弥勒市种公猪精液携带6种病毒现状调查

李冬艳

摘要：为全面了解弥勒市种公猪健康状况及精液品质，有效预防在公、母猪之间发生重要疫病的水平及垂直传播，确保人工授精所用精液品质，促进地方生猪养殖健康发展，我们对弥勒市养猪场和散养户种公猪携带猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、伪狂犬病病毒（PRV）、猪细小病毒（PPV）、乙型脑炎病毒（JEV）等繁殖障碍性疾病进行了调查。分3个批次采集了143份样品送往实验室进行DNA（或RNA）的提前及PCR（或R-PCR）扩增，通过琼脂糖凝胶电泳鉴定[1]，从105份规模饲养种公猪精液样品中未检出上述6种病毒核酸；从38份散养种公猪精液中检出PRV和PCV2核酸阳性各1份（来自不同个体），病毒总携带率为5.3%。应用酶联免疫吸附试验（ELISA）回顾检测以带毒精液人工授精所获子代的血清抗体，评估种公猪精液带毒对繁育子代（被检样本n=35）健康的影响，其中被测20日龄仔猪血清PRV抗体和PCV2抗体呈阳性的比例分别为20%和8.5%。针对种公猪带毒现状提出相应的疫病防控建议。

关键词：种公猪；精液；繁殖障碍相关病毒；PCR扩增

中图分类号：S855.3 文献标识码：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2018.04.010

本调查通过建立和应用PCR或RT-PCR方法，对弥勒市种公猪精液中可能携带的常见繁殖障碍性病毒进行灵敏检测，全面摸底调查当地种猪精液带毒状况，了解当地种公猪精液品质及健康状况，分析和评估养殖方式对精液品质及精液带毒对繁育仔猪的影响，确定当地生猪繁育管理的薄弱环节，为弥勒市生猪健康养殖的可持续发展提供种质保障，为进一步完善当地种公猪的养殖和防疫体系建立提供必要的科学依据。

PCR检测本次所采集到的样品总共143份，其中规模养殖的105份种公猪精液样品中未检出上述6种病毒核酸；分散养殖的38份种公猪精液中检出PRV和PCV2核酸阳性各1份（来自不同个体），病毒总携带率为5.3%。针对本次检出病毒核酸阳性数量不多的情况，回顾检查操作方法、试验材料、实验步骤等，没有发现任何错误之处，整个的实验检测过程科学合理，没有出现因实验不当造成检测结果异常的情况，因此本试验所获检测结果真实可信，能够真实反映当前弥勒市种公猪养殖种公猪携带繁殖障碍病毒的基本情况和疾病预防效果。

遂宁县检测的种公猪精液样品中也未检出阳性[2]，这和我市本次规模养殖种公猪精液检出结果基本接近，出现这样的结果，可能由于大环境免疫、管理措施得当，致使检出病毒阳性率较低甚至无。四川省精液样品，JEV阳性率也为0，跟我们检测结果一致，说明JEV在种公猪养殖中威胁较小。但血清学调查研究发现，猪可存在一定程度的JEV感染，这提示JEV感染不一定引起病毒分布于精液，可能与个体免疫力有差异、存在血睾屏障等因素有关。该报道中PCV2阳性率为2.38%，和我市分散养殖检出阳性率2.9%接近，表明PCV2的发生率相对较低，但阳性样品来自散养户，提示应加强对散养户的防疫监督力度。在防疫措施比较到位、管理规范的区域或规模养殖场，这6种病毒的携带率低，是正常现象。

本调查应用PCR技术检测种公猪精液，发现PRV和PCV2阳性各1例，但因受条件限制，未对PCR扩增产物进行克隆、测序及比对分析，以致不能确认病毒来源及变异的情况，也不能确定种公猪何时携带或感染相应的病毒。若能扩大样本数以及采样的区域范围，并应用检测灵敏度更高的实时荧光定量PCR，结果会更具说服力。

从应用ELISA对带毒精液配种产生的子代检测结果来看，20日龄仔猪血清存在一定程度的PRV和PCV2抗体阳性率，表明带毒精液有可能通过自然交配乃至人工受精方式对子代健康产生重要影响。笔者根据对带毒仔猪的母猪进行追踪了解，发现有3头母猪出现过流产情况，另有1头母猪出现不育症状，这4头母猪在产下带毒仔猪前未出现过流产、不育症状。这4头母猪此次受精前身体状况良好，受精后出现繁殖障碍，与本试验检测到所用精液阳性结果的情况基本一致。

本调查未发现规模养殖户种公猪携带6种繁殖障碍相关病毒，表明规模养殖户对生猪养殖防疫意识较高，按规定把疫苗接种和生物安全防護预防措施落实到位。规模养殖户从选址、圈舍建造、饲料使用、疾病预防措施到日常管理，都比较规范、科学，建议逐步减少种公猪的分散养殖。从检测结果来看，测出病毒携带的样品来自散养户。应该加强对农村散养种公猪的管理和规范养殖[3]。弥勒市仍有部分地区散养种公猪，虽可为农村发展生猪养殖提供一定便利，但难以实现对种公猪疫病的监控，建议在进行春秋“两防”猪瘟、蓝耳病及口蹄疫强制免疫时，加入对PRV和PCV2等其他繁殖障碍相关疾病的预防工作。

参考文献

[1] 张志，刘爽，张燕霞，等.猪精液中五种病毒的初步检测[J].动物医学进展，2012，33（7）： 112-115.

[2] 吴永刚.四川省部分地区公猪精液6种病毒性疾病的分子检测[D]，雅安：四川农业大学，2014.

[3] 李刚.猪精液冷冻保存技术研究[D].西安：西北农林科技大学，2005.