高 源 ,石 亮 ,尹海涛 ,张 健 ,寇 举 ,胡士鹏 ,张来宾 ,乔宏雷
(1.长春生物制品研究所有限责任公司,吉林 长春 130012;2.长春百克生物科技股份公司,吉林 长春 130012)
棒状杆菌是菌体形态呈直或微弯曲的革兰阳性杆菌,常一端比较粗大而呈棒状。在鲜血培养基上呈不透明或半透明、凸起、光滑、边缘整齐的菌落,大多数菌株呈β溶血,也有不溶血菌株。该菌广泛存在于自然界中,对人类和动物的易感性高低与菌株个体的致病力强弱有关。牛、羊、马、鹿、犬、兔、海狸鼠、家禽和人对棒状杆菌易感,实验动物中家兔最易感。棒状杆菌病的主要传染源是病畜,其排泄物和分泌物携带的细菌可污染饲料、饮水、垫草、用具及周围环境。该病主要经伤口和消化道感染,也可经呼吸道感染,多呈散发性,冬春季多发[1]。
吉林省某生物制品公司的实验家兔养殖区域饲养青紫蓝兔300多只,其中种母兔100余只。2017年3月初,在早上喂养时发现饲养间B栋有2只成年母兔死亡,D栋有1只成年公兔死亡,另有14只成年发病兔表现出食欲减退、逐渐消瘦、时有咳嗽、呼吸困难、流涕等临床症状。兔群中的乳兔、仔兔和青年兔均未发病。
随着病情发展,病兔陆续出现体表淋巴结肿大、化脓、破溃、流出白色牙膏状脓汁,随后结成硬痂的现象[2-3]。部分病兔在胸腔、肺、腹腔淋巴结及其他器官组织中发生化脓和干酪样病灶,此时可见慢性支气管炎症状,出现咳嗽、呼吸困难、流鼻液等症状[4],有的病例出现变形性关节炎(见图1、图 2)。
共解剖死兔3只,其病理变化基本相同。皮肤和淋巴结脓肿,切开脓肿流出淡黄色干酪样脓液。淋巴结的病变是由大小不一的灰色或灰绿色结节所构成,呈干酪样或灰浆状,形成同心环[5]。肺脏有肉样的变硬小叶,其中有绿色干酪样化脓灶。该种干酪样病灶由于钙质的沉积而呈灰浆状,同时还见于肝、脾、肾等器官[6]。
以脓液制备涂片,进行革兰染色镜检。镜下可见有多形态的、一端较粗大呈棒状的革兰阳性杆菌(见图3)。将病料接种于鲜血琼脂培养基,37℃培养 48 h,菌落呈 β 或 ɑ 溶血[7-9]。
图1 病兔腿部的X线检查结果(腿骨边缘肿大)
图2 病兔右腿部的骨X线检查结果(出现变形性关节炎)
图3 分离菌株的革兰染色镜检结果
根据发病情况、临床症状、病理剖检、实验室检查,综合诊断青紫蓝兔发生的疾病为棒状杆菌病。
在兔群中,对于体表淋巴结化脓且已破溃的病兔,可用2%高锰酸钾溶液或2%醋酸溶液洗涤外伤,在外伤处涂碘仿或红霉素[10];对症状严重的病兔,可用手术刀把腿关节的肿块割开,清除脓液,用过氧化氢溶液消毒,再涂抹碘酊,表面撒上抗菌药物进行包扎,每天换药1次,连用7 d[11]。
将表现一般临床症状的发病青紫蓝兔分成2群,一群采用氨苄青霉素进行治疗[12],按5~10mg/(kg·BW)肌肉注射,每天 1 次,连用 5 d;另一群采用庆大霉素进行治疗[13],按 5 mg/(kg·BW)肌肉注射,每天1次,连用7 d。
对症状严重的病兔采用头孢噻呋进行治疗,按 5 mg/(kg·BW)肌肉注射,每天 1 次,连用 3~5 d。对食欲不佳的个体可用复合VB注射液,每次0.5~1.0mL,每天2次,连用3~5 d。对未发病的母兔采用盐酸多西环素按300mg/kg拌于饲料中,连用 2 周进行药物预防[14]。
采用氨苄青霉素治疗5 d后的兔群,绝大多数病兔食欲增加,逐渐恢复健康,不再出现病兔及死亡情况,10 d后已基本完全康复。采用庆大霉素治疗7 d后的兔群,病情有所控制,但存在复发的情况,甚至出现病兔死亡的情况。综上表明,氨苄青霉素的治疗效果优于庆大霉素。
棒状杆菌和波氏杆菌均能引起肺脏形成化脓病灶[15]。鉴别诊断有以下几个要点:①波氏杆菌为革兰阴性菌,菌体形态比较小;棒状杆菌为革兰阳性菌,菌体一端膨大呈棒状。②波氏杆菌病形成的化脓灶比较大,被结缔组织包裹,结节内有淡黄色黏稠的乳脂样脓液。这样的结节还可发生在胸膜上[16];棒状杆菌病肺脏的结节内含干酪样化脓灶。③波氏杆菌病淋巴结无明显病变;棒状杆菌病的体表淋巴结肿大、化脓并形成溃疡[17]。
坏死杆菌是革兰阴性杆菌,菌体呈丝状;棒状杆菌为革兰阳性菌,菌体呈棒状。坏死杆菌病的脓液没有颜色,但有恶臭味[18];棒状杆菌病的脓液为灰绿色干酪状,没有臭味。坏死杆菌病除肺脏等实质器官出现脓肿和干酪样坏死外,伴有口腔黏膜坏死,而这是棒状杆菌病所没有的症状[19]。
管好饲料和水源,防止被棒状杆菌污染。做好兔舍清洁工作,做到经常性消毒。消除兔舍、兔笼的尖锐物体,防止发生外伤感染,一旦发生外伤立即涂抹碘酊[20]。发现病兔要及时进行隔离观察和治疗。
氨苄青霉素为半合成广谱青霉素,属氨基青霉素类,其抗菌作用机制与青霉素相同,都是通过抑制细菌细胞壁黏肽合成来发挥抗菌作用[21]。氨苄青霉素特点是广谱、不耐青霉素酶,其对革兰阴性菌的作用比青霉素强。氨苄青霉素对棒状杆菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌、沙门菌属、痢疾志贺菌、脑膜炎奈瑟菌和不产酶的淋病奈瑟菌等革兰阴性菌有很强的抗菌活性。
庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素,主要用于治疗细菌感染,尤其是革兰阴性菌引起的感染。庆大霉素的抗菌机理是其可抑制细菌蛋白质合成[22]。庆大霉素在临床应用时表现出一定的副作用,如抽搐、皮疹、发热和全身痉挛等,发生率较多的有听力减退、耳鸣或耳部饱满感 (耳毒性)、血尿、排尿次数显著减少或尿量减少、食欲减退、极度口渴(肾毒性)、步履不稳、眩晕(耳毒性,影响前庭;肾毒性),因此,在使用庆大霉素时一定要严格遵守用药剂量。