生活饮用水微生物检验方法标准研究

高宏军

摘要：随着社会经济的高速发展以及工业化、城市化进程的推进，水资源污染问题越来越严重，与此同时，人们对于生活饮用水的水质要求也越来越高。目前，我国的饮用水中存在大量的微生物，其中，部分微生物对人们的身体健康有一定的威胁，因此，饮用水必须严格地进行消毒杀菌处理，并应经过严格的微生物检测，检测达标后方可输配给终端用户。

关键词：生活饮用水、微生物检验

生活饮用水微生物实验室检验对人们的饮水安全有着极为重要的作用，通过科学、有效的微生物实验室检验方法，可保证水源的水质合格、水处理达标。但是，在生活饮用水微生物实验室检验过程中，若存在不合理之处，则会一定程度地影响微生物实验质量，进而也容易造成实验结果误差，无法给生活饮用水的安全提供有力的保障。

一、生活饮用水微生物检验的阐述

生活饮用水微生物实验室检验主要是指为了保证人们的饮水安全，对经过沉淀、过滤、加氯消毒等一系列处理后的饮用水进行的一项微生物检验方法。根据我国生活饮用水水质标准（GB5749-85）中的规定，其饮用水中的微生物含量不得超过如下数字：总大肠菌群≤3个/L，细菌总数≤100个/mL，粪大肠菌群于100mL水样中不得检出等等。目前常见的生活饮用水微生物实验室检验方法包括有：滤膜法、酶底物法、多管发酵法、平皿计数法等，在实际的生活饮用水微生物检验中，检验人员根据微生物类型的不同，所选择的实验室检验方法也会有所不同。 而生活饮用水微生物的实验室检验步骤大多如下。1.样本采集。具有代表性的采集需要检验的生活饮用水水样，采集过程中必需注意无菌操作，且要保证采集的水样能够在采集后的 4 h 之内进行检验，以免其因置放时间过长而发生变化或污染。2.实验室检验。根据所要检验的水中微生物类型的不同，选择最适宜、最准确、最科学的实验室检验方法。3.结果分析。通过对生活饮用水中各种微生物及时、有效的实验室检验结果分析，便可得知饮用水中微生物的实际情况，这对早期处理或控制微生物超标或含有致病性微生物的生活饮用水带来的十分积极的作用。

二、检验总大肠菌群的方法

首先，多管发酵法：测定总大肠菌群的多管发酵法最为适合居民日常生活饮用水以及水源的检测。测试的仪器以及检验步骤如下：1.多管发酵法应用的仪器：多管发酵法中需要使用的仪器包含了：天平、分度吸管、培养箱、锥形瓶、小倒管、冰箱、显微镜、平皿、试管、载玻片。2.检验步骤：（1）取出10ml的水样放到10ml的双料乳糖蛋白胨的培养液里面，然后取出1ml的水样放到10ml的单料乳糖蛋白胨培养液里面，再取出1ml的水样放到9ml的灭菌生理盐水里面，均匀混合后吸取出1ml（也就是0.1ml的水样）加入到10ml的单料乳糖蛋白胨培养液里面，每一种稀释度都要接种5管。把已经处理好的饮用水，还要经常的做出检验，每天都定时检验一次，还可以直接接种5份的10ml的水样进行双料培养基，每种10ml。（2）水源如果检验出污染严重，就需要加大稀释度，每种标准稀释度都要接种5管，总共接种水样为15管。接种不足1ml的水样时，就需要10倍的稀释，取其中的1ml进行接种，然后逐次增稀，换用带有灭菌刻度的吸管。（3）将接种好的试管放置在恒温的培养箱中，经过24个小时的培养，如果没有产生出气产酸，就说明没有总大肠菌群，但是如果产出了酸产气，就可以继续的进行检测。（4）对产出的酸产气试管中，转种到伊红美蓝琼脂板上，在恒温培养箱中进行24小时的培养，查看菌落形态，将其中具有特征的菌落作革兰氏染色、证实试验以及镜检。（5）经过了染色镜确定了是革兰氏阴性无芽孢杆菌，然后接种乳糖蛋白胨进行培养，防止恒温箱中培养24个小时，产出了酸气者，就肯定是有总大肠菌群。其次，滤膜法：总大肠菌群检测的滤膜法一般都是用微孔径的滤膜进行水样的过滤，把过滤膜贴附在乳糖上进行恒溫的24小时培养，将形成的菌落中的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌然后对饮用水中的总大肠菌群做出检测。1.培养基与试剂：滤膜法选用培养基与试剂主要是品红亚硫酸钠培养基以及乳糖蛋白胨的培养液。2.滤膜法使用的试验仪器：滤器、滤膜（孔径0.45微米）、抽滤设备、天平、分度吸管、培养箱、锥形瓶、小倒管、冰箱、显微镜、平皿、试管、载玻片、无齿镊子。3.试验步骤：（1）灭菌。主要是分为滤膜滤器两种灭菌方法。（2）过滤水样。使用无菌镊子将灭菌滤膜的边缘部分夹取起来把粗糙的表面朝上，然后放在灭菌好的滤床之上，将滤器固定好，往滤器中加入100ml的水样，将滤器的阀门打开进行抽滤。（3）培养。过滤完水样之后抽气5秒后，将滤器阀门关上，使用灭菌镊子移放到品红亚硫酸钠培养基之上，滤膜截留好的细菌面要朝上，相互紧贴不可以存有气泡，倒置平皿放入恒温箱中进行24小时的培养。

三、多管发酵法与滤膜法的对比

多管发酵法是采用MPN进行实验结果的表示，这是以统计学中的理论对水体中的大肠杆菌密度以及卫生质量的评估标准的方法一样，但是可以进行反复的检测，能够发现结果要比实际的数值大，但是反复的实施检测，那差异会因此而变小，其中细菌的含量值估算，绝大部分是因为稀释度又显示着阳性也会显示着阴性，所以实验设计时，一定要根据水样检验的实际需求来制定重复的数量，应该根据数据要求的准确度来制定。多管发酵法更实用于多种类型的样品当然也包括了底泥，可惜操作的步骤却又繁琐，使用的时间又过于的长；滤膜法就比较适用于那些包含着少量杂质的水样，可是操作的方法却相对的简单快捷，所以多管发酵法就可以被广泛的使用，并且是采用最多的方法，并且数据准确度又特别高。多管发酵法相对于滤膜法的数据结果实施统计学的比较，滤膜法的结果就比较的精密，两种的测试方法得到的结果能够提供出水质的基本情况，但是检验数值却不同，所以进行水源的水质做出检测过程中，就应该预期到大部分的滤膜数据都会遗落在多管发酵法的试验的界限内。

总之，相关的实验室检验人员，应该加强对我国当下生活饮用水微生物实验中容易出现的质量问题进行详细分析，并采取积极、科学、有效的措施控制微生物实验质量，以保证质量的稳定性与良好性，进而为我国生活饮用水的检测与正常、安全使用奠基坚实地基础。

参考文献：

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