冰红消肿膏质量标准研究

王明希　郭勇　张许萌

[摘要] 目的 建立冰红消肿膏的质量标准。 方法 为保证冰红消肿膏的质量，本文对膏方进行了常规检查，从定性方面进行了质量标准研究。采用显微的方法鉴别了方中红花，采用薄层色谱法鉴别冰红消肿膏处方中大黄、栀子、白芷等药材。并同时进行了微生物以及重金属检查。 结果 红花的显微鉴别，操作方便，指向性好。大黄、栀子、白芷的薄层色谱斑点清晰，分离度好，阴性无干扰。微生物以及重金属检查均符合药典标准。 结论 该实验方法操作简便，重现性好，结果准确可靠，可用于控制冰红消肿膏的质量。

[关键词] 薄层色谱法；红花；大黄；栀子；白芷

[中图分类号] R285.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2018）12-0039-03

Study on the quality standard of binghongxiaozhong ointment

WANG Mingxi1 GUO Yong2 ZHANG Xumeng1 XING Jiazhen1

1.Department of Pharmacy， Beijing Daxing District Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Beijing 100076， China； 2.Department of Orthopedics and Traumatology， Beijing Daxing District Hospital of Integrated Chinese and Western Medicine， Beijing 100076， China

[Abstract] Objective To establish the quality standard of binghongxiaozhong ointment. Methods To guarantee the quality of binghongxiaozhong ointment， routine tests were performed to evaluate the regimens of ointment and the study on quality standard were conducted by using qualitative methods. Micrography were conducted to distinguish the safflower in the regimen and thin layer chromatography（TLC） were conducted to distinguish the rheum officinale， cape jasmine and radix angelicae in the regimen of binghongxiaozhong ointment. The tests of microorganisms and heavy metal were taken as well. Results Micrography of safflower was easily operated and with good directivity. TLC of rheum officinale， cape jasmine and radix angelicae was spot-clear， with good separation and without interference of the negative. The results of microorganisms and heavy metal tests met the standard of pharmacopoeia. Conclusion The experimental method was easy-operated， reproducible and with accurate and reliable results.It could be used to control the quality of binghongxiaozhong ointment.

[Key words] Thin layer chromatography； Safflower； Rheum officinale； Cape jasmine； Radix angelicae

冰紅消肿膏是我院骨伤科经验方[1]，由红花、大黄、栀子、白芷、当归、透骨草、威灵仙、儿茶、薄荷、冰片等10味中药组成的外用膏剂。组方中红花，活血化瘀，通经。大黄，凉血解毒，活血祛瘀。白芷，消肿排脓，止痛。当归，活血止痛。威灵仙，通经络，止痹痛。铁线透骨草，舒筋活络，祛风胜湿，活血止痛，软坚消痞。栀子，泻火除烦、凉血解毒。白芷，消肿排脓、止痛。儿茶止血定痛，收湿敛疮。薄荷辛，凉。冰片开窍醒神，清热止痛，诸药共奏祛风除湿、舒筋活血、活血止痛的功效。为了有效的控制该制剂的质量，保证临床用药安全有效[2-4]，本次实验建立了方中红花的显微鉴别，大黄、栀子、白芷等药材的薄层色谱法（Thin layer chromatography，TLC）鉴别，并同时进行了微生物以及重金属检查，从而提高冰红消肿膏膏的质控水平。

1 资料与方法

1.1 仪器与材料

1.1.1 仪器 KQ500DB超声仪，昆山市超声仪器有限公司；CZY-6S手持黏力测试仪。

1.1.2 材料 实验用对照品大黄酚（批号110796-200310）、栀子苷（批号749-8902），均来自于中国药品生物制品检定所。白芷（批号120945-201309）来自于中国食品药品检定研究院。实验用样品冰红消肿巴布膏由北京市卫生局临床药学研究所制剂室提供。实验用乙醚、石油醚、甲酸乙酯、乙酸乙酯、甲酸等均为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 红花的显微鉴别 取冰红消肿巴布膏本品2片，除去药品盖衬，加乙醚40 mL，振摇溶解，去除背衬，静置片刻，留取下层残渣，弃去上清液；残渣剩余残渣再加乙醚10 mL，振摇，静置片刻，弃去上清液，重复3次，残渣挥干乙醚。取残渣涂片，再置显微镜下观察。

1.2.2 大黄的薄层鉴别 取冰红消肿巴布膏本品5片，除去盖衬，剪碎，加乙醚50 mL，搅拌，超声处理15 min，放置片刻，吸取上清液，挥干乙醚溶剂，加乙醇1 mL使充分溶解，作为供试品溶液。另取大黄酚对照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品和对照品两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上。展开剂为以石油醚（30℃～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂。展开，取出，晾干，置于紫外光灯（365 nm）下检视。

1.2.3 栀子的薄层鉴别 取冰红消肿巴布膏本品8片，除去盖衬，加乙醚溶剂40 mL，振摇溶解，去除药品背衬，静置片刻，弃去上清液，剩余残渣再加乙醚10 mL，震荡摇匀振摇，静置片刻，弃去上清液，重复3次，剩余残渣加乙醇溶剂20 mL，加热回流1 h，将残渣滤过，留取滤液蒸干，滤液蒸干残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取栀子苷对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各3～5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上。展开剂为以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20∶3∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干。将10%硫酸乙醇溶液，少量均匀喷于晾干的硅胶板上，于在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365 nm）下检视。

1.2.4 白芷的薄层鉴别 取冰红消肿巴布膏本品5片，除去盖衬，剪碎，加丙酮溶剂50 mL，超声处理15 min，放置片刻，取上清液，挥干丙酮，剩余样品残渣加溶剂乙醇1 mL，震荡溶解，作为供试品溶液。另取白芷对照药材0.5 g，加溶剂乙醚10 mL，浸泡1 h，时时振摇，滤过，取上清滤液挥干，残渣加乙醇溶剂l mL，震荡溶解，作为对照药材溶液。吸取上述两种溶液供试品和对照品试液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上。选用以石油醚（30℃～60℃）-乙醚（3∶2）为展开剂，在于25℃以下展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。

1.2.5 微生物限度检查 应符合贴膏剂下有关的各项规定（中国药典2015年版四部通则0122），微生物限度 取本品10 g，加至无菌三角瓶中，加入20 mL十四烷酸异丙酯，边加边振摇并移至500 mL无菌盐水瓶中，再加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100 mL，充分振摇，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为1∶10的供试液。需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数，分别取1∶10的供试液1 mL，注入平皿中，依法检查（中国药典2015年 版四部1005）。金黄色葡萄球菌检查，取1∶10的供试液10 mL，置100 mL胰酪大豆胨液体培养基中，依法检查（中国药典2015年版四部1106）。铜绿假单胞菌检查，取1∶10的供试液10 mL，置100 mL胰酪大豆胨液体培养基中，依法检查（中国药典2015年版四部1106）。

1 g供试品中，需氧菌总数不得过103 cfu，霉菌和酵母菌总数不得过102 cfu，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。

1.2.6 重金属检查 本品1 g，置坩埚中，缓缓加热至完全碳化，放冷，加硫酸1 mL，低温加热至硫酸蒸气除尽后，加硝酸0.5 mL，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，在500℃～600℃炽灼使完全灰化，依法檢查（照中国药典2015版四部通则0821重金属检查法第二法），对三批样品进行测定。

砷盐的检查：运用中国药典2015版四部通则0822砷盐检查法第一法古蔡氏法制备3批样本。标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2 mL，置A瓶中，加盐酸5 mL与水21 mL，再加碘化钾试液5 mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10 min后，加锌粒2 g，于专用装置上显现斑点。取出溴化汞试纸，即得。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。

1.2.7 含膏量、黏附力检查 取冰红消肿膏，用乙醚作溶剂，依法（中国药典2015版四部通则0122第一法）检查，每100 cm2含膏量不得少于5.5 g。取冰红消肿膏（剪成40 mm×50 mm）3片，作为供试品。照贴膏剂黏附力测定法（中国药典2015版四部通则0952第二法）测定，将供试品固定于试验板表面，沿供试品长度方向加载1000 g砝码，记录脱落时间，即得。本品平均脱落时间应不少于24 h。

2 结果

2.1 红花的显微鉴别

显微镜下观察：花粉粒黄色或橙黄色，外壁有较密的刺状突起，并具三个萌发孔（红花）。见封三图1。

2.2 大黄的薄层鉴别

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，可以看到显相同的橙黄色荧光斑点。见封三图2。

2.3 栀子的薄层鉴别

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。见封三图3。

2.4 白芷的薄层鉴别

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见封三图4。

2.5 微生物限度检查

1 g供试品中，需氧菌总数不得过103 cfu，霉菌和酵母菌总数不得过102 cfu，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出。见表2。

2.6 重金属检查

三批样品测定，见表3。砷斑与标准砷斑比较，见封三图5。

对制剂成品进行重金属、砷盐检查，根据三批样品测定结果，重金属含量均<10 ppm，砷盐含量均<2 ppm。

2.7 含膏量、黏附力检查

本品含膏量不得少于5.5 g/100 cm2；黏附力脱落时间不得<24 h。见表4。

3 讨论

冰红消肿膏在临床上多用于治疗多种骨骼创伤造成的肿痛，毒副作用相对西药较小，患者使用的顺应性好，对跌打损伤造成的肿痛有较好的治疗效果[5-6]，适用于跌打损伤、积血成瘀、积块不散、关节瘀滞之症，尤其适用于急性软组织损伤和急性滑膜炎的疼痛、肿胀、功能障碍之症。因此，我们探讨了冰红消肿膏的薄层色谱法定性鉴别，同时进行了微生物以及重金属检查，以保证制剂质量，提高疗效。膏药是传统中国医学中较为常用的制剂，古语有曰："膏药能治病，无殊汤药，用之得法，其响立应[7-8]。患处局部受到药物的直接刺激，使药力直达病所，治疗更有针对性。用膏药，无需经过肝肾代谢，只需经皮肤吸收发挥作用，疗效直达患处，通过渗透入皮肤，通经络、散寒湿，消肿痛等作用[9]。遵循中医辨证论治及中药的功效、主治与归经的原则，充分调动药物互相协调为用的效能。

随着科技的发展与申请院内制剂的需要，原始冰红消肿膏的质量标准已经远远不能满足我们的需要。安全有效的医疗机构配制的中药制剂能更好地为广大患者服务，有利于推动我国中医药事业的发展。膏药的组成十分复杂，其中不同中药成分互相作用，生成新物质，故选取代表性成分至关重要[10-11]。方中大黄为君药，大黄的抗菌谱较广，可广泛用于外科炎症性疾病，其中以大黄酸抗菌作用最强。清热解毒作用：大黄清热解毒的实质是清除组织和血浆内炎性介质[12]，栀子中含有环烯醚萜、有机酸、黄酮等化合物，具有抗炎、抗氧化、利胆等药理活性[13]，白芷中主要含有香豆素类、挥发油类、氨基酸类成分及微量元素等，具有抗肿瘤、抗菌、解热、镇痛、消炎等多种药理活性[14]，红花具有扩张冠状动脉、降血压、耐缺氧、抑制血小板聚集、免疫和抗炎镇痛等多种药理学功效[15]。

本实验采用薄层鉴别法对大黄、栀子、白芷进行了定性鉴别，建立了方中红花的显微鉴别，同时进行了微生物以及重金属检查，从而提高冰红消肿膏的质控水平。

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（收稿日期：2017-12-24）