实现下游信号通路的激活，进一步参与肿瘤的形成、迁移[2]。在此过程中转录因子蛋白会出现与之带有相同规律的变化，是调控VEGF表达的上游基因，通过了解NFκB的变化，可以分析癌细胞的态势和扩散情况。

综上所述，食管癌细胞株ECA109及KYSE150中，NFκB可参与VEGF的表达调控，NFκB为调控VEGF表达的上游基因。