乙肝表面抗原/梅毒联合检测试纸条在血液筛查中的应用研究

范锡岭

(河南省辉县中医院，河南 新乡 453600)

2010年全球乙型肝炎(简称“乙肝”)表面抗原阳性人数约有2.48亿，已成为全球性重大公共卫生问题，其中我国所占比例为45%[1]。我国梅毒疫情在甲乙类传染病发病中排序仅次于乙肝[2]。血液传播是乙肝与梅毒最常见的传播途径，因此在献血前对血液进行严格有效的筛查可以降低乙肝与梅毒的感染率。笔者通过采用乙肝表面抗原(HBsAg)/梅毒联合检测试纸条对血液样本的检测，发现可有效提高HBsAg、梅毒的检出率，现报道如下。

1 临床资料

选取2015年7月至2016年12月新乡市符合《献血者健康检查要求》(GB18467-2011)规定及献血前采用HBsAg试纸条筛查合格的血标本20 000例。经过实验室HBsAg-ELISA和TP-ELISA法检测HBsAg或梅毒阳性血标本176份为研究对象(TP-ELISA和HBsAg-ELISA检测结果OD≥0.8×Cutoff为阳性)，通过HBsAg-ELISA检测出HBsAg阳性为62例，TP-ELISA检测出HBsAg阳性者114例。

2 方法

2.1 试剂与仪器 ①试剂：(TP)ELISA试剂盒(海雅吉生物科技有限公司)，梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(胶体金法)(广州健仑生物科技有限公司)；HBsAg诊断试剂盒(法国生物梅里埃和厦门英科新创)；HBsAg/梅毒联合检测试纸条(英科新创科技有限公司)。②仪器Hamilton STAR全自动加样器及FAME2430酶联后处理系统(瑞士费米公司)，移液器(法国吉尔森公司)，RaytoRT-6100酶标分析仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。

2.2 检测方法 ①采用抗TP酶联免疫诊断试剂盒与HBsAg酶联诊断试剂盒分别检测血标本中抗TP和HBsAg。②采用HBsAg/梅毒联合检测试纸条和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)，对实验室抗TP-ELISA法结果阳性血浆标本进行检测。③采用HBsAg/梅毒联合检测试纸条和HBsAg金标试剂检测实验室ELISA法HBsAg阳性的血浆标本。④TP-ELISA与HBsAg-ELISA检测结果为阳性血浆标本，各取20份并按1∶1混合，分别采用HBsAg/梅毒联合检测试纸条与HBsAg试纸条对其进行检测。以上实验条件为：加样量60 μL，观察时间10 min，反应温度15℃。

2.3 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计分析，计数资料以百分率(%)表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

3 结果

(1)HBsAg/梅毒联合检测试纸条和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)结果比较 TPPA阳性率为90.35%(103/114)，HBsAg/梅毒联合检测试纸条阳性率为87.72%(100/114)，两者阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 114例患者HBsAg/梅毒联合检测试纸条和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验结果比较(例)

(2)HBsAg金标试剂检测和HBsAg/梅毒联合检测试纸条检测结果比较 HBsAg金标试剂检测阳性率为82.25%(51/62)，HBsAg/梅毒联合检测试纸条阳性率80.65%(50/62)，两者阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 62例患者HBsAg/梅毒联合检测试纸条和HBsAg金标试剂检测结果比较(例)

(3)HBsAg/梅毒联合检测试纸条对混合血液样本检测结果比较 采用HBsAg/梅毒联合检测试纸条对20份单一抗-TP阳性与单一HBsAg阳性两者的混合血液样本进行检测，试纸条上出现2条相应检测线的阳性反应；采用HBsAg金标试纸条对混合血样标本进行检测，试纸条上仅出现1条相应检测线的阳性反应。

4 讨论

乙肝是我国最常见的传染性疾病之一，我国HBsAg阳性患者占全国人口的10%以上。在乙肝患者体液中均可以检出HBsAg，尤其血液检出率较高[3]。乙肝不仅具有较强的传染性，并且可能发展成肝硬化、肝癌，严重威胁人们的生命安全。梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种感染人体后引起的系统性、慢性传染性疾病，可以引起机体多系统、多脏器的损害，威胁生命[4]。近年来，我国梅毒感染率逐年上升，与乙肝并列成为血液及性传播的主要疾病。随着医学的发展，血液制品在临床中应用逐渐广泛，成为重要的医疗手段之一，同时用血安全问题也越来越受到人们的关注[5]，尤其是经血液传播的传染性疾病。在采集血液前进行严格的筛查是降低、阻断乙肝和梅毒传播的关键环节。

江素君等[6]采用单一HBsAg试纸条在献血前进行初筛，不合格率为0.49%；对于TP初筛不合格献血者采取隐私保密措施，动员其采集样本。TPPA是目前检验科进行梅毒检测的金标准[7]，HBsAg金标试剂检测是检验科检测HBsAg的主要手段，但由于TPPA与HBsAg金标试剂操作流程繁琐复杂，仅用于实验室检测。本研究中收集的20 000例血液标本均符合献血者健康要求及献血前采用HBsAg试纸条筛查合格，通过HBsAg-ELISA检测出HBsAg阳性为62例，TP-ELISA检测出HBsAg阳性者114例。笔者通过对176份ELISA阳性血液样本进行HBsAg/TP联合检测试剂条、TPPA、HBsAg金标试剂平行检测分析，发现HBsAg/梅毒联合检测试剂条对HBsAg、梅毒的检出阳性率分别与HBsAg金标试剂检测结果相同。同时，HBsAg/梅毒联合检测试剂条能够准确检测出混合血液中的阳性反应。因此，HBsAg/梅毒联合检测试剂条不仅可以准确有效地检出梅毒阳性、HBsAg血液标本，并且操作方便简单，可用于献血前的血液筛查。