重症肺炎患者肺泡灌洗液NGAL的临床意义

唐玮欣，陈丽芳，陈兰春，李展汉，丘自挺，余雪涛

(深圳市龙岗区人民医院，广东 深圳 518172)

肺炎是临床上常见的感染性疾病，尤其重症肺炎是导致重症医学科(Intensive Care Unit,ICU)患者死亡的重要原因之一[1]。然而对重症肺炎早期病情的评价仍无可靠的指标供临床参考。中性粒细胞明胶酶载脂蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL)在细菌性感染疾病中高表达，其敏感性和特异性分别为84.67%和95.00%，比一般临床检测的炎性指标有更高的敏感性和特异性[2]。然而，重症肺炎患者血清NGAL、肺泡灌洗液NGAL水平与重症肺炎严重程度及预后的关系尚未定论。因此，本研究通过检测肺泡灌洗液NGAL浓度，来探讨其临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2015年10月～2016年10月入住广东省深圳市龙岗区人民医院ICU并行肺泡灌洗的患者。重症肺炎诊断标准：参考美国胸科协会(ATS)相关重症肺炎诊断标准[1]。主要标准：① 需要创伤性机械通气；② 需要应用升压药物的脓毒症性休克。次要标准：①呼吸频率>30 次/min；② 氧合指数( PaO2/FiO2)<250；③ 多肺叶受累；④意识障碍；⑤ 氮质血症(BUN≥7 mmol/L)；⑥白细胞减少症(WBC计数<4×109/L)；⑦血小板减少症(血小板计数<100×109/L)；⑧体温降低(中心体温<36℃)；⑨低血压需要液体复苏。符合1项主要标准，或至少3项次要标准可诊断。排除标准：患有癌症、其他部位严重感染、急性肾损伤、严重肝肾功能不全、呼吸系统结核、肺纤维化以及慢性感染。对照组纳入标准：①各种原因导致的机械通气时间>24 h；②肺部感染达不到重症肺炎诊断标准；③支气管肺泡灌洗检查中所分离到病原菌数<104cfu/ml。入选50例患者，平均年龄(61.32±7.75)岁，男31例，女19例。将50例患者分为重症肺炎组29例，男20例，女9例，年龄(61.62±7.04)岁；非重症肺炎组21例，男11例，女10例，年龄(60.9±8.79)岁，颅脑外伤4例，脑出血7例，急性心肌梗死4例，慢性支气管炎急性发作3例，大手术后3例。两组年龄、性别构成比比较，差异无统计学意义(t=0.32，P=0.75；t=1.42，P=0.23)。试验前告知患者或授权委托人并签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1资料收集：采集患者的一般资料，机械通气常规检测血常规、血浆超敏C-反应蛋白、血清PCT、肝肾功能、胸片、血培养等，并记录结果。进行APACHE-Ⅱ评分。设自动出院或死亡者为恶化。

1.2.2血清样本采集：肺泡灌洗之前0.5 h采集外周静脉血，以2 500 r/min离心10 min，留血清2 ml，-70℃保存待测。

1.2.3肺泡灌洗液(BALF)样本采集：根据中华医学会呼吸病分会2002年颁布的《支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范(草案)》[3]，实施纤维支气管镜肺泡灌洗术。采集的肺泡灌洗液，以2 500 r/min离心10 min，留上清液2 ml，-70℃保存待测。

1.2.4NGAL测定：应用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定BALF中NGAL浓度。操作严格按照试剂盒说明进行。检测NGAL试剂盒购自美国R&D公司。酶标仪为Bio-Tek EL×800酶标仪。

2 结果

2.1两组患者各项检测指标比较：见表1。

表1两组各项检测指标比较

组别例数APACHE-Ⅱ评分(x±s,分)bNGAL(x±s,μg/L)sNGAL(x±s,μg/L)血浆超敏C-反应蛋白(x±s,mg/L)血清PCT(x±s,ng/ml)好转[例(%)]A组2918.17±5.7642.05±14.4532.37±9.86102.9±81.588.822±12.2019(65.52)B组2113.67±5.3328.15±17.3822.63±12.7259.72±63.340.863±1.5919(90.48)t/χ2值2.813.083.052.022.964.16P值0.007 10.003 40.003 70.0490.004 70.041

2.2两组患者血清NGAL、肺泡灌洗液NGAL水平与APACHE-Ⅱ评分的相关性分析：使用Pearson相关性分析，提示重症肺炎患者的血清NGAL、肺泡灌洗液NGAL水平与APACHE-Ⅱ评分均呈现相关性，且差异均有统计学意义(r=0.556，P<0.001；r=0.348，P=0.013)。

2.3重症肺炎组中，病情转归恶化与好转患者的肺泡灌洗液NGAL (bNGAL)、血清NGAL(sNGAL)比较：病情恶化进展患者的肺泡灌洗液NGAL、血清NGAL水平均明显偏高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

指标好转恶化t值P值bNGAL34.65±14.3747.1±13.912.240.033 4sNGAL23.74±10.8335.3±9.462.850.008 3

3 讨论

肺部感染是常见疾病之一，一旦进展成重症肺炎，入住ICU率及临床救治难度会大大提高，病死率可达50%以上[4]。然而，对重症肺炎的识别与病情评估仍缺乏简单、准确的指标。APACHE-Ⅱ评分是目前广泛应用的评估急危重症预后的重要方法[5]，但APACHE-Ⅱ评分系统较复杂，项目繁多，充分评估所需要的时间较长，使得该评分在实际临床应用中受到一定的限制。NGAL，也被称为脂蛋白2(LCN2)或siderochalin，他的小鼠同源蛋白为24p3。研究证实NGAL参与多种病理生理过程，在慢性阻塞性肺疾病、哮喘等患者的痰液、血浆及支气管肺泡灌洗液中均发现NGAL明显高表达。重症肺炎组患者血清NGAL及肺泡灌洗液NGAL水平越高，患者病情越严重。提示血清NGAL及肺泡灌洗液NGAL水平可能用来评估重症肺炎患者病情的严重程度和预后。这或与本课题组前期研究结果相符：前期研究表明，危重患者血浆中NGAL浓度较健康人明显升高，严重感染患者血浆NGAL水平比非感染患者明显增高，其水平与预后有相关性。

脓毒症早期，感染部位聚集大量中性粒细胞，通过吞噬病原菌、脱颗粒释放各种蛋白酶(包括NGAL)等物质来达到杀菌的作用。本研究结果显示：重症肺炎组患者血清NGAL及肺泡灌洗液NGAL水平均显著高于非重症肺炎组，提示在重症肺炎患者肺组织中有中性粒细胞大量活化、脱颗粒释放NGAL等蛋白酶，NGAL在炎性反应过程中扮演重要角色。

本研究也存在不足之处，如病例数相对较少、未根据病情演变趋势进行bNGAL的动态监测，可在相关课题的后续研究中进一步改进。

综上所述，在重症肺炎患者中，血清NGAL及肺泡灌洗液NGAL水平具有正相关关系，并可能与病情严重性相关，可能作为判断重症肺炎患者病情严重程度及预后的辅助生化指标之一，但这需要进一步的研究证实。